新冠核酸检测实验室质量控制和生物安全培训ppt课件.pptx

XXXXXXXXXX2021-03-30XXXXX1123主要内主要内容容1主要内容2一、一、新冠核酸新冠核酸检检测测相关依相关依据据一、新冠核酸检测3新冠疫情国家相关新冠疫情国家相关规规定定：关于做好新冠疫情常态化防控工作的指导意见（国发明电202014 号）新冠防控方案（第七版）新冠诊疗方案（第八版）实验实验室建室建设设和和检测检测：医疗机构临床基因扩增实验室管理办法（卫办医政发2010194号）医疗机构新冠核酸检测工作手册（试行 第二版）（联防联控机制医疗发2020313号）新冠实验室生物安全指南（第二版）关于进一步加强集中隔离点新冠核酸样本采集检测工作的通知（联防联控机制医疗发2020311 号）4新冠疫情国家相关规定：44二、二、实验实验室室质质量控量控制制实验室要求质量控制二、实验室质量控制实验室要求质量控制5（一）（一）实验实验室要室要求求1、实验室基本要求：符合病原微生物实验室生物安全管理条例具备经过卫生健康行政部门审核备案的生物安全二级及 以上实验室条件具备基因扩增检验实验室条件一）实验室要求1、实验室基本要求：6试剂准备间核酸提取核酸提取间间核酸扩增间产物分析间缓缓冲冲间间缓缓冲冲间间缓缓冲冲间间缓缓冲冲间间原则上设4个区个区域域，各区域在物理空间上必须是完全相互独立完全相互独立，无论是在空间 上还是在使用中，应当始终处于完全分隔状态，不能有空气的直接相不能有空气的直接相通通。

人人员员流流动严动严格按照格按照单单一方向，一方向，试剂试剂准准备备区区核酸提取核酸提取间间扩扩增区增区 扩扩增增产产物分析物分析区区不同工作区域内的不同工作区域内的设备设备、物品不得混、物品不得混用用不同的工作区域使用不同的工作服（例如不同的不同的工作区域使用不同的工作服（例如不同的颜颜色色）（一）（一）实验实验室要求室要求合理分合理分区区核酸提取间缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间原则上设4个区域，各区域在7标标本接收人本接收人员员的个人防的个人防护护：按采：按采样样人人员员防防护护装装备执备执行行样样本双本双签签收：收：标标本运送人本运送人员员+接收人接收人员员采采样样人人员员防防护护装装备备：N95N95及以上防及以上防护护口口罩罩护护目目镜镜防防护护服、乳胶手套、防水靴服、乳胶手套、防水靴套套每采一个人每采一个人应应当当进进行行严严格手格手 消消 毒或更毒或更换换手手套套1 1、采、采样样收收样样！注意注意检查标检查标本是否泄本是否泄漏漏若有泄漏，及若有泄漏，及时进时进行消毒行消毒处处理并重新采理并重新采样样在新冠疫苗接种点及相在新冠疫苗接种点及相邻邻区域内区域内不得开展不得开展人人员员新冠核酸新冠核酸检测检测的的采采样样工工作作。

