不同液相检测器的区别.docx
7页高效液相色谱仪的常用检测器有哪几种, 有什么区别?高效液相色谱仪常用检测器种类及分析检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号,常用检 测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等1. 紫外可见吸收检测器(ultraviolet_visibledetector,UVD)紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器之一,几乎所有的液相色谱 仪都配有这种检测器其特点是灵敏度较高,线性范围宽,噪声低,适用于梯度洗脱,对 强吸收物质检测限可达1ng,检测后不破坏样品,可用于制备,并能与任何检测器串联使 用紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似,实际上就是装有流动地的 紫外可见光度计1) 紫外吸收检测器紫外吸收检测器常用氘灯作光源,氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长,并安装 一个光栅型单色器,其波长选择范围宽(190nm-800nm)它有两个流通池,一个作参比,一 个作测量用,光源发出的紫外光照射到流通池上,若两流通池都通过纯的均匀溶剂,则它 们在紫外波长下几乎无吸收,光电管上接受到的辐射强度相等,无信号输出当组分进入 测量池时,吸收一定的紫外光,使两光电管接受到的辐射强度不等,这时有信号输出,输 出信号大小与组分浓度有关。
局限:流动相的选择受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相,每种 溶剂都有截止波长,当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时,溶剂的透光率降至10%以下, 因此,紫外吸收检测器的工作波长不能小于溶剂的截止波长2) 光电二极管阵列检测器(photodiodearraydetector,PDAD)也称快速扫描紫外可见分光检测器,是一种新型的光吸收式检测器它采用光电二极 管阵列作为检测元件,构成多通道并行工作,同时检测由光栅分光,再入射到阵列式接收 器上的全部波长的光信号,然后对二极管阵列快速扫描采集数据,得到吸收值(A)是保留时 间(tR)和波长(l)函数的三维色谱光谱图由此可及时观察与每一组分的色谱图相应的光谱 数据,从而迅速决定具有最佳选择性和灵敏度的波长单光束二极管阵列检测器,光源发出的光先通过检测池,透射光由全息光栅色散成多 色光,射到阵列元件上,使所有波长的光在接收器上同时被检测阵列式接收器上的光信 号学的方法快速扫描提取出来,每幅图象仅需要10ms,远远超过色谱流出峰的速度,因此 可随峰扫描2. 荧光检测器(fluorescencedetector,FD)荧光检测器是一种高灵敏度、有选择性的检测器,可检测能产生荧光的化合物。
某些不发荧光的物质可通过化学衍生化生成荧光衍生物,再进行荧光检测其最 小检测浓度可达0.1ng/ml,适用于痕量分析;一般情况下荧光检测器的灵敏度比紫外检测 器约高2个数量级,但其线性范围不如紫外检测器宽近年来,采用激光作为荧光检测器 的光源而产生的激光诱导荧光检测器极大地增强了荧光检测的信噪比,因而具有很高的灵 敏度,在痕量和超痕量分析中得到广泛应用3. 示差折光检测器(differentialrefractivelndexdetector,RID)示差折光检测器是一种浓度型通用检测器,对所有溶质都有响应,某些不能用选择性 检测器检测的组分,如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等,可用示差检测器检测示差检 测器是基于连续测定样品流路和参比流路之间折射率的变化来测定样品含量的光从一种 介质进入另一种介质时,由于两种物质的折射率不同就会产生折射只要样品组分与流动 相的折光指数不同,就可被检测,二者相差愈大,灵敏度愈高,在一定浓度范围内检测器 的输出与溶质浓度成正比4. 电化学检测器(elec)chemicaldetector,ED)电化学检测器主要有安培、极谱、库仑、电位、电导等检测器,属选择性检测器,可 检测具有电活性的化合物。
目前它已在各种无机和有机阴阳离子、生物组织和体液的代谢 物、食品添加剂、环境污染物、生化制品、农药及医药等的测定中获得了广泛的应用其 中,电导检测器在离子色谱中应用最多电化学检测器的优点是:① 灵敏度高,最小检测量?般为ng级,有目可达pg级;② 选择性好,可测定大量非电活性物质中极痕量的电活性物质;③ 线性范围宽,一般为4?5个数量级;④ 设备简单,成本较低;⑤ 易于自动操作5. 化学发光检测器(ciluminescencedetector, CD)化学发光检测器是近年来发展起来的一种快速、灵敏的新型检测器,因其设备简单、 价廉、线性范围宽等优点其原理是基于某些物质在常温下进行化学反应,生成处于激发 态势反应中间体或反应产物,当它们从激发态返回基态时,就发射出光子由于物质激发 态的能量是来自化学反应,故叫作化学发光当分离组分从色谱柱中洗脱出来后,立即与 适当的化学发光试剂混合,引起化学反应,导致发光物质产生辐射,其光强度与该物质的 浓度成正比这种检测器不需要光源,也不需要复杂的光学系统,只要有恒流泵,将化学发光试剂 以一定的流速泵入混合器中,使之与柱流出物迅速而又均匀地混合产生化学发光,通过光 电倍增管将光信号变成电信号,就可进行检测。
