体外培育牛黄.doc

体外培育牛黄与天然牛黄对比研究资料体外培育牛黄与天然牛黄对比研究资料纲要一、体外培育牛黄是国家中药一类新药. ü 牛黄是干燥的牛胆结石，是名贵的中药材ü 体外培育牛黄是模拟体内胆结石形成的原理和生物化学过程,在多种酶作用下,清除胆汁中成石的拮抗成分，制成成石牛胆汁，再通过促发作用,形成结石核心，由于静电吸引及有机高分子物质的架桥作用,呈网状向核心层层沉附、增大成牛胆结石其性状、结构、成分、含量均与天然牛黄一致;药效学、毒理学研究结果证明安全、有效;临床疗效与天然牛黄一致，且对某些病种的疗效高于天然牛黄二、质量标准采用正式国家药品标准，与药典牛黄标准一致.ü 体外培育牛黄的质量标准为正式国家药品标准ＷS3—45（Ｚ—051)－2０03（Ｚ），除增加了［游离胆红素检查]外,其它各项（性状、鉴别、检查、含量测定、功能与主治、用法与用量、注意、贮藏)均与中国药典20００版一部中牛黄的质量标准一致.三、理化性质(性状、结构、成分、含量)与牛 黄一致,且更稳定.　ü 体外培育牛黄与天然牛黄均呈球形或类球形,直径0.5—３ｃm表面光滑,呈黄红色至棕黄色体轻，质松脆,断面有同心层纹气香，味苦而后甘，有清凉感，嚼之易碎，不粘牙。

ü 显微观察均可见絮状、团絮状棕色胆红素钙颗粒，呈网状结构，网孔7－３５0µüü 以连续生产的体外培育牛黄及不同产地的天然牛黄进行对比,分析其成分(胆红素、胆酸、去氧胆酸、牛磺酸、胆固醇、磷脂、无机盐、氨基酸、糖蛋白、灰分、水分)及相应成分的含量,结果表明体外培育牛黄的各种成分及其含量与天然牛黄一致四、体外培育牛黄与天然牛黄的指纹图谱表现一致 ü 指纹图谱（胆红素类、胆酸类、氨基酸及肽类）的对比分析表明，体外培育牛黄与天然牛黄成分一致,且比天然牛黄更稳定五、体外培育牛黄与天然牛黄具有相同的药理、药效　ü 体外培育牛黄的抗惊厥、镇静、解热、抗菌、消炎、降压等作用与天然牛黄一致ü 体外培育牛黄的主要药效集中反映在中枢作用方面：除了前述抗惊厥、镇静、解热作用外,还有耐缺氧、清除自由基,保护脑细胞,保护心功能的作用六、体外培育牛黄临床疗效良好与天然牛黄无统计学差异ü 应用体外培育牛黄及以其为原料药的复方制剂治疗中风、乙脑、急性咽炎、牙周炎、疖肿病人共185２例，疗效良好，总疗效、临床症状疗效、临床体征疗效以及病理舌象的改善作用等均与天然牛黄相似且治疗过程中也未发现明显不良反应Ⅱ、Ⅲ期临床试验共1８５2例治疗结果组别 药名 　 　　 病名 　 总例数 　 愈显率(%) 　总有效率(％)治疗组　 安宫牛黄丸 乙脑　 　 　182 　　　　 　 9３.９５ 　 99．45 对照组 安宫牛黄丸 乙脑　 　 　７8　 　 　 8８。