新冠疫苗接种当天，所有受种者和接种点工作人新冠疫苗接种当天，所有受种者和接种点工作人员员不得开展不得开展核酸核酸检检测测 采采样样负责负责新冠疫苗接种点医新冠疫苗接种点医护护人人员员等工作人等工作人员员在离开接种区域前要在离开接种区域前要严严格格按按 要求做好个人防要求做好个人防护护用品用品处处理、理、手部清手部清洁洁和消毒和消毒原原则则上，在接种点工作的医上，在接种点工作的医护护人人员员不得从事不得从事新冠核酸采新冠核酸采样样和和检测检测工作工作；如必如必须须从事采从事采样检测样检测工作，工作，应应在离开接种点在离开接种点2424小小时时后方可开展，采后方可开展，采样样 前前须严须严格更格更换换新的个人防新的个人防护护用品，用品，严严格手清格手清洁洁和消毒和消毒标本接收人员的个人防护：按采样人员防护装备执行样本双签收：标8试剂试剂盒开盒开封封立即取出阳性立即取出阳性对对照和阴性照和阴性对对照照 放置核酸提取放置核酸提取间间（如（如传递传递窗窗）所有所有试剂试剂充分解充分解冻冻，混匀离心后分，混匀离心后分装装个人防个人防护护（本区域（本区域专专用用实验实验服服）2 2、试剂试剂准准备备间间主要功能主要功能：贮贮存存试试剂剂、试试剂剂的的分分 装装和和扩扩增增反反应应体体系系的的 制制备备离离心心管管、带带滤滤芯芯的的吸吸 头头等等消消耗耗品品的的贮贮存存和和 准准备备试剂盒开封立即取出阳性对照和阴性对照 放置核酸提取间（如传递9吸取吸取标标本本实验结实验结束后束后处处理理：消毒消毒实验实验台台 面面 和和仪仪器器表表 面面更更换换手手套套医医疗废疗废物即物即清清加加样枪样枪切切勿勿 插插 进进管管内内加阴性加阴性对对照照和和室室 内弱阳性内弱阳性质质控控品品先加先加样样本核本核酸酸和和 试剂试剂阴性阴性对对照照封膜或盖封膜或盖管管最后加阳性最后加阳性对对照照核酸加样（生物安全二（生物安全二级实验级实验室室）提取核提取核酸酸样样本盖子本盖子拧拧紧紧充分震充分震荡荡、离、离心心生物安全生物安全:人人员员防防护护按照生物安全三按照生物安全三 级级 实验实验室防室防护护水水平平在生物安全二在生物安全二级实验级实验室开展，室开展，双人操双人操作作吸取吸取样样本在安全柜内操本在安全柜内操作作核酸加核酸加样样在安全柜内操在安全柜内操作作离开安全柜更离开安全柜更换换手手套套3 3、核酸提取、核酸提取间间主要功能主要功能：标标本本转转运桶的开运桶的开启启标标本的本的灭灭活（适用活（适用时时）核酸提取及其加入至核酸提取及其加入至扩扩增增 反反应应管（板）管（板）等等吸取标本实验结束后处理：消毒实验台 面 和仪器表 面加样枪切10个人防个人防护护：本区域：本区域专专用用实验实验服服核核对扩对扩增程增程序序确保反确保反应应板或管密板或管密封封离心、上离心、上机机 结结果判定果判定严严格按照格按照试剂试剂盒盒说说明明书进书进行行 扩扩增增结结束后束后，严严禁开禁开盖盖，及及时时清理反清理反应应板板，按一般医，按一般医疗废疗废弃物弃物处处理理4 4、核酸、核酸扩扩增增间间主要功能主要功能：核酸核酸扩扩增增个人防护：本区域专用实验服核对扩增程序确保反应板或管密封4、11（一）（一）实验实验室要求室要求检测检测要要求求实验室应当将重点人员样本和一般健康筛查人群样本分区存 放、分批检测在检测过程中，由于样品盖的打开、核酸提取的振动和离心 作用，可能产生气溶胶，存在感染和污染的风险。

