尿中δ—氨基—γ—酮戊酸(δ—ala)的测定.ppt

[临床意义 ]铅吸收或铅中毒时，尿中δ-氨基-γ-酮戊酸（δ-ALA）的含量增高，故测定尿中δ-ALA的含量，有助于了解铅吸收和铅中毒的诊断特异性，灵敏性均较差 ——乙酸乙酯萃取—对二氨基苯甲醛基比色法尿中δ-ALA + 乙酰乙酸乙酯 吡咯化合物（经乙酸乙酯提取）+显色剂（对二甲氨基苯甲醛) →红色化合物100℃PH=4.6l 分光光度计；l 水浴锅，l 电炉；l 离心机(1500-2000r/min)；l 具塞比色管10m1 20支；l 移液管2m1 1支；l 吸管10m1 4支、5m1 1支、2m1 2支；l 离心管10m1 10支 l 乙酰乙酸乙酯；l 乙酸乙酯；l 醋酸盐缓冲液；l 对—二甲氨基苯甲醛显色剂 ；l ALA标准溶液；l 标准色列制备与标准曲线绘制 l 尿样测定：测定前须用比重计测定尿比重 试剂管号012345样品管空白管ALA标液（ml）0.00.10.30.50.71.0尿样 1.0尿样1.0蒸馏水（ml）2.01.91.71.51.31.01.01.0乙酸缓冲液（ml）2.0乙酰乙酸乙酯（ml ）0.4乙酸缓缓冲 液0.4混匀，沸水中加热10分钟，冷却至室温乙酸乙酯（ml）4.0加塞振摇1分钟，静置分层离心5分钟钟提出液2ml于另具赛比色管中，加2ml显色剂，加塞振摇，静置10分钟分光光度计 ，波长554nm ，零管参比乙酸乙酯酯参比1．标准曲线的绘制2．样品管吸光度减去尿样空白管吸光度，查标准曲线得样品管中ALA含量(μg)3．计算公式：（1）尿样比重在正常范围（1.010-1.035）内尿中 ALA(mg／L)=样品管中 ALA含量(μg) （2）尿样比重不在正常范围内尿中ALA(mmo1／L)= × ×0.0076 样品管含量（μg ）1（尿样） 1.020-1.000 尿比重-1.000 • 乙酸乙酯、乙酰乙酸乙酯最好为近期产品。

显色剂宜新鲜配制• 加入显色剂后，静置10分钟，应在半小时内完成比色• 尿样易腐败，可导致 pH增高，影响测定结果如不能及时测定，应将尿样保存在冰箱中• 乙酸乙酯、乙酰乙酸乙酯最好近期产品，显色剂宜新鲜配制• 参比液有两种：标准色列：零管样品管：乙酸乙酯。