食品安全快速检测技术.docx

第一章绪论一、快速检测的定义快速检测没有经典的定义， 而是一种约定俗成的概念 即在短时间内， 如几分钟、 十几分钟， 采用不同方式方法检测出被检物质是否处于正常状态，检测得到的结果是否符合标准规定 值，被检物质本身是不是有毒有害物质，由此而发生的操作行为称之为快速检测二、快速检测的意义1. 快速检测是食品安全监管人员的有利工具2. 快速检测是实验室常规检测的有益补充3. 快速检测是大型活动卫生保障与应急事件处理的有效措施4. 快速检测是中国国情的一种需要三、快速检测的时间概念理化快速检测： 包括样品制备在内， 能够在两小时以内出具检测结果， 即可视为实验室快速 检测方法 如果方法能够应用于现场， 在 30 分钟内出具检测结果， 即可视为现场快速检测 方法如果能够在 10 几分钟甚至几分钟内得到检测结果，可视其为比较理想的现场快速检 测方法微生物快速检测： 与传统检验方法相比， 能够大幅度缩短检测时间， 其检测结果基本相同或 相近的方法，可视为快速检测方法四、快速检测方法的主要形式1 试纸法1.1 用试纸直接显色来定性并作为限量指示：如农药等1.2 用试纸层析显色或层析后胶体金显色来定性或作为限量指示：如苏丹红、瘦肉精等。

1.3 用试纸显色的深浅来半定量：如食用油酸价、过氧化值等2 试管法2.1 用速测管显色来定性：如毒鼠强、生豆浆等2.2 用速测管显色的深浅半定量：如亚硝酸盐、甲醇、二氧化硫等，比色定量可以是目视， 也可以用便携式光度计3. 滴瓶法：将标准溶液放在滴瓶中， 根据消耗的滴数来判定被检物质的含量 如食醋中乙酸、 酱油中氨基酸态氮等4. 便携式仪器法4.1 多参数光度仪法： 本方法是将实验室中的光度仪微型化， 将可以用比色进行定量的检测项目的线性斜率和截距 输入仪器， 现场检测时不用再做标准曲线，直接得出样品结果有单一项目检测仪，也有多 项目检测仪等4.2 现场检测专用仪器：如消毒间紫外线辐照度计 ; 食用油极性组份测定仪； 农药残留速测仪； 甲醇速测仪； 物体表 面洁净度ATP荧光度仪；环境温度瞬间测定仪；食品中心温度计；酸度计； 电导仪；肉类水份测定仪等5. 其它一些形式的快速检测方法：如砷斑法、砷管法、氰化物发生器法等等五、食品安全现场快速检测项目分类1. 常见食物中毒类：如农药、鼠药、金属毒物、亚硝酸盐、有毒油脂、甲醇、生豆浆、有毒 豆角等的快速检测方法2. 非法食品添加物与劣质食品类：如掺杂造假、食品物理或化学性质的改变等。

3. 食品生产、加工和储运控制环节类：如温度、洁净度、消毒效果等4. 生物性污染类：如细菌总数、大肠菌群、致病菌等第二章 常见食物中毒与应急保障项目的快速检测一、有机磷类和氨基甲酸酯类农药的快速检测 （农药速测卡使用说明）检测原理： 胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯（红色）水解为乙酸与靛酚（蓝色） ，有机磷或氨基 甲酸脂类农药对胆碱酯酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此判断样品 中是否含有过量有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留二、毒鼠强速测试剂盒与速测管使用说明 方法一、试剂盒测定法 方法二、速测管测定法 检测原理：毒鼠强可与二羟基萘二磺酸发生反应变为淡紫红色，本方法检出限为 1卩g,最低检出浓度2卩g/mL浓度高时变为深紫红色三、 敌鼠的快速检测 检测原理： 敌鼠钠盐又名敌鼠,化学名为 2- 二苯基乙酰基 -1,3-茚二酮，可与三氯化铁反应出现砖红色检出限 5卩g ,在取样量0.05 mL的情况下最低检出浓度100卩g/mL,加大滴入量后，更低浓度的敌鼠钠盐将会检测出来四、 氟乙酰胺的快速检测方法一、奈氏试剂 -速测管测定法 检测原理： 当氟乙酰胺与奈氏试剂反应后会出现黄红或橙棕色沉淀。

