【最新】实验测定指标及仪器.doc

1总糖的测定(手持糖量仪GB/T 12295-1990)采用GB T6194 —1986 斐林试剂法测定总糖含量1）试剂菲林试剂甲液：称取69.3g硫酸铜晶体，用蒸馏水溶解，定容至1000ml菲林试剂乙液：称取346g酒石酸钾钠，100g氢氧化钠，用蒸馏水溶解定容至1000ml次甲基蓝溶液：1g次甲基蓝溶于100ml水葡萄糖6mol/L盐酸溶液②甲基红指示剂：0.1%（体积分数）乙醇溶液称取0.1g甲基红溶于100ml 60%（体积分数）乙醇中③200g/L（体积分数）氢氧化钠溶液2）仪器水浴锅，pH计2 测定原理在沸热条件下，用还原糖溶液滴定一定量的费林试剂时将费林试剂中的二价铜还原为一价铜，以亚甲基蓝为指示剂，稍过量的还原糖立即使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝3 仪器设备a. 告速组织捣碎机；b. 电热恒温水浴；c. 1000W调温电炉；d. 玻璃仪器：200ml容量瓶；50ml碱式滴定管4 试剂配制4.1 费林试剂甲：称取硫酸铜（C USO4 .5H2O, 分析纯）34.6g溶于水中，稀释至500ml,过滤，贮于棕色瓶内4.2 费林试剂乙：称取氢氧化钠50g和酒石酸钾纳（ 分析纯 ）138g溶于水中，稀释至500ml，用石棉垫漏斗抽滤。

4.3 转化糖标准溶液：称取9.5蔗糖（分子纯）用水溶解后转入1000ml容量中，加入6MHCl（分析纯）10ml，加水至100ml在20～25 0C下放置三天或在25 0C保温24h，然后用水定溶（此为酸化的1%转化糖液，可保存3～4个月）测定时，取1%转化糖液25.00ml放入250ml容量瓶中，加入甲基红指试剂一滴，用1MnaOH溶液中和后用水定溶，即为1ml/ml转化糖标准溶液4.4 亚甲基蓝溶液：称取0.5g亚甲基蓝(分析纯)溶于100ml水中4.5 乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌[Zn(OAC) 2 . 2H2O,分析纯]溶于水中，加冰乙酸3ml,稀释至100ml4.6 亚铁氢化钾溶液：称取10.6g亚铁氢化钾[K 4Fe(CN)6 .3H2O,分析纯]溶于水，稀释至100ml5 样品提取液制备取待侧样品适量，洗净，用不锈钢刀将可食部分切成适当小块充分混合后，按四分法取样称取100g鲜样加入等重量的水，放入组织捣碎机中捣成1：1匀浆，有些材料匀浆比例可适当调整，多汁果蔬类可直接捣浆称取匀浆25.0或50.0g（相当于样品12.5或25.0g）放入150ml烧杯中，含有机酸较多的材料加0.5～2.0g粉状CaCO 3调至中性（广泛试纸检试）。

用水将样液全部转入250ml容量瓶中，并调整体积约为200ml置80±2 0C水浴保温30min,其间摇动数次，取出加入乙酸锌溶液及亚铁氢化钾溶液各2～5ml,冷却至室温后，用水定溶，过滤备用6 还原糖测定6.1 费林试剂的标定取费林试剂甲、乙各5.00ml或在测定前先等体积混合后取10.00ml混合液于250ml锥形瓶中，放入玻璃住4～5粒，先加入比预测（按6.2进行预测）仅少0.5ml的1ml/ml转化糖标准液将此混合液置1000W电炉上加热，使其在2min左右沸腾，准确煮沸2min,此时不离开电炉，立即加入0.5%亚甲基蓝指示剂6滴，并继续以每4～5s的滴速滴加标准糖液的毫升数 V1标准糖浓液〔mg/ml〕,即得10ml费力试剂所相当的糖的毫克数注：无色的还原型亚甲基蓝极易被空气的氧所氧化，应调节电炉温度使瓶内溶液始终保持沸腾状态，液面覆盖水蒸气不与空气接触整个滴定过程锥形瓶不能离开电炉随意摇动6.2 预测取费林试剂甲、乙各5.00ml或10.00ml混合液于250ml锥形瓶中，有滴定管加入待定测糖液约15ml,在电炉上加热至沸，约费15s后迅速滴加待测糖液，至呈现极轻微的蓝色为止，此时加入0.5%亚加基蓝指示剂6滴，继续滴加待测糖液，直至溶液蓝色褪尽为止，记下待测糖液的用量 V2(毫升数)。

