生物实验八：叶绿体色素的提取和分离（必修1）.doc

生物实验8：叶绿体中色素的提取和分离 （必修1）一、实验原理1、叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中，所以可以用无水乙醇提取叶绿体中的色素2、色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上扩散的快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上扩散的慢，因而可用层析液将不同的色素分离二、实验目的1、初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法与原理2、探索叶绿体中有几种色素三、实验材料用具 新鲜的绿色叶片（如菠菜叶片）、干燥的定性滤纸、试管、棉塞、试管架、研钵、小玻璃漏斗、尼龙布、毛细吸管、剪刀、药勺、量筒、天平、无水乙醇、层析液、二氧化硅、碳酸钙四、实验步骤 1、提取色素⑴称取5g绿色叶片，剪碎放入研钵中（剪得越细越好，尽量去除叶脉等部分）；⑵向研钵中放入少量二氧化硅、碳酸钙，再加入5mL丙酮加二氧化硅的作用是使研磨更加充分、迅速；碳酸钙的作用是保护叶绿素不分解；丙酮用来溶解提取叶绿体中的色素⑶将研钵中物品进行研磨、漏斗过滤，最后将滤液收集到试管内并塞紧管口2、制滤纸条⑴将干燥的滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角（使之呈梯形）⑵在距剪角端1cm处用铅笔画一条细横线。

3、画滤液细线⑴用毛细吸管吸少量的滤液沿铅笔线小心均匀地画一道线⑵待滤液干燥后，重复划2~3次4、纸上层析⑴向烧杯中倒入3mL层析液，以层析液不没及滤液细线为准⑵将滤纸条画有滤液细线的一端向下插入层析液中，随后用棉塞塞紧试管口注意千万不要将滤液细线浸没在层析液中，否则会使色素溶解而导致实验失败层析液是挥发性较强的有机溶剂，并且具有一定的毒性，所以在操作中要尽量用棉塞塞紧试管口5、观察结果滤纸条上将分离出四条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b 最宽：叶绿素a；最窄：叶绿素b；相邻色素带最近：叶绿素a和叶绿素b；相邻色素带最远：胡萝卜素和叶黄素五、实验关键1、选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片，如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等2、画滤液细线时，应以细、直、颜色浓绿为标准，重复划线时必须等上次划线干燥时再进行3、层析时不要让滤液细线触及层析液。