体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则-参考值(参考区间).doc

1附件10：体外诊断试剂分析性能评估指导原则——参考值（参考区间）（征求意见稿）一、概述参考值（参考区间）是体外诊断试剂的重要指标之一，也是临床使用中判断被检测样本是否正常的重要依据参考值 （参考区间）评估资料是评价 拟上市产品有效性的重要依据，也是产品注册所需的重要申报资料之一本指南基于国家食品药品监督管理局《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》（以下简称《办法》）的有关要求，参考 CLSI 有关标准， 对参考值（参考区间）的有关定义、实验所需材料、实验过程及实验结果处理进行了原则性要求，包括建立参考区间的方法学和程序其目的是为生产企业对定量检测和确定健康相关的参考值（参考区间）进 行评估及准备参考值（参考区间）评估资料提供原则性指导，也为注册管理部门审核参考 值（参考区间）评估资料提供技术参考同时，本指南亦可指导临床实验室进行参考值（参考区 间）的确定或转移由于体外诊断试剂产品发展速度快、 专业跨度大，国家食品药品监督管理局将根据体外诊断试剂发展的需要，适时对 本指南进行修订二、定义 1.参考个体：根据设计标准筛选出进行实验的个体（确定一个人的健康状况通常是非常重要的）2.参考人群：由参考个体组成的群体。

参考人群的数量通常是未知的，因此它是一个假定的实体参考人群也可以由一个人组成，例如为自身或其他人做参考主题特异性参考个体在本指导文件中不包含在内 3.参考样品组：选出适当数量的个体以代表参考人群4.参考值：经过对一定数量参考个体的测量和观查，所 获得的 检测结果 对参考个体的实验结果，参考值源于参考样 品组）5.参考值分布：一组参考值的分布6.参考样本组的参考值分布：通过测定，并用适当的 统计方法 进行处理7.参考人群的参考值分布：评估参考样本组的参考值分布，并用统计方法进行处理28.参考限：源自参考值的分布，用于描述部分参考 值的位置（小于或等于、大于或等于、下限/ 上限9.参考区间：参考值低限和高限之间如： GLU：3.6～6.1 mmol/L有时只有参考值高限（X）有意义 ，其参考区间为：0～X)10.观测值：病人样本的实验室检验结果，与参考 值、参考 值 分布、参考限、参考区 间作比较三、参考值（参考区间）评估的基本原 则1.选择参考个体1.1 概要健康是一个缺乏统一定义的概念，因此，确定排除非健康的标准是选择参考个体的第一步每一项研究均有不同的健康 标准一个准参考个体的健康状态需经过一系列检查才能确定，这些检查包括病历检查或 现状态生理指标的临床实验检查。

用于参考 值研究的标准应具有详细的描述和证明，实验操作者根据此标准来判定参考 样品组的健康状态， 调查问卷可用于评价每个参考个体的健康状态1.2 排除和分组排除标准详细规定了准参考个体的非健康状态，用于排除非健康参考样本表 -1列出了基本的排除标准，此表并没有囊括所有的排除标准，每个项 目应根据实际情况细化排除标准分组标准详细规定了组别特征最常用的分组标准是年龄 和性别表 -2还列出了其它的分组标准各个项目可根据实际情况 进行调整排除和分组的最佳方法是 调查问卷的方式调查问卷常只需要回答“是” 或“ 否 ”即可确定，也可与体 检同时进行 表-1 排除标准饮酒 疾病（最近） 献血 哺乳期 血压（异常） 肥胖 药物滥用 职业 处方药 口服避孕药 自服药 怀孕 环境因素 手术（最近） 3空腹或不空腹 吸烟 遗传因素 输血（最近） 住院（最近或正在） 维生素滥用 表-2 分组标准年龄 采样时的体位 血型 种族 生理变异 性别 食物 月经周期 种族背景 孕期 运动 采样时间 禁食与非禁食 吸烟 地理位置 1.3 选择参考个体：健康参考值的参考个体不要求是健康年青人，他们应与疾病人群相似许多情况下，年龄相关的参考区间更适用于临床诊断。

