黄芪多糖对斑秃患者PBMC中Th1Th2细胞因子 转录因子T betmRNA表达的调节作用.pdf

＊广东省科技厅资助课题( 编号: 2002c 3110502)黄芪多糖对斑秃患者 P B M C 中 T h 1/T h 2型细胞 因子 、 转录因子 T- b e t m R N A 表达的调节作用＊朱培成 禤国维 陈达灿 范瑞强广州中医药大学第二临床医学院( 广州 510120)【 摘要】 目的 探讨黄芪多糖( A S P ) 对斑秃患者 P B M C中 T h 1/T h 2型细胞因子、转录因子 T-b e t mR N A表达的调节作用 方法 用逆转录 - 聚合酶链反应( R T-P C R )分别检测 8例轻型斑秃、12例重型斑秃患者及 10例正常人外周血单一核细胞( P B MC )经 A P S 刺激后 T h 1型细胞因子( I F N-γ , I L-12) 、T h 2型细胞因子 I L-10及 转录因子 T-b e t m R N A的表达状况 结果 与健康对照及自身对照组比较, A P S 与 P H A共同刺激斑秃患者 P B -MC后可显著下调 T h 1型细胞因子( I F N- γ , I L-12) 及转录因子 T-b e t 基因表达( P0. 05) ; 重型斑秃患者 P B M C 中 T h 1型细胞因子 γ 干扰素 、白介素 12及转录因子 T-b e t 基因表达水平均显著高于正常对照组 ( P<0. 05) ; 还显著高于轻型斑秃患者 ( P<0. 05) 。

所有斑秃患者 T h 2型细胞因子 I L-10基因表达水平显著下调 ( P<0. 05) 斑秃患者表现为 T h 1型反应特征 ,重型斑秃尤为突出 黄芪多糖 ( A P S ) 可下调轻 、重型斑秃患者 P B MC 中 T h 1型细胞因子和转录因子 T- b e t 基因表达水平 ,与正常对照组比较 : γ 干扰素及转录因子 T-b e t 基因表达水平显著下降 ( P<0. 05) ,能上调 T h 2型细胞因子 I L-10基因表达 ,但仍低于正常对照组 ( P< 0. 05) 与自身对照组比较 : A P S尽管可显著下调重型斑秃患者 T h 1型细胞因子和转录因子 T- b e t 基因表达水平 ( P<0. 05) ,但仍高于正常对照组 ( P< 0. 05) 2. 2 相关性分析 γ 干扰素与转录因子 T-b e t 呈高度正相关 ( r =0. 806, P<0. 001) ;γ 干扰素与 I L-12呈正相关 ( r =0. 792, P<0. 001) ; γ 干扰素与 I L-10无明显相关性 ( P=0. 556) ; I L-10与 I L-12无显著相关性 ( P=0. 157) ; T-b e t 与 I L- 12呈显著正相关 ( r =0. 693, P<0. 001) ; T-b e t 与 I L-10无明显相关性 ( P= 0. 439) 。

3 讨论本研究显示斑秃患者 P B MC 在 P H A刺激下 所有斑秃患者 γ 干扰素与 T-b e t 基因表达显著上调 ( P< 0. 05) , T h 2型细胞因子 I L-10基因表达水平显著下调 ( P< 0. 05) ,呈 T h 1型反应特征 ,重型斑秃尤为严重 转录因子 T-b e t 及 T h 1型细胞因子基因表达过度可能是重症斑秃的主要机制之一 由于 T-b e t 与T h 1型细胞因子 ( γ 干扰素 、I L-12) 呈显著正相关 ( P< 0. 001) ,因此 T- b e t 基因过度表达可能是斑秃患者出现异常 T h 1型反应的主要机制 T-b e t ( T-b o xe x -p r e s s e di nTc e l l s ) 是 T-b o x 家族的新型转录因子 ,选择性地表达于 T h 1型细胞表面 , 在 T h 1型细胞的分化中起决定性作用[ 4]在 C r o h n 病患者中 T h 1型细胞因子如 γ 干扰素的表达升高 ,肠道上皮黏膜固有层细胞胞浆及胞核中 T- b e t 均强表达 ,而 T-b e t 基因敲除的T 细胞不能介导 T h 1相关性结肠炎 ( C r o h n 病 )[ 6]。

由于 T- b e t 基因是调控 T h 1/T h 2分化的重要因素 因此抑制转录因子 T-b e t 或 T h 1细胞因子基因表达有望成为斑秃治疗新的策略和靶位 黄芪多糖 ( A P S , 50μ g /m l ) 与 P H A ( 10μ g /m l ) 共同·1686·Gu a n g d o n gMe d i c a l J o u r n a l O c t .2007, V o l .28, N o .10刺激斑秃患者 P B M C后可显著下调斑秃患者 T-b e t基因表达 ,纠正轻型斑秃患者异常 T h 1型反应 ,显著下调重型斑秃患者 P B MC 中 T h 1型细胞因子基因表达水平 ,部分上调斑秃患者 T h 型细胞因子 I L-10基因表达 说明中药黄芪的有效成分 A P S 可显著抑制斑秃患者 T h 1型细胞因子和转录因子 T-b e t 基因表达水平 ,促进 T h 2型细胞因子 I L-10基因表达 ,逆转 T h 1型反应 ,使之向 T h 2型漂移 因此中药黄芪提取物治疗斑秃有效的机制可能部分与此相关 同时也为黄芪治疗斑秃有效提供了免疫学佐证 。

魏海明等[ 9]分析了肺癌患者 T h 1和 T h 2两类细胞因子的基因表达与转录因子T-b e t 和 G A T A 3表达的相关性 ,并探讨黄芪和川芎嗪对 T h 2型肿瘤的干预作用 发现肺癌患者 T h 2类细胞因子的高表达与 T- b e t 表达降低 , G A T A 3表达增高有关 ,黄芪和川芎嗪能降低 T h 2类细胞因子和 G A T A 3的表达 ,提高 T h 1类细胞因子和 T-b e t 的表达 , 可能在转录水平调控 T h 1和 T h 2的逆转 翁玲等[ 10]研究了A P S 对 B a l b /c 鼠脾细胞分泌细胞因子的影响 ,结果显示 : A P S 具有上调 T h 2型细胞因子 ,抑制 T h 1型细胞因子的作用 本研究的实验结论与魏氏等的研究均表明黄芪可调控 T h 1和 T h 2类细胞因子和转录因子 T-b e t基因表达 ,但调控的方向则完全相反 ,这说明黄芪或黄芪多糖对机体免疫功能具有双向调节作用 另一方面可能也与使用的试剂不同有关 ,他们采用成都地奥黄芪注射液 ,主要含有黄芪甲苷 由于黄芪有效成分十分复杂 ,体内代谢产物对斑秃患者免疫系统的调节作用与体外 A P S 单一因素干预 P B MC 所得结论可能不尽一致 ,但 A P S 对斑秃患者P B M C 中转录因子 T-b e t 及 T h 1型细胞因子基因表达的下调作用可能部分与治疗机制有关 。

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