46 　　 97.43 治疗组 单味 乙脑 　1２4 　　 　　 ９２．７4 　 9９２０对照组 　单味 　 　 　乙脑　　　 4１ 　 　 　７560 　　 　 878０治疗组 安宫牛黄丸 　 中风　 　　 ２4８　　 　 　47.９８　 8４.78 对照组 　安宫牛黄丸 　　中风 　 　148 47．97 　 8493治疗组 　　单味 　 中风 ９5　 　　 ３7.90 　 　 8６.30对照组　　 　单味　　 　　 　 中风 　 ３2 　 3２２5 　 　 ８0.６０治疗组 　片仔癀 　 　　急性咽炎 4１6　 75．50 　 　 9664对照组 　片仔癀 急性咽炎 　102　 　 　　 　８0．3８ 　 　　　97．０6治疗组 单味 牙周炎 　 148　 　 　 ９0.54 99.３2 对照组 　单味 　 　 　 牙周炎 39 　　 84。

61 　 　 　 　９487治疗组 　 单味　 　 　　疖肿　 　110 　 　 76.36　 　　 　 　96.36对照组 　　 单味 　 疖肿 　 　 　3９ 6667　　　 　 ９487备注：治疗组用体外培育牛黄；对照组用天然牛黄体外培育牛黄与天然牛黄对比研究资料目 　 录(1)、牛黄形成机理（2)、体外培育牛黄机理与工艺研究（3）、天然牛黄与体外培育牛黄质量标准对比分析(4)、不同产地的天然牛黄成分及含量的分析研究(５）、体外培育牛黄、天然牛黄、人工牛黄比较表（6)、体外培育牛黄成分含量的分析研究(７)、体外培育牛黄、天然牛黄相关仪器检测对比性研究（8）、体外培育牛黄、天然牛黄游离胆红素含量对比性研究(9）、体外培育牛黄指纹图谱研究(10)、体外培育牛黄、天然牛黄主要药效学对照性研究（1１)、体外培育牛黄、天然牛黄一般药理对照性研究(12）、体外培育牛黄耐缺氧、中枢神经作用的研究(13)、体外培育牛黄急性毒性试验（14）、体外培育牛黄长期毒性试验（15）、体外培育牛黄致突变试验（1６）、体外培育牛黄培养细胞染色体畸变试验（17)、体外培育牛黄对小鼠微核试验（18）、体外培育牛黄生殖毒性试验（19）、体外培育牛黄与天然牛黄II、IＩI期临床对比研究汇总（２0）、安宫牛黄丸(体外培育牛黄)治疗痰热闭窍证（中风)　 　 　　 　 II期临床试验总结—206例临床试验分析（2１）、安宫牛黄丸(体外培育牛黄)治疗暑温(乙脑)ＩＩ期临床试验总结—１50例临床研究分析（22）、片仔癀胶囊（体外培育牛黄）治疗上焦热毒证（急性咽炎）Ⅱ期临床试验总结——-２03例临床试验分析（23）、体外培育牛黄治疗牙周炎Ⅱ期临床试验总结—8０例临床试验分析（２4）、体外培育牛黄治疗疖肿Ⅱ期临床试验总结—６3例临床试验分析（2５）、体外培育牛黄治疗中风Ⅲ期临床试验总结—339例临床试验分析(２6）、体外培育牛黄治疗暑温（乙脑）Ⅲ期临床试验总结—278例临床试验分析（２７）、体外培育牛黄治疗上焦热毒证（急性咽喉炎)Ⅲ期临床试验总结—319例临床试验分析（2８)、体外培育牛黄治疗牙周炎Ⅲ期临床试验总结-112例临床试验分析(29）、体外培育牛黄治疗疖肿Ⅲ期临床试验总结-1０2例临床试验分析(1）、牛黄形成机理：大肠杆菌大肠杆菌结合胆红素肠道感染β-葡萄糖醛酸酶钙浓度升高游离胆红素+胆红素钙颗粒成石胆汁核心结石（2)、体外培育牛黄机理与工艺研究在历经十多年研究胆红素钙结石形成的原因和机理的基础上,基于对胆红素型牛胆结石的认识，模拟体内结石形成的原理和生物化学过程。

