中药药理中药毒理学.ppt

单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,*,,*,第六章,,中药毒理学,,§1,概,,述,中药毒理学〔Toxicology of TCM〕：,,是研究中药对生物体有害效应、机制、平安性评价与危险度评定的科学,中药“毒〞 含义：,,〔1〕“毒〞就是药,,凡治病之药皆为毒药，如?周礼·天官家宰?“医师掌医之政令，聚毒药以供医事〞,,〔2〕“毒〞指中药的偏性,,张介宾在?类经·疾病类·五脏病气法时?中说：药以治病，以毒为能所谓毒者，因气味之偏也，盖气味之偏，药饵之属也，所以祛人之邪气,,〔3〕“毒〞是指中药的毒副作用,,有毒中药药性强烈，平安剂量小，用之不当，即对人体产生危害,,,现代认识：,,中药毒性是指中药对机体所产生的不良反响　－－毒性反响、副作用、过敏反响、后遗效应、　　　特异质反响和依赖性等,,〔1〕毒性反响,,是指剂量过大或用药时间过长所引起的机体形态结构、生理机能、生化代谢的病理变化,,－－急性毒性、慢性毒性和特殊毒性,,★急性毒性　是指有毒中药短时间内进入机体，很快出现中毒病症甚至死亡,,如半夏：服少量即出现口舌麻木，多那么灼痛肿胀、　　　　　不能发音,★慢性毒性,,是指长期服用或屡次重复使用有毒中药所出现的不　　良反响,,如雷公藤：长时间服用，可损害肝、肾及生殖功能,病理睾丸,病理,,肾脏,正常,,睾丸,正常,,肾,,脏,★,特殊毒性,,－－,致畸、致癌、致突变,,,√,甘遂、芜花、莪术萜类、天花粉蛋白、乌头碱,,,等有致畸作用,,,√,芫花、狼毒、巴豆、甘遂、千金子、,β-,细辛醚、,,,黄樟醚、马兜铃酸、斑蝥素等过量长期应用，,,,可增加致癌率,,,√,雷公藤、石菖蒲、洋金花、马兜铃酸等有致突,,,变的作用,,,〔2〕副作用,,是指在治疗剂量下所出现的与治疗目的无关的作用,,√麻黄：治疗哮喘时患者会出现失眠,,〔3〕过敏反响又叫变态反响,,是指机体受到中药或中药成分的抗原或半抗原刺激　后，体内产生了抗体，当该药再次进入机体时，发,,生抗原抗体结合反响，造成损伤,,√当归、丹参、穿心莲等引起荨麻疹　 √牡蛎、瓦楞子等可引起过敏性腹泻,,√丹参注射液引起过敏性休克,,,,〔4〕后遗效应〔或称后作用〕,,是指停药后血药浓度已降至最低有效浓度以下时残 存的药物效应,,洋金花等可致次日口干、视物模糊,,〔5〕特异质反响,,是指少数人应用某些中药后，所产生作用性质与常 人不同的损害性反响,,蚕豆引起溶血性黄疸，因红细胞膜内缺乏葡萄糖　　－6－磷酸脱氢酶,,〔6〕依赖性,,是指反复或长期应用某些中药，患者产生心理或生　理依赖，一旦停药，就出现戒断病症,,牛黄解毒片、应用风油精等出现精神依赖 　 罂粟壳、麻黄等出现生理依赖,〔1〕致死剂量或浓度：是指在急性毒性试验中外源 化学物引起受试实验动物死亡的剂量或浓度,,表示方法：,,★绝对致死量或浓度：LD100或LC100,,★半数致死剂量或浓度：LD50或LC50,,★最小致死剂量或浓度：MLD，LD01或MLC，LC01,,★最大耐受剂量或浓度：MTD，LD0或MTC，LC0,药,物毒性的常用指标,〔2〕阈剂量：指化学物质引起受试对象中的少数个 体出现某种最轻微的异常改变所需要的最低剂量　★急性阈剂量：Limac,,★慢性阈剂量：Limch,〔3〕最大无作用剂量〔ED0〕 ：指化学物质在一定　时间内，按一定方式与机体接触，用现代的检测　方法和最灵敏的观察指标不能发现任何损害作用　的最高剂量,,－－又称未观察到损害作用的剂量(NOAEL),,－－动物实验获得的NOAEL是制定人群平安限值的重要依据,,〔4〕毒作用带〔toxic effect zone〕 ：阈剂量作用下限　与致死毒作用上限之间的距离,,－－是综合评价外源性化学物质毒性和毒作用特点的重要参数之一,,★急性毒作用带〔 Zac〕： LD50／Limac,　