正交实验优选二葛解酒颗粒提取工艺探究.doc

正交实验优选二葛解酒颗粒提取工艺探究【摘要】目的优选二葛解酒颗粒的最佳提取工艺方法采用正交实验法，以葛根素含量为考察指标，比较不同 乙醇浓度、溶剂用量及提取时间对提取效果的影响结果最 佳提取条件为10倍量50%乙醇,1.5h/次，80°C回流提取3 次结论该工艺所得葛根素含量较高，稳定性、重现性好, 可为二葛解酒颗粒的制备提供参考资料关键词】二葛解酒颗粒 葛根素正交实验 提取工艺Abstract : ObjectiveTo optimize the extraction technology of Ergejiejiu Granule ・ MethodsOrthogonal test was carried out .The influence of solvent concentration ,the dosage of solvent , and time of extraction on extraction results were investigated with the content of puerarin as index ・ Results The optimum extraction was described as follows : the concerntration of alcohol was 50% , volume of alcohol was 10 times amount of raw herb , and the herb was extracted 3 times with 1.5 h and 80°C for each time ・ ConclusionHigh content of puerarin is obtained with the present technology ・ The method is stable andreplicable and it can provide referenee for preparation ofErgejiejiu Granule.Key words : Ergejiejiu Granule ; Puerarin ;Orthogonal test ; Extraction technology少量饮酒能活血通络散寒，如恣饮无度，则成为“酒毒”而伤人肺腑[1 ]□许多资料表明[2 ],急性酒精中毒严重时 可导致意识障碍，呼吸和循环衰竭，甚至危及生命。

很久以 来，人们就采用各种方法来解除和减轻饮酒所带来的不适, 然而效果不甚明显因此，研究与开发有效的解酒药物是医 药市场的迫切需求二葛解酒颗粒由葛根、川夸、葛花等组 成，临床实践证明其对酒精中毒具有良好的治疗和预防作 用而作为君药的葛根主要含有葛根素等黄酮类化合物，现 代药理学证明，葛根素对酒精中毒有显著的治疗作用[3 ]□本文采用正交实验法，以葛根素为检测指标，对二葛解酒颗 粒的提取工艺进行优化选择1材料2450型紫外分光光度计（日本岛津b葛根购于武汉 市老百姓大药房，川莒、葛花购于湖北中医学院附属医院， 符合《中国药典》（2005年版一部）各药材项下之规定葛根 素对照品（中国药品生物制品检定所，批号752-200108 ）, 其余试剂均为分析纯2方法与结果2.1正交实验设计采用L9(34)正交表进行实验，以提取所得葛根素总量为指标，考察溶剂乙醇浓度(A)、提取时间(B)、溶剂用量(C) 3种因素对提取结果的影响因素水平详见表1表1正交实验因素水平(略)2.2提取工艺据文献报道[4 ],条件一定时温度越高,葛根素提取率增加，但到709后，提取率变化不明显常压 下,体系在70 ~ 809附近溶剂沸腾,沸点还要受到溶剂浓 度的影响。

故按处方称取葛根、葛花、川夸，按表2排定的 实验，于809进行回流提取，每个样品提取3次，分别将3 次滤液合并2.3含量测定2.3.1对照品溶液的配制取葛根素对照品适量，于 105°C恒温干燥2 h ,精确称取0.331 6g ,置于100 ml容量 瓶中，用30%乙醇3.35 ml温热3〜5 min ,溶解后加乙醇 定容至100 mlo从上述溶液中吸取1 ml置于100 ml容量瓶中，用乙醇定容至100 ml，即得葛根素标准液(33.16 pg/ml)2.3.2测定波长的确定将葛根素标准液、样品供试液在200-400 nm波长范围内进行光谱扫描，发现标准对照品在250 nm处有最大吸收且待测样品有较大吸收，故选择250 nm为测定波长2.3.3标准曲线的绘制取33.16 pg/ml的葛根素标准液0.2 , 0.4 , 0.6 , 0.8 , 1.0 ml ,分别置于10 ml容量瓶中,并分别加30%乙醇至3.35 ml后，加蒸憾水至刻度，摇匀以30%乙醇3.35ml加蒸馅水至10 ml的溶液做空白对照，于 250 nm波长处测定吸收度以浓度C ( pg/ml )为横坐标， 吸收度A为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程A = 0.065 3C・ 0.009 3 , r =0.999 1O 结果表明，葛根素在 0.663-3.316 pg/ml范围内与吸收度呈良好的线性关系。

2.3.4正交实验结果及分析按L9(34 )正交实验设计进行实验，结果见表2 ,方差分析见表33最佳工艺验证由表2和表3可知，二葛解酒颗粒的最佳提取条件为 A2B2C3 ,符合正交表设计的第5号实验，故按此条件进行 3次重复性验证实验，即制备3批该提取液经测定其葛根 素含量分别为2.601 , 2.661 , 2.643 mg/go验证试验结果与 正交实验结果吻合，表明重现性良好，工艺可行表2正交 实验结果(略)表3方差分析结果(略)4讨论现代研究表明[5〜6 ],葛根、葛花均能降低醉酒动物 血中乙醇浓度，起到解酒防醉的作用川茸能活血行气、祛瘀止痛，具有促进血液循环、加速乙醇代谢的作用而葛根 作为君药，其主要成分为葛根素等黄酮类物质，故选用葛根 素为提取工艺的评价指标由表2可知，影响提取效果的主次因素顺序为：C>A>B，即溶剂用量>乙醇浓度>提取时间最佳 提取条件为A2B2C3 ,即在50%乙醇、每次提取时间1.5 h、 溶剂用量为10倍、809、提取3次的条件下，提取液的葛 根素含量较高方差分析结果表明，溶剂用量对提取结果的 影响非常显著，提取时间和乙醇浓度对提取结果均有显著影 响。

最佳工艺验证实验也表明，用正交实验优选的提取工艺 稳定、重现性好，故本文为二葛解酒颗粒的制备工艺提供了 一定的实验依据参考文献】[1 ]张若明，李经才•解酒天然药物研究进展[J ]・ 沈阳药科大学学报,2001 , 18(2) : 138.[2 ]柏喜桂，周保林，章忠林•急性酒精中毒证治探讨[J ]・中国中医急症,2006,15 ( 3 ): 276.[3 ]郑 皓•葛根的研究与开发现状[J ] •氨基酸和生物资源,2006 , 28(2) : 24.[4]黄银秀，谢 果.用正交试验优选葛根黄酮的提取工艺研究[J ] •中国现代临床医学杂志，2006 , 5 ( 3 ): 1.[5 ]周红雨•葛花改善肾囊肿无水酒精硬化治疗所致醉 酒样反应的作用[J ].临床超声医学杂志，2006 ,8 ( 4 ): 250.[6 ]张会香，杨世军•葛根解酒饮料的研究[J ]・实验 报告与理论研究,2006 ,9 ( 1 ): 31.。