葫芦茶营养器官结构观察及有效成分含量和活性的研究.doc

葫芦茶营养器官结构观察及有效成分含量和活性的研究汕头大学硕士毕业论文摘要葫芦茶 T a de hagi tri que t r um L . 0 h a s hi 是豆科 L e guni nos e 葫芦茶属T a de ha gi 0 h a s hi植物葫芦茶的全草，以全草和根入药，是南药 代表之一有很高的药用价值本文采用植物解剖学、植物化学及色谱分析等方法，较为 系统研究了葫芦茶营养器官的形态结构及发育、有效成分的组织分布及积累规律, 建立了葫芦茶的黄酮类、酚类的有效成分的高效液相色谱分析方法；采用滤纸 片法研究了葫芦茶总黄酮提取物(FFT)对8种细菌的抑菌活性；通过邻苯三 酚自氧化体系,F e t on体系和D P P H体系研究了 FFT的抗氧化活性;应用M T T法研究了F F T对H e 1 a和E c 109癌细胞的抗癌作用研究结果如下：1、植物解剖学方法研究表明：葫芦茶叶中脉维管束的厚角组织发达，髓部较大，上下表皮都分布有单细胞的表皮毛；根、茎表面有较厚的木栓层, 根中木纤维较发达，根部导管里有晶体分布葫芦茶结构中包含植物适应干旱生 境的特征2、利用组织化学和高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC- DAD),研究了葫芦茶营养器官中黄酮类、酚类成分在营养器官中的分布和积累规 律。

结果表明：①黄酮类物质在叶中主要分布在中脉韧皮部、薄壁细胞、栅栏组 织细胞中，海绵组织细胞和皮层有少量分布；在茎和根中主要分布在皮层、韧皮 部薄壁细胞中酚类物质在叶中主要分布在中脉韧皮部、薄壁细胞、栅栏组织细胞 中；在茎和根中主要分布在皮层、韧皮部薄壁细胞中皂苜类物质在叶中都主 要分布在皮层、韧皮部薄壁细胞和栅栏组织细胞中，海绵组织细胞有少量分布； 在茎中都主要分布在皮层、韧皮部薄壁细胞中，在根中主要分布在皮层、韧皮部 薄壁细胞中这些成分在木质部和髓部中都儿乎没有分布②HPLC法测定葫芦茶黄酮类、酚类物质含量结果表明：叶的总黄酮含量明显高于其他部位，9月份含 量最高，达5089. 75 n g芦丁/ g干重，茎和荚果是12月份含量最大，分别 为 834. 88 ug芦丁/ g干重和3687. 16 ug芦丁/ g干重，根是3月份含量最大，达1206.2iig 芦T/g干重叶的酚类含量高于其他部位，11月份和12月份含量 最大, 达 59. 56ug没食子酸/ g干重，茎的含量各月份差别不大，荚果12月份含量最 大，达13.4u g没食子酸/g干重，根10月份含量最大，达31. 96 u g没食子酸/g干 重。