比值越大越平安,,★慢性毒作用带〔Zch〕：Limac／Limch，比值越大危险性越大,,〔5〕治疗指数(TI) ：是新药研发的重要参考指标　　TI=LD50/ED50，比值越大越平安,§２　中药毒理学根本特点,1.,生物碱类,,,★,含乌头碱的中药有川乌、草乌、附子、天雄,等,,,乌头碱内服,0.2mg,即可中毒，,2,～,5mg,即可致死,,,原因：,√,使中枢神经与周围神经先兴奋后抑制,,,√,直接作用于心脏，导致心律失常、室颤,,,★,含,雷公藤碱的中药有雷公藤、昆明山海棠等,,,,√,视丘、中脑、延脑、脊髓的病理改变,,,√,肝脏、肾脏、心脏可发生出血与坏死,,,★,洋金花所含莨菪碱、东莨菪碱,,,阻断,M,受体，,有抑制或麻痹迷走神经等副交感神经作用,一、毒性成分复杂,2.苷类,,----强心苷、皂苷、氰苷和黄酮苷等,,★洋地黄、万年青、八角枫、蟾酥、夹竹桃等含强 心苷，较大剂量或长时间应 用可致心脏中毒,,传导阻滞、心动过缓、异位节律、心室纤颤,,★杏仁、桃仁等含氰苷，在体内被酶水解产生氰氢　酸，能迅速与细胞线粒体膜上氧化型细胞色素酶　的三价铁结合，阻止细胞的氧化反响,,表现：组织缺氧，如头昏、头痛、呼吸困难，严重者可因 窒息及呼吸衰竭而死亡,,★商陆、黄药子等所含皂苷,,－－肠胃刺激病症 ，产生腹痛、腹泻,,★芫花、广豆根等所含黄酮苷,,－－刺激胃肠道和导致 肝脏损害,3.毒蛋白类,,毒蛋白主要存在于植物的种子中，对胃肠粘膜有强烈的刺激和腐蚀作用，能引起广泛性内脏出血 ★巴豆、苍耳子、蓖麻子均含有毒蛋白，中毒反响为剧烈 吐泻、呕血、血尿、甚至惊厥、死亡,,4.含萜及内酯类,,局部刺激，内服可引起肝损害、 抑制,,★艾叶油、苦艾素，皮肤刺激，内服可刺激胃肠道及肝损害,,★马桑内酯可兴奋大脑及延脑,,5.重金属：砷、汞、铅,,★砒石成分为三氧化二砷，雄黄含硫化砷,,急性中毒者有口腔、胃肠道黏膜水肿、出血、坏死、　血压降低、肝脏萎缩、中枢神经损害以及心肾的严重损害,,★水银、轻粉、朱砂等含汞类中药，具刺激和腐蚀作用，并能　　抑制多种酶的活性,二、毒性表现多样,1.,心血管系统,,,心悸、胸闷、发绀、心动过速、心动过缓、心律失常、,,,传导阻滞、血压升高或下降、循环衰竭死亡等,,,★,,含强心苷的药物如万年青、夹竹桃、蟾酥,抑制,Na,+,,K,+,-,,ATP,酶的活性，使心肌细胞大量失钾，,提高心肌的兴奋,,,性和自律性,,2.,呼吸系统,,,胸闷、咳嗽咯血、呼吸困难、哮喘、急性肺水肿、呼吸,,,肌麻痹或呼吸衰竭，甚至窒息死亡等,,,★,天花粉、瓜蒂、藜芦、乌头、半夏，双黄连针剂等,：,,,上呼吸道急性炎症,3.神经系统,,昏迷、知觉麻痹、四肢麻木、肌肉麻痹、四肢无力、共济失调、牙关紧闭、抽搐、惊厥、记忆障碍、瞳孔缩小或散大、阵发性痉挛、强直性痉挛、脑水肿，甚至死亡等,,★附子、洋金花、火麻仁、骨碎补、樟脑：精神异常,,4.消化系统,,恶心、呕吐、食欲不振、口腔粘膜水肿，糜烂或出血、食管烧灼疼痛、腹胀、腹痛、腹泻、二便出血、便秘、消化道出血、黄疸、肝肿大、肝功能损害，中毒性肝炎、肝细胞坏死，甚至死亡等,,★黄芩、芒硝：胃部不适,,★鸦胆子、苦参、生大黄：呕吐,,★独活〔花椒毒素〕、青黛〔靛玉红〕：肝脏损害,正常,病理,5.,泌尿系统,,,洋金花、大戟、甘遂、斑蝥、雷公藤、甘草等,：,,,★,腰痛、浮肿、尿频、尿急、尿痛、尿少、尿闭,,,、尿毒症、急性肾功能衰竭，甚至死亡。