所有的实 验操作要轻柔，避免气溶胶的产生生物安全柜每次使用后应该用消毒剂消毒后紫外线照射至少 30min；核酸提取仪、荧光PCR等，离心机等设备每天用酒 精擦拭消毒；必要时用去核酸污染试剂擦拭上述设备，擦拭 完毕后必须用清水彻底清洁，以免出现假阴性一）实验室要求检测要求实验室应当将重点人员样本和一般健12（二）（二）质质量控量控制制各新冠核酸检测机构应当加强实验过程质量控制，避免交叉污染，提高检测准确性实验室严格分区，实验服及物品专区专用，切忌混用二）质量控制各新冠核酸检测机构应当加强实验过程质量控制，避13（二）（二）质质量控量控制制1、人员培训：采样和检测人员生物安全培训采样人员采样技术培训检测人员核酸检测技术培训线上、线下、手把手、现场（二）质量控制1、人员培训：14（二）（二）质质量控量控制制2、试剂、设备性能验证：在用于临床标本检测前，实验室应对由提取试剂、提取仪、扩增试剂、扩 增仪等组成检测系统进行必要的性能验证，性能指标包括但不限于仪器的 精密度（至少要有重复性）、试剂的灵敏度和最低检测限建议选用高灵敏的试剂（检测限500 拷贝/ml）关于加关于加强强新冠肺炎患者出院核酸新冠肺炎患者出院核酸检测检测工作的通知（工作的通知（联联防防联联控机制医控机制医疗发疗发202137202137号号）（二）质量控制2、试剂、设备性能验证：关于加强新冠肺炎患者15（二）（二）质质量控量控制制3、规范室内质控：每批检测至少有1 份弱阳性质控品（通常为检出限的1.53倍）、3 份阴性 质控品（生理盐水）。

质控品随机放在标本中，参与从提取到扩增的全过程4、常规性参加室间质评：实验室应常态化参加国家或广东省疾控中心组织的室间质评不按要求参加室间质评的，或室间质评结果不合格的，或检测结果质量问 题突出的，不得开展核酸检测广东省新冠防控指挥办医疗救治组转发关于进一步加强集中隔离点新冠核酸样本采集检测工作的通知（粤卫医函2020151号）（二）质量控制3、规范室内质控：广东省新冠防控指挥办医疗救16（二）（二）质质量控量控制制5、检测过程质量控制要点：试剂配制时，试剂盒阳性对照和阴性对照要提前取出放置在核酸提取间，待全部待测标本加样完毕并封装好后再取出核酸提取时，应双人操作，在生物安全柜内用带滤芯的吸头吸取标本，加 样枪切勿插进管内核酸加样时，先加标本核酸和阴性对照试剂，封膜或盖管，最后加阳性对 照，确保反应板或管密封后离心、上机对于重要的标本，可用两种不同厂家的试剂同时检测一旦出现污染，立即停止所有实验，所有参与本次实验过程中的耗材和实 验全部扔掉实验室通风！检测合格后方可重新开始实验二）质量控制5、检测过程质量控制要点：17（二）（二）质质量控量控制制6、结果报告隔离点隔离人员第14天解除隔离前，双试剂检测，省新冠病毒核酸检测 信息系统录入两条检测记录（二）质量控制6、结果报告隔离点隔离人员第14天解除隔离前，18（二）（二）质质量控量控制制6、结果报告（二）质量控制6、结果报告19（二）（二）质质量控量控制制6、结果报告（二）质量控制6、结果报告20三三.实验实验室生物安室生物安全全实验实验室室检检测测 安全管安全管理理实验实验室医室医疗疗 废废物管物管理理实验实验室室污污染染 处处理理三.实验室生物安全实验室检测 安全管理实验室医疗 废物管理21实验实验室生物安室生物安全全重要参考依据：实验室生物安全管理参照新型冠状病毒实验 室生物安全指南（第二版）（国卫办科教函202070 号）医疗废物管理条例（中华人民共和国国务 院第380 号令）执行。