检出限为 5卩g,最低检出浓度10卩g/mLo方法二、异羟肟酸铁显色－试剂盒测定法 测定原理： 氟乙酰胺与羟胺在碱性条件下,生成异羟肟酸，与三价铁离子作用生成色异羟肟酸络合物检出限 50卩g/ml样品处理 ：无色液体可直接测定 有颜液体,可加少量活性炭或中性氧化铝振摇脱色,过滤 后测定固体样品研碎后取 2〜5克加3倍于样品重的蒸馏水或纯净水，半流体样品取 2〜5克加等量于样品重的蒸馏水或纯净水,振摇提取,过滤,将滤液煮沸浓缩至 1ml 左右测定中毒残留物或胃内容物样品处理时,可适当加大取样量五、 鼠药磷化锌测试液使用说明磷化锌是常用鼠药之一, 为灰色或近似黑色有闪光的重质粉末 检测相对复杂, 要先经硝酸 银法预试为阳性后,再进行磷和锌的检验,均呈阳性时,可判断磷化锌的存在现场快速检测时，可取约 1g研磨后的样品，加入 5mL水,混匀后，加入磷化锌测试液 2mL,如果释放出蒜臭味时, 即可考虑可能含有磷化锌的存在 可将样品送实验室做进一步的验证六、 砷、锑、铋、汞、银化物检测试剂使用说明 方法原理 ：在酸性条件下,某些无机化合物可与金属铜作用产生颜色变化, 由此推测可能存在的某些有害化合物。

本方法最低检出 限砷为10卩g,汞为100卩g，按取样量5g计，最低检出量砷为 2mg/kg，汞为20 mg/kg七、 钡离子速测试剂包 检测原理： 钡离子与硫酸根离子相遇后发生化学反应，生成不溶性的硫酸钡盐白色沉淀八、 亚硝酸盐的快速检测 （亚硝酸盐速测管使用说明）固体或半固体样品检测： 取粉碎均匀的样品1.0g或1.0ml至10ml比色管中，加蒸馏水或去离子水（纯净水） 至刻度, 充分震摇后放置, 取上清液 （或过滤或离心得到的上清液） 1.0ml 加入到检测管中,盖上盖,将试剂摇溶, 10分钟后与标准色板对比,该色板上的数值乘上 10即为样品中亚硝酸盐的含量 mg/ kg , L （以NaNO计）如果测试结果超出色板上的最高 值，可定量稀释后测定，并在计算结果时乘上稀释倍数（如从 10ml比色管中取出1.0mL转入另一支 10ml 比色管中,加水至刻度,从中取 1.0mL 加入到检测管中测定,测试结果乘上 100（稀释倍数）即为样品中亚硝酸盐的含量十、氰化物的快速检测 方法原理 ：氰化物遇酸产生氢氰酸,氢氰酸与加载在试纸上的苦味酸钠作用生成橘红色异氰紫酸钠十一、食用油脂酸价和过氧化值快速检测 方法原理 ：以纸片作为载体做成卡片形式,通过显色剂与游离脂肪酸或过氧化物进行反应, 其在纸片上显色的程度与游离脂肪酸或过氧 化物的含量成正比,以此达到酸价或过氧化值的半定量。

操作方法4.1直接取植物油（动物油需加热使其融化）样品适量（约 5mL于清洁、干燥容 器中，将油样温度调整至 25C± 5C,将试纸端插入油样中并开始计时， 试纸插入油样1〜2秒立即取出，将试纸块面朝上平放；4.2 酸价测试纸的最佳反应时间为 5min， 3〜8min 内比色有效4.3 过氧化值测试纸的反应计时视环境温度而定，在表中规定的时间内比色有效十二、食用植物油极性组份速测仪使用说明 方法原理： 食用植物油经高温加热和反复使用后会产生某些物理极较大且对人体有害的物质， 如丙稀酰胺、 多环芳烃、 醛基和羰基物质 等，这些物质的增加，可使油品原本的物理极性改变，采用电化学原理，可以测定出油品极 性改变的程度，由此来判断油品的品质酸败油脂的极性会较高十三、食用油中矿物油的快速检测 方法原理： 作为食用油脂的高级脂肪酸的甘油酯，可 以在碱性条件下发生水解反应 （ 即皂化反应 ） ，其产物皆易溶于水 而矿物油则不能皂化， 也 不溶于水，会出现混浊现象，据此证明矿物油的存在或其本身就是矿物油十四、 大麻油检测试剂使用说明方法一、 盐酸—蔗糖测定法 方法原理 ：大麻油与盐酸－蔗糖试剂反应后产生红色聚合物。