6.,造血系统,,,洋金花、芫花、斑蝥等,：,,,★,白细胞减少、粒细胞缺乏、溶血性贫血、再生障,,,碍性贫血、紫癜、变性血红蛋白症，甚至死亡等,,7.,生殖系统,,,天花粉蛋白注射液、月见草油胶囊、刺五加注射液,,,、复方青黛片、速效伤风胶囊、红花油等,,,★,闭经、月经不调、性功能障碍、早产、流产,三、毒性可以控制,1.选用正品药材,,四川、陕西、湖北、重庆、云南五个产地附子的毒性：,,★　云南附子的毒性是川产附子毒性的18倍,,2.依法炮制,,★生附子、盐附子的酯性生物碱、乌头碱含量较高，毒性大,,★白附片、黑顺片等炮制品种，毒性明显减轻,,3.对证用药,,★附子成效：回阳救逆、补火助阳、散寒除湿止痛,,★合理的病证模型：肾阳虚证、虚寒证动物模型,,4.合理配伍,,附子配甘草、附子配干姜、附子配人参：,,－－能减少酯性生物碱，降低毒性，增加疗效,,5.掌握煎服方法,,生附子 、白附片、黑顺片不同煎煮时间的毒性,,－－与酯性生物碱和总碱的含量成正相关,§3,,中药毒理学研究方法,1.急性毒性实验,,1次或24h内屡次给予动物受试药物后，短期〔最长到14天〕　内观察受试药物所产生的毒性反响及动物死亡状况,,目的：√初步估计毒性大小,,√提供可能的毒性靶器官及可能死亡原因的信息,,√提示在后续试验中需要重点观察的指标信息,,√为长期毒性试验剂量设计提供重要的参考依据,,√为临床用药的平安及监测提供依据,,√减少试验中的风险,,方法：LD50法、最大耐受量法和最大给药量,一、毒理学实验,2.长期毒性实验,,长期、反复给予受试药，长期观察实验动物所表现的毒性特征。

目的：,,(1)预测受试物可能引起的临床不良反响,,(2)推测受试物重复给药的临床毒性靶器官或靶组织，为临床　　平安用药的剂量设置提供参考依据,,(3)预测临床实验的起始剂量和重复用药的平安剂量范围,,(4)提示临床实验中需重点监测的生理生化指标,,常用动物：,,大鼠、犬、家兔和豚鼠，特别需要也可用猴,组别：,,至少应设3个剂量组和溶媒或赋形剂对照组　必要时还需设立空白对照组和/或阳性对照组,,给药途径：,,一般要求与临床拟用途径一致,,剂量设计：,,高剂量：使动物出现明显毒性或严重的毒性反响或　　　　　个别动物出现死亡,,中剂量：使动物出现轻微的或中等程度的毒性反响　　　　　且其剂量在高、低剂量之间并与二者成倍　　　　　数关系,,低剂量：应高于药效学试验的最正确有效剂量且动物　　　　　不出现毒性反响的原那么,实验期,限：,临床疗程,试验给药期限,,啮齿类动物,非啮齿类动物,,能支持临床,,研究阶段,单次给药,2周,2周,I期、II期、III期,≤,2周,1个月,1个月,I期、II期、III期,＞,2周,*,1个月,1个月,I期,≤,1个月,1个月,1个月,II期,,3个月,3个月,III期,≤,3个月,3个月,3个月,II期,,6个月,6个月,III期,≤,6个月,6个月,6个月,II期,,6个月,9个月,III期,＞,6个月,6个月,9个月,II期,,6个月,9个月,III期,观察指标：,,①一般状况观察,,动物外观体征、行为活动、腺体分泌、呼吸、粪便、摄食量、体重、给药局部反响。

对非啮齿类动物还应进行体温、眼科检查、尿液检查、心电图检查等,,②检测指标,,连续给药时间≤3个月，每组大鼠20只，雌雄各半：,,a.实验结束后各组剖杀1/2大鼠，雌雄各半,,b.停药2-4周后，另1/2大鼠做恢复期检查,,连续给药时间6个月，每组大鼠40只，雌雄各半：,,a.实验中期，各组剖杀1/4大鼠，雌雄各半,,b.实验结束后各组剖杀2/4大鼠，雌雄各半,,c.停药2-4周后，余1/4大鼠做恢复期检查,〔1〕血液学指标：凝血酶原时间、红细胞及血小板计 数、白细胞计数及分类、网织红细 胞计数、血红蛋白等,,〔2〕血液生化指标：ALT、AST、AKP、TBIL、CHOL、 TP、ALB、Urea、Cr、UA、BUN、 Glu、G、A/G、电解质等,〔3〕系统尸解及病理组织学检查,,A. 肉眼观察,,各主要脏器色泽、质地、肿块及空腹脏器粘膜情况等,,B. 脏器称重和脏器系数,,心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、肾上腺、睾丸、 附睾、卵巢、子宫等称重并计算其脏器系数,,C. 病理组织学检查,,心、肝、脾、肺、肾、胃、十二指肠、回肠、结肠、胰 腺、甲状腺、肾上腺、胸腺、脑、脊髓、视神经、脑垂体、 淋巴结、膀胱、前列腺、睾丸、附睾、卵巢、子宫、胸骨及 骨髓等进行病理组织学检查,3.