这种检测器的最小检出量可达10-12g检测1器TW IM r/(jj/ml)殁性范围选择性梯度淋洗主要特点紫外-可见光HJlfl】『口『有诃"流速和温度变化敏商; 池体积可制作得很小:对溶质的响应变化大荧光io1有nJ选择性和况敏度高;易受 背景荧光、消光、温度、 pH和溶剂的影也10"ioM『有/、可是离子性物质的通用检测 器:受温度和流速影响: 不能用于有机溶剂体系.电化学1TidID*有困赃选择性高.易受流动相画1 值和朵质的影响;稳定性 较差n蒸发光散射1V-无~可可检测所有物质示差砌10'r1俨无不可可检测所有物质;不适合微量分析;对温度变化敏&冲检贮 M本原理及比较检刑原理特点融点手打一汽< UV-VTS )检测 □g基于Lamberl-Beer定律,即涉则 组分对紫外光成可见光具有吸曲, 且咀收强度与组分浓度成正比,很多有机分子部具紫外或可见 光眼收基团,有按强的紫外或可 见光删嘛力,因dt uv-vis 测茬既有较高的灵敏度,也有很 ,一号『12中范叵,H F UV-VIS 寸W垣曲腐、监速、篮面相扣估 等的壹化不是很敏底'所以还能 用于梯度淋洗*1 ■对没有紫外/■可见温 长吸收的样吕无法 检测2.流动相的选择受到 •流动相组分对紫外 可见光的吸收影响, 现有紫外可见检测 器在常用的流动相「波长保十210nm时检那中果 瑾差i3 .不同他,孟正亘一松 测'波长下的响应因 子不冲丘二极管 阵列检 浏器 ';diode-array detector .DAD)以光电二极管阵列C^CCD阵外 己靶摄傻詈季)任为检测元件的 UV-VIS检测器。
它可构成多通谨 并行工作,同时密测由光掀分亓, 再入射到阵列式接受喜上的全部 '波长的信号「躲后,对二极言阵列 快速扫描采集数据,得到的是时 间、光强度和波长的三维谱图,与 者迫UV-VIS您地器K ufTJ^,.栏 通UV-VIS检测器是先用单邑器分 丑,-上「特产的$的开井."•湿寸 池,而二极管阵列UV-VIS检测器 岳亓丁所仁成长的亓都有订暗寸 '他,然后通过一系列分光"使 所白归长5亓<L任群嚣卜破律特点与紫外检测器相同,同时可 寸冗叩再汀一 =1.口.书泗叶石的 长下的吸收,1.与J外可见家测起 t=八.员敏度和1重现性低 于紫外检测备°「「目冲女日十吐位〒牛rpt t?示差 折光 检测[dizRr mt Lal reirac tornct ers.RI〕压埋:呈]样品组分的折射率与•演 动相溶剂折射漆有差异,当组分洗 脱出来时,会引起流动相折射巾的 变化,这神变化与样品组分的浓度 成正比RI检测器根据其设计原理可分为 反射型(根据Frand定律)、折射 型t很勿翎创定:律)A 1 §兰二 神类型.场差折之检测法也称折射指故 检测法■坦大多数物晨的折射率 与流动相都有差异,所以■ RI是 —种11用的检测方法•虽陵歧灵 地度比日他检测方法相比要低 1-3 W量知对于那些无紫外 吸收的有机物(如高分子化含 构、摧类、脂肪垸比:是比较适 合的■在淑胶色谱中是必备检测 副 在脆色唐中也经常使用*1-灵敏度很低2. Tn;Ffl干岐厅沽眄 系统老.在EfD〒.鼠T淳后工食前 取’七* M挎冲咨匚由害11. 器、加地璟移苜,、. '珞剂荟. 发室、、滞! 7t北浙和光农冲、•、cva器,.七电妆度露;等部rrporati南裁,包谙li流M沌守>. 零花若‘袪裁W〈 Jf缩宝lisht =、点冠气)夯优H.枝.细港s€ atte 滴.啾幅通辿上”注丁彖首rinS E- .沅项相口芭咨剂袖苍de:er: *淳,只舀一咨定,海牛 cii, 审照、土港后颖箱卜产牛卡F- SD 散井,严岐W咨岐隼散取+ =宙河元日佳埋首转耳 成电宕与“性#散井严强只右芷志 箍大■!■和数昌百K , ri、浴贡车身土怕埋和 化学也质尢关,折A ELSD届遥司坦和盾量 型枝测若。
透言于无紫 外吸收、无电活性和不 岌荧土豹杉呈的检.河、 S录卸尊与幕%流速- 汽化室温度和激光光源 强启竺参甜有妄■:习示 芹折于节咧帝和计,= r早发嶂停h专泠必费 Ou .悟度比高,也可=H 十梯度洗脱检测任何不挥 篇泛始,奏但精演的祥M北份札 只乎相同的响应因子,灵敏度高 于KL惬波长紫外检测器和其 fl ELSD, K需妄曰菖维护,可 打HPLC、GPC小SI C荏用1 .流动相相不能含有不 挥炭组分〔可使用有机酸 福曾代,• — •• — ZVA. • .•灵光 检浏 器< flu oresc cnce detect or)原理:许多有机切合物, 特别是芳音族屹合物、生 化物质,如有机服、维生 素、潦圭、酸等,桃一定 强度和波长的紫外光照射 后j发射出较激发光波长 要长的焚光焚光强度与 浪发光强虔、量子效率和 样品浓度成正比有的有 机化合物虽然本身不产生 灵光,但可以与发灵光物 腐反应衍生化后检测结构特点:有非常高的灵敏,度和良 好的选择性,灵敏度要比紫外检 测法离2.3个数室缀而旦所需 样品量很小,特别适合于药物和 生物化学择品的分析1. 样岳的送择性校强2. H它与紫外检现1器 相似。

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