革兰氏染色实验原理.docx

革兰氏染色的实验原理• G+细胞壁的网状结构致密，交联度高，用乙醇处置后，发生脱水作用，肽聚 糖层孔径缩小，透性降低，故细菌仍保留初染时的紫色• G—肽聚糖层较薄，交联度低，含较多类脂质，故用乙醇处置后，类脂质被溶 解，细胞壁孔径变大，通透性增加，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，细 胞被脱色，经沙黄复染呈红色涂片固定T结晶紫初染（碱性）-碘液媒染-乙醇（丙酮）脱色-番红复染（碱性）崗定I结剧養初疑II滋％ifl卵脱也I振李亚氏梁色反廐鼻同，可以把细菌莎总囲太类:- 覃兰氐卩曰性菌 G+- 草里氐网性前 G-♦♦♦原理:当用结晶紫初染后,所有细菌都被染成初染剂的兰紫色，碘作为媒染剂，它能与 结晶紫结合成结晶紫-碘复合物，从而增强了染料与细菌的结合力当用脱色剂■舦处置时■两类细菌的脱色成效是不同的革兰氏阳性细菌的细胞壁要紧有舦聚糖 形成的网状结构组成，壁厚，类脂含量低，用酒精脱色时细胞壁脱水，使舦聚糖 层的网状结构孔径缩小，透性降低，从而使结晶紫碘复合物不易被洗脱而保留在 细胞内，经脱色和复染后仍保留初染剂的兰紫色革兰氏阴性细菌那么不同"由 于其细胞壁舦聚糖层较薄，类脂含量较高，，因此当脱色处■时，类脂质被酒精 溶解，细胞壁透性增大，使结晶紫-碘复合物比较容易被洗脱岀来，用复染剂复 染后，细胞被染上复染剂的红色。

♦♦实验步骤：1、制片涂片一干燥一固定2、初染滴加结晶紫染色1—2分钟，水洗;3、媒染用碘液冲去残水，并用碘液覆盖1分钟；4、脱色滴加 95%酒精脱色，25-30秒，当即水洗；5、复染 用番红液复染约2分钟，水洗；6、镜检 干燥后，用油镜观看细菌：细菌是一种具有细胞壁的单细胞微生物，在适宜条件下，能进行无性二割裂繁衍，其 形态和结构相对稳固一样体积微小，通常需要借助光学显微镜才能看到，其测量单位用微 米表示。