局部毒性实验,,内容：刺激性实验、皮肤过敏性实验、溶血性实验、　　　过敏性实验、光敏性实验等,,★刺激性实验,,是考察动物的血管、肌肉、皮肤、粘膜及眼等部位接触受试物后是否引起红肿、充血、渗出、变性、坏死或结膜充血、水肿及分泌物增多等局部反响　有血管刺激性、肌肉刺激性、皮肤刺激性、眼刺激性、肠粘膜刺激性和子宫粘膜刺激性等实验,★皮肤过敏性实验,,是观察外用中药较长时间接触皮肤后，对机体是否产生如红斑、丘疹、瘙痒等过敏性反响的试验方法,,★皮肤光敏性实验,,主要用于预测皮肤外用中药对人类的光敏性危险发生率，分为皮肤光敏实验和光毒性实验2种,★溶血性实验,,是指观察受试物是否引起溶血和红细胞凝集的反响，体外溶血性实验是评价中药有无溶血作用的常用方法，但体外实验结果易致假阳性，故实验结果仅供参考,4.一般药理实验,,√是指除受试物主要药效学以外广泛的药理作用研究,,√是在一次性给予动物试验药物后观察其对动物,,中枢神经、心血管、呼吸等系统的影响研究,,目的：,,√确定可能关系到人的平安性的非期望出现的药物效应,,√评价受试药的不良反响及病理生理作用,,√推测药物导致不良反响的作用机制,,√为临床研究和平安用药提供信息,,√为长期毒性试验设计和开发新的适应症提供参考,5.特殊毒性实验,,致突变、致畸、致癌实验,,目的： 证实受试药物有无“三致〞，为临床该药　　　　的受试人群提供参考信息，降低临床风险,,致突变研究方法：遗传基因突变实验　　　　　　　　染色体畸变实验,,DNA损伤实验,,生殖毒性实验：一般生殖毒性　　　　　　　致畸敏感期生殖毒性,,围产期生殖毒性,,致癌实验：有效成分、中药新药材、中药材新的药用部位、无法定标准的中药材代用品、含有与致癌物有关、代谢产物与致癌物质相似的成分,二、毒作用机制研究,1.中药毒性物质在生物体内的生物转运与生物转化,,2.中药毒性物质的毒作用机理,,〔1〕终毒物,,是指与内源靶分子〔如受体、酶、DNA、微丝蛋白、脂质〕相互作用或严重地改变生物学〔微〕环境，使整体性结构和〔或〕功能改变而表现出毒性作用的物质,,终毒物可为机体所暴露的：,,原化学物〔母体化合物〕,,代谢产物,,内源性分子,〔2〕毒性物质的毒作用主要机制,,基因表达调节障碍：转录调节障碍,,信号转导调节障碍,,细胞外信号分子变化,,细胞瞬息活动的调节障碍：细胞内钙稳态的失调,,〔3〕机体内生物大分子氧化损伤,,自由基造成的毒性作用,,〔4〕毒性物质与细胞大分子的共价结合,,毒性物质或其活性代谢产物可以与机体的核酸、　　蛋白质等重要大分子发生共价结合，从而改变　　其化学结构或生物学功能,三、评价分析与管理,①毒理学平安性评价程序：采用分阶段进行的原那么,,②不同阶段的毒理学试验工程,,第一阶段----急性毒性试验和局部毒性试验,,第二阶段----重复剂量毒性试验、遗传毒性试验与发育毒性试验,,第三阶段----亚慢性毒性试验、生殖毒性试验和毒动学试验,,第四阶段----慢性毒性试验和致癌试验,,毒理学危险性分析：,,是指对机体、系统或人群可能暴露于某一危害的控制过程,,有：危险度评定、危险性管理、危险性交流,按照管理毒理学的要求，作好以下工作：,,(1)良好实验室工作标准〔GLP〕,,(2)动物保护与3Rs原那么，对实验动物实施人道主义　管理，即安死术、仁慈终点和3Rs原那么,,3Rs原那么是指Replacement 替代,,Reduction减少,,Refinement优化,,(3)人体医学科学研究的伦理学要求，涉及人体试　验者，应当遵循以下原那么：,,?赫尔辛基宣言?,,?人体生物医学研究国际伦理指南?,,?药物临床试验质量管理标准?,,建立伦理审查委员会和知情同意原那么,学习要点,,,1.中药不良反响有哪些？药物毒性的常用指 标是什么？,,2.中药毒理学的根本特点,,3.中药毒理学研究方法,,4.GLP、3Rs原那么,。