I汕头大学硕士毕业论文3、研究结果表明：F F T对V p为中度抑菌，抑菌圈为1.4c m ,最小 抑菌浓度为0. 155g/ e 1 ;对V m .施氏假单胞菌、大肠杆菌、V a 1为低度抑茜; 在测试浓度范围内，总黄酮提取物对P14、肠杆菌、Vf均没有抑菌作用FFT能 有效地清除超氧阴离子自由基、羟基自由基、D P P H ?,在试验浓度范围内，随着FF T浓度的加大，清除能力呈上升趋势清除率分别达到98. 9%、92. 6%、79.85% □ 对 D P P H ?自由 基和羟基 自由基的半 抑制浓度T C分别 为0.034m g/ m 1和0. 140m g/ m 1 o F F T50对H e 1 a > E c 109细胞生长均表现出一,定的抑制作用，且抑制率 随着F F T浓度的增加而增大，存在剂量依赖关系，其半抑制浓度T C 50分别为37. 6 4m g /ml, 57. 08m g/ m 1 o关键词:葫芦茶;解剖结构;总黄酮;H P L C ;抑菌活性;抗氧化性;M T TI I汕头大学硕士毕业论文AAAABBBBSSSSTTTTRRRRAAAACCCCTTTTT ade hagi tri que t r um L . 0 h a s hi , a ki nd of w hoi e pla nt of L e gum i no s a e T a de h a gi0 h a s hi f a m i 1 y, i t s w hoi e pl a nt a nd r oot c a n be use d t o m a ke t r a di t i o na 1 C h i ne s em e di c i neT t w a s on e of r e pr e s e nt a t i ve s o f t hes ou t h ph a r m a c e ut i c a 1 , w hi c h h a d hi ghm e di c i na 1 va 1 ueT he s t r uc t ur e o f ve ge t a t i ve orga ns a nd t he gr ow t h, h i s t oc he m i c a 11 oc a 1 i z a t i on a n d t he a c c um ul a t i on of f 1 a vonoi d s a nd ph e nol i c f r omT ade hagi tri que trumweresystematical 1 y s t udi e d w i t h t he m e t hodol o gy o f bot a ni c a 1a na t om y, ph yt oc he m i s t r y a nd c h r om a t ogr a phyT o s t udy ba c t e r i o s t a t i c a c t i vi t y a ga i ns t8speciesofbacteriaoffla vonoi ds f r om T ade hagitri que t r um F F T b y t he m e t hod off i 1 t e r pa pe rT o s t udy t he a n t i oxi da nt a c t i vi tyofFFTbyPyr oga 1 1 o 1 A ut oxi da t i o ns ys t e m , FetonsystemandDPPHsystemTost udy t he a nt i t um or H e 1 a a nd E c 109 cellsactivityofFFTbythemet hod o f M T TR e s ul t s of t hi s s t udy c a n be s um m a r i z e d a sf ol 1 o w s :1 > T he r e s ul t s of pl a nt A na t om y s how edthat:Le a f ve i n v a s c ul a r c ol 1 e ne hym a ofT ade hagi tri que t r um w a s de ve 1 ope dP a 1 i s a de t i ss us e of 1 e a f v e i n w a s 1 a r ge ; T he uppe ra nd 1 ow e r e pi de r m i s w e r e di s t r i but e d t he s i ngle c e 1 1 of e pi de r m i s ; Therewerethickc or k ph e 1 1 o ge n di s t r i but edo nt he surface of r oot a n d s t e m , w ood f i be r of r oot w a sde ve 1 ope d, c a t he t e r c r ys t a 1 s w e r e di s t r i bute d i n t he r oot sT he f e a t ur e s f or pl a nt s a da ptt o a r i d ha bi tatcharacteri s t i c s w e r e c ont a i n e d i n t he s t r uc t ur e s of T ade hagi tri que t r um2、S t udy on 1 oc a 1 i z a t i o n a n d dyna m i c c ha nge s of f 1 avonoi d s a nd pol yphe nol sinve ge t a t i ve or g a ns of T ade hagi tri que t r um L . 0 ha s hi w i t h t he m e t hodol o gy ofhi s t oc he m i c a 1 a nd hi gh pe r f or m a nc e 1 i qui d c hr（）m a t ogr a phy HPLC-DADTher e s ul t s s how e d t h a t :①F 1 a vonoi d s w e r e m a i nl y di s t r i but edinthephloem, t het hi n~ w a 1 1 e d c e 1 1 s a n d t he pa 1 i s a de t i s s ue of1 e a f v e i n phi oe mT he r e w a s a 1 i t t 1 e a m ountof i t di s t r i but e d i n t he s pon gy t i s s ue a nd t he cor t e x; W h i c h w e r e di s t r i but e d i n t hepe r i de r m a n d t he pa r e nc hym a c e 1 1 s of phi oe m of st e m a nd r ootP h e nol i c w a s m a i nl ydi s t r i but i on i n t he phi oe m , t he t hi n- w a 1 1 e d ce 1 1 s a nd t he pa 1 i s a de t i s s ue o f 1 e a f ve i nphi oe m ; Whichweredistri but e d i n t he c or t e x of s t e m a nd t he phi oe m of r ootI I I 汕头大学硕士毕业论文S a poni ns w e r e m a i nl y di s t r i but e d i n t he c or t ex, t h e pa r e nc hym a c e 1 1 s of ph 1 o e m , t hepa 1 i s a de t i s s ue of 1 e a fT he r e w a s a 1 i t t 1 e a mount of i t di s t r i but e d i n t he s pongy t i s s ue ;W hi c h w e r e di s t r i but e d i n t he c or t e x of s t e ma nd t he pa。