操作方法：取油样1mL置试管中，加入浓盐酸 3mL〜5mL,将“大麻油鉴别试剂 A”倒入试管 中，振摇 1min 后， 10min 内观察同时做一份已知不含大麻油的相同种类油的空白对照实 验以便观察 结果判断： 若酸层（溶液下层）出现粉红色，静置后逐渐变成红色，示有大麻 油存在方法二、磷酸测定法 方法原理： 大麻油与磷酸作用后出现绿色聚合物检出限为 9%操作方法：取油样1mL于试管中，加入50滴"大麻油鉴别试剂 B”，摇匀，静置5min, 10min 内观察 同时做一份已知不含大麻油的相同种类油的空白对照实验以便观察 结果判断： 若酸层（溶液下层）呈现绿色时,示有大麻油存在十五、食用油中蓖麻油的快速检测 方法原理： 蓖麻油能与试剂以任何比例互相混合,而其它植物油 （巴豆油除外） 不易溶于试剂, 故可根据这一差别检验食油中是否混入蓖麻油 检出限为 5%（油样中含有 5%以上的蓖麻油时可以检出） 无水乙醇） 十六、蛋白质含量快速检测（造假、非法添加物类）方法原理 : 考马斯亮蓝试剂在游离状态下呈红色, 当它与蛋白质结合后变为青色, 其颜色深 度与蛋白质含量成正比 检测范围： 液体样品为 0.5g 〜20g/100g ,固体样品为 1g〜40g/100g 样品处理：取奶粉2g （液体奶取4mL）于容器中，加纯净水或蒸馏水至 100 mL充分摇匀；从中取1mL至另一容器中，加纯净水或蒸馏水至 40mL充分混匀成样品待测液。

测定与判断： 取一支蛋白质检测管，加入 0.5mL 样品待测液，盖上盖子摇匀，反应 2min， 观察颜色变化， 根据标准比色板进行半定量判定； 每批检测须做一个纯净水或蒸馏水空白对 照以便判断一） 比浊法的方法原理： 样品中的三聚氰胺经过大约五分钟的快速提取后， 与胺盐沉淀试 剂发生反应，生成相对稳定的混悬液体，在比浊管中目视比对判定结果二） 免疫层系胶体金竞争法的方法原理：一、胶体金标记的全定量免疫层析 POCT式剂装置结构示意图及作用1 、吸收垫：吸收多余液体2、 PVC底板：提供试剂封装外壳3、 C1、C2:标准质控区羊抗鼠抗体结合于硝酸纤维膜上4、 T:检测区鼠源性单克隆二抗5、 硝酸纤维素膜：提供抗原抗体反应的固相载体6、 胶体金垫：含胶体金标记的鼠源性单克隆抗体7、 样品吸收垫：吸收样品液体二、胶体金标记的全定量免疫层析技术的原理双抗体夹心法：样品加入样品吸收垫， 样品中的液体首先溶解胶体金垫中含有的胶体金标记 的鼠源性单克隆抗体 其次样品中待测抗原与胶体金颗粒标记的鼠源性单克隆抗体结合， 形成抗原-抗体*胶体金复合物，并靠毛细作用向检测线移动 在硝酸纤维薄膜的检测线上固定 有另一鼠源性单克隆二抗。

当样品层析至检测线时，可以进一步形成抗体 -抗原-抗体*胶体金双抗体夹心复合物，并在检测线上聚积显现出一条可见的显色反应 无显色反应则表示样品中无抗原存在而胶体金的量反应了待测抗原的量 从加样垫中泳动过来的过量胶体金标记的单克隆抗体是鼠源性的，无论携带抗原与否，均可被固定于标准的羊抗鼠抗体所捕获， 形成显色反应，这种显色反应，既代表了整个反应体系是正确的，同时 C1、C2区的显色反应的深浅，与检测区中被测抗原的量呈对应关系 胶体金颗粒在特定波长下， 对光的吸收和散射与胶体金颗粒的量相关，通过光电感应器检测胶体金颗粒对光的吸收和散射， 从而获得待测抗原的量测试步骤及结果解释：取出试剂盒，待平衡至室温后，打开包装袋，取出试纸卡，平放，将制备好的样品滴加到加样孔中， 在指定时间内判定结果 如果检测线上出现红色条带， 说明样品呈阳性，如果检测线上没出现红色条带， 说明样品呈阴性如果质控线无条带，说明试纸条无效0A第三章真菌及毒素的快速检测。