实验室生物安全重要参考依据：22（一）（一）实验实验室室检测检测安全管安全管理理1、基本要求：核酸检测应在生物安全风险评估的基础上，采取适当的个体防护 措施，包括双层手套、一次性帽子、N95口罩、面罩/眼罩、鞋套/靴套、隔离衣/防护服等2.实验前安全要求：应使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行桌面、台面及地面消毒消 毒液需每天新鲜配制转运至实验室的标本转运桶应在生物安全柜内开启，开启前，须使 用75%酒精或0.2%含氯消毒剂喷洒消毒一）实验室检测安全管理1、基本要求：23（一）（一）实验实验室室检测检测安全管安全管理理3.核酸提取和检测安全要求：标本进行核酸提取和检测时应在生物安全柜内进行操作有产生气溶胶风险的操作须在生物安全柜内进行每次实验操作完毕离开生物安全柜前，需脱掉外层手套，更换新手套4.实验结束后清洁要求：实验室空气清洁：紫外照射2 小时以上，必要时可采用核酸 清除剂等试剂清除实验室残留核酸工作台面清洁：0.2%含氯消毒剂或75%酒精生物安全柜消毒：紫外灯照射30 分钟转运容器消毒：0.2%含氯消毒剂或75%酒精擦拭或喷洒塑料或有机玻璃材质物品清洁：0.2%含氯消毒剂或过氧乙酸 或过氧化氢擦拭或喷洒。

一）实验室检测安全管理3.核酸提取和检测安全要求：24（二）（二）实验实验室医室医疗废疗废物管物管理理医疗废物的处理是控制实验室安全的关键环节，必须充分掌握 生物安全废弃物的分类，并严格执行相应的处理程序1、废液的处理：普通污水排入实验室污水处理系统，处理达标后进行排放感染性废液需采用化学消毒（0.55 含氯消毒剂处理）或物 理消毒（紫外照射30分钟以上），彻底消毒灭活排入实验室 水处理系统，处理达标后排放隔离点污水：关于进一步加强对隔离场所（酒店）消毒和 监测管理工作的通知（粤疾控函2020660号）（二）实验室医疗废物管理医疗废物的处理是控制实验室安全的关键25（二）（二）实验实验室医室医疗废疗废物管物管理理2、固体废物的处理：分类收集，收集容器应当不易破裂、防渗漏、耐湿耐热、可密封实验室内的潜在感染性废物不允许堆积存放，应当及时进 行压力蒸汽灭菌处理废物处置之前，应当存放在实验室内指定的安全位置小型固体废物如检测耗材、个人防护装备等均需使用双层 防渗漏专用包装袋打包密封后经过压力蒸汽灭菌处理，再 转运出实验室二）实验室医疗废物管理2、固体废物的处理：26（三）（三）实验实验室室污污染的染的处处理理1、清理污染物时遵循活病毒生物安全操作要求：采用压力蒸汽灭菌处理，并进行实验室换气等，防止 次生危害。

2、标本污染生物安全柜造成局限污染时：立即用吸水纸覆盖，并使用0.55%含氯消毒剂进行喷 洒消毒消毒液需要现用现配，24 小时内使用三）实验室污染的处理1、清理污染物时遵循活病毒生物安全操作27（三）（三）实验实验室室污污染的染的处处理理3、标本倾覆造成实验室污染时：保持实验室空间密闭，避免污染物扩散立即使用润湿有0.55%含氯消毒剂的毛巾覆盖污染区必要时（如大量溢撒时）可用过氧乙酸加热熏蒸实验室，剂量为2g/m，熏蒸过夜；或20g/L 过氧乙酸消毒液用气溶胶喷雾器喷雾，用量8ml/m，作用12 小时；或用高锰酸钾-甲醛熏蒸：高锰酸钾8g/m，放入耐热耐腐蚀容器（陶罐或玻璃容器），后加入甲醛（40%）10mL/m，熏蒸4 小时 以上熏蒸时室内湿度60%80%三）实验室污染的处理3、标本倾覆造成实验室污染时：28（四）（四）实验实验室的管室的管理理提高防污染意识严格遵守实验室规则加强对实验人员的培训做好实验准备工作注意实验操作细节妥善存放实验设备和试剂耗材细节细节决定成决定成败败！（四）实验室的管理提高防污染意识细节决定成败！29新冠核酸检测实验室质量控制和生物安全培训ppt课件30。