但有些情况下，与年龄相关的实验室指标改变可能不代表健康状况的变化，如老年人的 总胆固醇或生长激素水平改 变除非特 别需要（婴儿、老年人），参考个体通常不应是临床病人1.4 抽样调查问卷：为了保护参考个体的权益，应 确保问卷信息和检测结果的保密性调查问卷的内容详见图-1 4所有信息将严格保密，仅用于患者疾病 诊断 项目ID# 样本ID# 姓名： ： 地址： 年龄： 性别： 民族： 身高： 体重： 职业： 医师姓名： 您认为自己健康吗？ 是 否 您进行规律性的锻炼吗？ 如果是，练习时间（小时/星期）： 练习强度：（轻）1 2 3 4 5 6 7 8 9 10（重） 最近曾经生病？ 是 否 如果是，生病时间： 疾病名称： 您正在服药吗？ 是 否 如果是，服用哪些药品： 您是否高血压？ 是 否 您是否服用维他命营养品？ 是 否 如果是，服用哪些营养品： 您在工作是否接触危险化学品？ 是 否 如果是，接触哪些化学品： 您是否吸烟？ 是 否 如果是，香烟种类： 吸烟频度： 您是否有特殊饮食习惯？ 是 否 如果是，请描述： 您是否饮酒？ 是 否 如果是，酒品种类： 饮酒频度： 您是否正在接受医生治疗？ 是 否 如果是，原因： 5您近期是否曾经住院治疗？ 是 否 如果是，原因： 地点： 您是否有家族遗传病？ 是 否 如果是，遗传病描述： 您近期是否服用阿司匹林或其他止痛药？ 是 否 如果是，原因： 时间： 您近期是否服用抗酸药或其他胃病药？ 是 否 如果是，原因： 时间： 您近期是否服用减肥药？ 是 否 女性调查者： 是否月经？ 是 否如果是，上次月经期的时间： 如果否，是否接受荷尔蒙调节 治疗？ 是 否 是否在哺乳期？ 是 否是否怀孕期？ 是 否如果是，预产期时间： 您近期是否使用口服或植入的避孕药物？ 是 否图-1 采样调查问卷（接上表）2. 分析前和分析中需考虑的因素 2.1 项目准备：对所有的分析前条件，包括项 目准备、 样品收集和处理、分析方法、仪器， 应进行严格限定，限定条件应可同时应用于参考个体和患者人群。

一般情况下，分析前应考虑两个因素，6即生物学因素和方法学因素生物学因素包括代谢和血液 动力学，方法学因素包括 样品收集和处置等见表-3和表-4 表-3 关键因素总结生物学因素 方法学因素 可变性和标准化来源 代谢 样本收集 特殊因素（采样时的体位等）血液动力学 样本转移 多重因素（见表-2） 酶感应 样本处置 细胞破裂 表-4 需考虑的预分析因素项目准备 样本收集 样本处置 前期食物 采样时环境条件 运输 禁食与非禁食 时间 血液凝结 停止用药 体位 血清或血浆的分离摄取药物 样本种类 贮存 按照生物节奏取样 采样部位 分析准备 物质活性 部位准备 采样前休息的时间 血流量 紧张度 设备/技术 2.2 样本的种类、收集、处置和贮存实验室应有样品收集、处置和 贮存的标准操作手册 选择适宜的采血管，采血管不能引入外源性干扰确定样本是否可在 厌氧条件下贮存不 应使用溶血、脂血、黄疸的血清或血浆样本2.2.1 血样如果选择的样本为血样，应确定需要的是 动脉血、静脉血 还 是毛细血管血样本需要抗凝时， 应选择抗凝剂，应明确样本的采集方法2.2.2 其它体液样本7其它的体液样本包括尿液、脑 脊液、胸膜 积液、腹腔积液、心包积液、关节内滑液、羊水和唾液等。

应注意体液收集的 时间段2.2.3 温度应明确样本收集和贮存的温度通常情况下，样本在采集后，应尽快进行处置和检测，尽量减少放置时间2.3 分析方法特征实验室应对所用检测方法进行细致的描述和规定， 应建立不精密度、不准确性、最小 检测限、线性、回收率、干扰特征的评价准则 四、参考值（参考区间）评 估的方法和结果报告1. 新的分析物质或分析方法1.1 方法描述此方法适用于新分析物、新分析方法及以前的分析物参考值的建立健康人群某分析物质参考值的产生和参考区间的估计，应根据一个详细限定条件的方法进行， 这些条件限定包括以下几点1）根据医学科技文献，建立适宜的生物变异和分析干扰的 项目列表 （2）建立选择、排除及分组标准，设计适宜的调查问卷，以揭示潜在参考个体的标准3）参加参考区间实验的参考个体应签署书面同意协议，并完成调查问卷4）按照问卷结果及其它适宜的健康分析结果， 对潜在的参考个体 进行分类5）根据排除标准或体检结果，从参考 样品组排除不符合要求的参考个体6）根据所需要的参考限，决定适宜的参考个体的数目7） 用被分析物检测的常规方法， 对被选择的参考个体进 行采样8）按照常规方法对样本进行收集和处理。

9）按照被评价方法分析样品，收集数据整个过程与常规的操作保持一致10）检测数据，设计图表，以评价数据分布11）识别可能的数据错误12）选择估计方法、估计参考限和参考区 间， 对参考区间进 行分析13）对以上的步骤进行证明 1.2 结果分析 参考区间包括两个值，即参考上限和参考下限对于大多数分析物，以2.5%为低限，以897.5%为高限，通常确定范围在2.5%～97.5% 的测定值为参考值有 时，只有参考上限具临床意义对于单侧指标，可以确定第5百分位数或第9。