DNA的银染PPT课件.ppt

聚丙烯酰胺凝胶中聚丙烯酰胺凝胶中DNA的银染的银染n 原理 在弱酸环境下银离子可以与在弱酸环境下银离子可以与DNADNA结合，碱性甲结合，碱性甲醛溶液可以将结合的银离子还原成金属银，显影成醛溶液可以将结合的银离子还原成金属银，显影成DNADNA区带n          实验材料及试剂实验材料及试剂实验材料及试剂实验材料及试剂            材料：材料：材料：材料：DNADNA非变性非变性非变性非变性PAGEPAGE胶胶胶胶            试剂及其功能：试剂及其功能：试剂及其功能：试剂及其功能：            10%            10%乙醇乙醇乙醇乙醇                        1 1%%硝酸硝酸硝酸硝酸            0.2%            0.2%硝酸银硝酸银硝酸银硝酸银                        显色液（显色液（显色液（显色液（3 3%%   NaNa2 2COCO3 3，，，，1%1%甲醛，新鲜配制）甲醛，新鲜配制）甲醛，新鲜配制）甲醛，新鲜配制）            3%            3%乙酸乙酸乙酸乙酸电泳完毕后，撬开玻璃板，将粘有凝胶的玻璃板置于塑料盘电泳完毕后，撬开玻璃板，将粘有凝胶的玻璃板置于塑料盘（不要碰凝胶表面！）（不要碰凝胶表面！）用蒸馏水漂洗两次，并取出玻璃板用蒸馏水漂洗两次，并取出玻璃板去水后，用去水后，用10%乙醇进行凝胶固定乙醇进行凝胶固定 10 min，轻摇，轻摇去乙醇，水洗、加入去乙醇，水洗、加入1%硝酸，轻摇硝酸，轻摇5min吸出硝酸，用蒸馏水漂洗吸出硝酸，用蒸馏水漂洗2次次n          实验操作及注意事项实验操作及注意事项实验操作及注意事项实验操作及注意事项（下列加液量以刚好覆盖凝胶为宜）（下列加液量以刚好覆盖凝胶为宜）   加入加入0.2%硝酸银溶液，轻摇硝酸银溶液，轻摇20min蒸馏水漂洗蒸馏水漂洗3次次去水后，加入显色液，在非直射光线下观察显色去水后，加入显色液，在非直射光线下观察显色观察区带出现，效果最佳时移除显色液观察区带出现，效果最佳时移除显色液加入加入3%乙酸，轻摇乙酸，轻摇5min移除移除3%的乙酸溶液，的乙酸溶液，10%乙醇洗涤乙醇洗涤1次次观察结果观察结果 。