6.3 准确测定取沸林试剂甲、乙各5.00ml或10.00ml混合液加入锥形瓶中，由滴定管加入比预测仅少0.5ml的待定测糖液，并补加 V1-V2毫升数（标定沸林试剂所消耗的标准糖液毫升数 V1减去预测消耗的待测糖液毫升数 V2，即为应补加水的毫升数），使其与标定沸林试剂时的反应体积一致以下按沸林试剂标定同样操作，继续滴至终点前后沸热时间须在3min左右待测糖液消耗量应控制在15～50ml 范围内，不能大于标定沸林试剂所用标准糖液体积 V1否则应增减称样量重新制备待测液7 可溶性总糖测定取已经制备的待溶液100ml于200ml容量瓶中，加6MHCl10ml在80±2 0C水于加热10min,放入冷水槽中冷却后，加甲基红指示剂二滴用6MnaOH溶液中和，用水定溶以下步骤同6.2、6.38 结果计算8.1 计算式a. 还原糖（%）按式（1）计算：还原糖（% ，以转化糖计）=b. 可溶性总糖（%）按式（2）计算：可溶性总糖（%）以转化糖计）=式中： W----样品称重，g;G----10ml沸林试剂相当的转化糖，ml；V----准确滴定时所用待测液的体积，ml;A----稀释倍数；250----容积体积，ml;1000---有毫克换算为克。

c. 非还原糖（%）按式（3）计算：非还原糖（%）以蔗糖计）=（可溶性总糖－还原糖）×0.95…………（3）式中：0.95----由转化糖换算成蔗糖的因数8.2 结果表示测定结果计算到小数点后二位，两次平均试验结果相对相差：含量在5%以下的不超过3%；含量在5～10%的不超过2%；含量在10%以上的不超过1%鲜洋以鲜基表示，风干样以风干基表示注：还原糖及可溶性总糖也可用葡萄糖表示，沸林试剂须另用葡萄糖标定，非还原糖用转化糖换算成蔗糖形势表示2.Vc 含量测定2,6-二氯酚靛酚(GB/T5009.159-2003)1)2，6二氯酚靛酚染料，配制成每毫升所含维生素C的毫克数（T值）；2%草酸2000ml；1%草酸2000ml2）组织搅碎机；10m量筒1个；5ml移液管2根；酸式滴定管1个；50ml烧杯两个；50ml三角烧瓶4个；漏斗2个；漏斗架1个；滤纸2张；洗耳球1个；玻璃棒（所有仪器使用前清洗，烘干备有）实验步骤：1. 取300~500g新鲜水果，置于1000ml烧杯内，称重，精确至0.01g2． 将样品倒入组织搅碎机，加入等量2%草酸（w/v），加盖旋紧，匀浆2~5min3． 取出匀浆物质（以上统一进行）4. 用50ml烧杯称取20g匀浆物质，精确度1%，编号，记录。

5. 将称取的匀浆物质倒入具塞量筒，用1%草酸反复洗涤烧杯（3次），其洗涤液倒入具塞量筒，并用1%草酸定容到100ml6. 加塞后将匀浆物质与1%草酸充分混合，静置10min7. 取上液过滤8. 用5ml移液管吸取5ml滤液置于三角烧瓶内，加入5ml1%草酸（2个平行样品）；用5ml移液管吸取5ml蒸馏水，加入5ml1%草酸（2个空白对照）9. 2，6二氯酚靛酚染料滴定至终点（淡粉红色，15s不褪色），记录染料消耗量10. 计算每100g样品中维生素C的含量（ml）及平行样品误差范围，公式如下：维生素C含量（ml/100g）=（V1-V2）×TW×1003.总酸的测定采用GB T12456-2008 酸碱滴定的指示剂法测定总酸含量1） 仪器碱式滴定管 250mL锥形瓶 25mL移液管2） 试剂1% 酚酞乙醇溶液称取1g酚酞,用95%乙醇溶解并定容到100mL.0.1mol/L NaOH标准溶液 称取4g NaOH,加水约100mL,溶解后移入1000mL容量瓶中,用蒸馏水定容到刻度,贮存于橡胶塞试剂瓶中.4 呼吸强度的测定:静置法0.4N氢氧化钠、0.3N草酸、饱和氯化钡溶液、酚酞指示剂、凡士林。

干燥器、滴定管架、铁夹、25ml滴定管、150ml三角瓶、500ml烧杯、φ8cm培养皿、小漏斗、10ml移液量管、洗耳球、100ml容量瓶、万用试纸、天平用移液管吸取0.4N的NaOH20ml放入培养皿中，将培养皿放进呼吸室，放置隔板，放入1斤左右果蔬，封盖，测定1小时左右（要记录测量具体时间，放置到快要下课为止）取出培养皿把碱液移入锥心瓶中（冲洗3—5次），加饱和BaCl 25ml和酚酞指示剂2滴，用0.3N草酸滴定，用同样方法作空白滴定5 失水率失水率/ % = (失重质量/ 原质量) ×1006 好果率好果率/ % = (完好果数/ 检查总果数) ×1007.可溶性固形物的含量步骤：吸取试液10.00于100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀国标法：重量法）吸取上述稀释液5.00ml置于已烘至恒重的称量瓶中移入（103±2）℃电热恒温干燥箱中，将瓶盖斜置于瓶边4h后，将瓶盖盖好，取出，移入干燥箱内，冷却至室温（约需0.5h），称重再烘0.5h，冷却，称量，直至两次称量不超过1mg即为恒重计算：样品中可溶性固形物的含量按下式计算X2=[m2-m1/（10/100）×5]×100%8果实硬度果实硬度计？？9多酚氧化酶活性1) 试剂：0.025mol/L磷酸钾缓冲液（pH7.2）；0.15mol/L儿茶酚溶液；10mmol/LTris-HCl溶液（pH8.3）；硫酸铵2）仪器：组织匀浆机，漏斗，滤纸，分光光度计。