遗传学第六章病毒的遗传分析培训讲学.ppt

第六章 病毒的遗传分析一、病毒的形态结构与基因组 P184二、噬菌体的增殖与突变型（一）噬菌体的增殖 P186（二）噬菌体的突变型1、条件致死突变 在某些条件下，导致某些突变型致死，而另 外一些条件下仍能增殖 致死条件为限制条件（restrictive condition) 增殖条件为许可条件（permissive condition)1）温度敏感突变 热敏感突变 冷敏感突变（2）抑制因子敏感突变（sus突变） sus突变 su+突变：宿主菌含有抑制基因su+， sus突变噬菌体感染此类菌时能产生后代 2、噬菌斑形态突变（1）T4噬菌体简介 T4噬菌体为T-偶列噬菌体之一，基因组为165Kb的双链DNA分子，包括160个基因，宿主为E.coli 形态特征 环状遗传学图（2） T4野生型和突变型侵染E.coli B 和E.coli K(）噬菌斑的变化 快速裂解（rapid lysis，r）突变：r-，形成大噬菌斑；r+，缓慢裂解，形成小噬菌斑 P191表8-4 T4 野生型和突变型的区别 类型 表型 B K(） 野生型 小噬菌斑 小噬菌斑 r 大噬菌斑 无噬菌斑 3、宿主范围突变型 宿主范围(host range，h)：h-表示可同时感染两种不同的E.coli菌株B，B-2，噬菌斑透明。

h+表示只感染菌株B，噬菌斑半透明三、噬菌体突变型的重组测验（一）Benzer的重组测验和基因的 精细结构分析实验：T4 r区两种突变型r63， r12同时侵 染E.coli B 和E.coli K(），结果如下： 重组率=2野生型噬菌斑数 100% 噬菌斑总数 重组测验：确定突变基因间的空间关系 （二）T2突变型的两点测交与作图（三）噬菌体的基因重组与作图（四）T4突变型的三点测交与作图四、噬菌体突变型的互补测验（一）互补测验与顺反子 互补测验：确定突变基因间的功能关系 判断两个突变是位于同一个基因内的突变，还是两个基因间的突变 互补：一种突变型能弥补另一种突变型不具有的功能这两种突变就称为彼此互补 顺式排列，反式排列 斑点测试法（spot test) P196 用一种r突变型以0.1的感染比（噬菌体1:细菌10）感染大肠杆菌K(），噬菌体和细菌在温热的琼脂中混合，涂布在营养平板上，琼脂凝固后，在平板上划出一定位置，再在上面滴加含另一种r突变型的培养基在这一滴培养基范围内，一些菌被两种噬菌体感染，如这范围内形成噬菌斑，就证明这两种突变型互补，相反则不互补 在一个培养基上可做68个斑点试验。

在反式测验中，如两个突变之间能互补，则表明两个突变是位于两个基因（顺反子）内的突变如两个突变之间不能互补，则表明两个突变是位于同一个基因内的突变 顺反子：一个不同突变之间没有互补的 功能区称为顺反子（cistron)二）基因内互补 例外情况如：沙门氏杆菌甘油磷酸脱氢酶基因；大肠杆菌和脉孢菌色氨酸合成酶 基因；脉孢菌谷氨酸脱氢酶基因1、基因内互补和基因间互补的区别 P2002、基因内互补的作用机制 P202图8-14五、噬菌体T4 r缺失突变与作图（一）缺失作图的原理 缺失突变（deletion mutation）：一个顺反子内缺失一段核苷酸的突变 点突变（point mutation）：一个顺反子内单个核苷酸发生的改变 当同一顺反子内的缺失突变和点突变重叠时，不能产生基因内重组, 因此无野生型噬菌体二）缺失作图的方法利用重叠缺失定位未知的r突变： 根据是否产生野生型噬菌体，系列将r突变定于A5片段；系列将r突变定于A5c区；系列将其定于A5c3区 r基因座A、B顺反子的部分突变图，每个正方形代表一个独立分离的突变六、噬菌体的基因组与位点专一性重组（一） 噬菌体的基因组 (二）位点专一性重组的分子机制 参与整合，切离主要的酶： 整合酶（Int); 整合宿主因子(IHF); 切离酶（Xis）。

七、环状排列与末端重复 基因组串联体。