根据天然牛黄的性状、结构、成分、含量特点，应用可调控牛黄质量的配方,在可控条件下的牛胆结石体外培育,并获得性状、结构、成分、含量、药效、临床疗效与天然牛黄相一致的体外培育牛黄工艺步骤：成石牛胆汁的生成;结石核心的形成；结石的分层培育;结石的真空干燥新鲜牛胆汁工艺路线：生物反应生物牛胆汁生化过程调pＨ值配方成石牛胆汁搅拌胆汁核心牛黄机(摇转）调节pH分层培育干燥成品（3)、天然牛黄与体外培育牛黄质量标准对比分析质量标准对比表:类项体外培育牛黄(国家药品标准）牛黄(药典2０00版）来源本品为以牛科动物牛的新鲜牛胆汁液，配成成石胆汁，在体外培育所得的牛胆红素钙结石.本品为牛科动物牛干燥的胆结石宰牛时，如发现有牛黄，即滤去胆汁，将牛黄取出，除出外部薄膜,阴干性状呈球形、类球形，直径05—3cm，表面光滑，呈黄红色至棕黄色，体轻，质松脆，有同心层纹气香，味苦而后甘，有清凉感,嚼之易碎，不粘牙呈卵形、类球形,直径０6—3(4．５)cｍ,表面黄红色至棕黄色，体轻,质松脆,有同心层纹气香，味苦而后甘,有清凉感，嚼之易碎，不粘牙鉴别粉末加清水调和，涂于指甲,能将指甲染成黄色加清水调和，涂于指甲上，能将指甲染成黄色。

显微鉴别呈正反应显微鉴别呈正反应胆红素鉴别呈正反应胆红素鉴别呈正反应胆酸鉴别呈正反应胆酸鉴别呈正反应去氧胆酸鉴别呈正反应去氧胆酸鉴别呈正反应无无检查按药典附录水份测定法测定不得过9.0％按药典附录水份测定法测定不得过9．0％游离胆红素吸收度不得超过0．７0无含量测定按药典测定薄层扫描法胆酸含量不得少于6.0％.按药典薄层扫描法测定胆酸含量不得少于4按药典分光光度法测定胆红素含量不得少于３5按药典分光光度法测定胆红素含量不得少于35．0%功能主治清心,豁痰，开窍，凉肝,息风,解毒用于热病神昏，中风痰迷，惊厥抽搐，癫痫发狂，咽喉肿痛,口舌生疮，痈肿疔疮清心，豁痰,开窍，凉肝，息风，解毒.用于热病神昏，中风痰迷，惊厥抽搐,癫痫发狂,咽喉肿痛,口舌生疮，痈肿疔疮.用法用量0.１5-0.35ｇ多入丸散用；外用适量,研末敷患处0.15-0.35g多入丸散用；外用适量,研末敷患处.贮藏置阴凉干燥处，遮光，密闭保存,防潮防压遮光,密闭,置阴凉干燥处,防潮,防压4）、不同产地的天然牛黄成分及含量的分析研究参照国内外有关学者对天然牛黄成分含量的分析方法和结果，对国内外五个不同产地的优质牛黄进行了分析研究,其结果如下成分含量（％）产 　 　 　 　 　 　地澳大利亚牛黄1西藏牛黄2京牛黄3进口牛黄１进口牛黄２水 　 分6．96.8７.0７。

06．7灰 　分6．８6.76.９7．1６.8胆 红 素３6．70±0.6７*39．62±１39＊35．80±0．55＊２9.2９±0．72＊＊4090±067＊＊胆 　酸2０1０±148＊1500±1．1３＊14.９0±０．88*1530±１.03*＊1７．0４±０.92＊＊去氧胆酸648±0.77＊4.90±076＊4.86±0.75/10６3±0．86*＊7.１5±0６３＊*牛 磺 酸64２±０49＊５.９2±0７３*6．25±0．７８*46６±0７4*＊646±0．55＊＊胆　固 醇4．80±109＊5.45±108*５．７９±0.72＊10.5５±０．４１＊＊4.40±066＊＊。