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遗传学实验课件.ppt

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  • 上传时间:2019-10-24
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    • 细胞的有丝分裂,目的要求 观察植物根尖细胞有丝分裂各个时期染色体的变化和特征 实验材料 洋葱(2n=16)的鳞茎 步骤方法 将洋葱鳞茎下部浸入水中,当根长出1~2cm时,切下根尖 预处理:将取下的洋葱根尖(0.5~1cm)放在0.04~0.2%的秋水仙素溶液里处理2~5小时,然后用水冲洗几次,细胞的有丝分裂,步骤方法 固定:将根尖放入固定液中固定3~24小时,然后用95%的酒精洗净其醋酸味,移入70%的酒精中保存 解离:将固定液中的洋葱根尖取出,在蒸馏水中洗净,然后放入1N盐酸溶液中,在60℃下解离6~20min以便胞间层的果胶物质解体,使细胞易于分散,便于压片蒸馏水洗涤数次,细胞的有丝分裂,步骤方法 染色:将洋葱根尖置于载玻片上,用小刀片将根冠和伸长区切除,只留下1mm左右的生长区,然后滴一滴1%醋酸洋红染液,放置约5~10min,加盖玻片,再在盖玻片上加吸水纸,用拇指压一下为了使细胞质透明增加染色效果,将载玻片在酒精灯上微微加热 镜检观察:将制好的压片在显微镜下观察,找到有丝分裂的各个时期选择染色体分散容易记数的中期细胞,在高倍镜下仔细观察 绘制有丝分裂各时期染色体行为的模式图,细胞的有丝分裂,实验结果,细胞的减数分裂,目的要求 熟悉减数分裂各个时期染色体的变化特征,加深对减数分裂遗传学意义的认识 实验材料 玉米(2n=20)发育早期的雄花序 步骤方法 自保存液中取出雄花序,选取约0.2cm长的花药,置于栽玻片上 在花药上滴一滴醋酸洋红染液,用解剖针把每个花药截成几段,用镊子撕裂片段,,尽可能多地挤出花药中的花粉母细胞,细胞的减数分裂,步骤方法 去除花药残渣,适当涂匀玻片,然后盖上盖玻片,将栽玻片在酒精灯上通过4~5次,上垫一张滤纸,以拇指均匀按压,吸去多余染液,即可镜检观察 仔细观察,寻找减数分裂各期图像,熟悉各期特点 绘制减数分裂各时期染色体行为的模式图 实验结果,分离规律,目的要求 验证遗传传递的分离规律,初步学会运用生物统计学方法测定杂种分离的实际比率与理论比率适合的程度 实验材料 粳糯水稻杂交F1花序 步骤方法 分别自酒精保存液中取出粳稻、糯稻和粳糯杂种F1稻穗,镊取小花,在水中用解剖针撕碎内外颖取出雄蕊 将花药分别放在清洁载玻片中央,加碘-碘化钾溶液一滴,用解剖针将花药从中部其中花粉,分离规律,步骤方法 去除花药药壳残渣,盖上盖玻片,让花粉铺平散开,在显微镜下分别观察三种花粉的颜色 在适当放大倍数的视野中,对F1花粉的深蓝色粳性花粉和红棕色糯性花粉作出准确的计数,并记下粳性花粉与糯性花粉的实际数值。

      在不同视野下重复计算三次 应用X2测定法,计算实际值与1∶1理论比符合的情况,分离规律,实验结果,分离规律,X 2表,染色体核型分析,目的要求 了解人类染色体组型的基本特征;学习人类染色体组型分析方法 实验材料 人类染色体显微摄影放大图 步骤方法 将图片上的每条染色体进行随机编号 测量每一条染色体的长臂、短臂长度(单位:mm) 计算每一条染色体的长度及臂比值 根据染色体的长度和臂比值进行同源染色体配对,染色体核型分析,步骤方法 计算同源染色体中两条染色体长、短臂及总长的平均值,并把这些数据换算成相对长度(某染色体绝对长度/一个染色体组的总长度) 剪下染色体,按人类染色体分组原则将它们排成染色体组型图(按从长到短的顺序排列,一对一对地短臂向上、长臂向下,着丝粒的位置在同一直线上如全长相等,则按短臂长度顺序排列,长者在前性染色体单独排列),染色体核型分析,实验结果 染色体组型分析数据表,,,,,,,,1 2 3,4 5,19 20,21 22,13 14 15,16 17 18,6 7 8 9 10 11 12,XX XY,染色体组型图,染色体核型分析,人类染色体核型分析,果蝇培养和性状观察,目的要求 掌握果蝇的基本特征及鉴别雌、雄果蝇的方法;了解果蝇的饲养方法和果蝇生活周期特征 实验材料 野生型黑腹果蝇,果蝇培养和性状观察,步骤方法 生活周期的观察 果蝇的生活周期长短与温度关系很密切,低温使生活周期延长,生活力减低,高于30℃使果蝇不育甚至死亡。

      果蝇培养的最适温度为20~25℃, 25℃培养条件下果蝇从受精卵到成虫约10天,其中卵和幼虫期5天,蛹4天成虫果蝇在25℃时约成活15天 观察果蝇生活周期4个时期的形态,果蝇培养和性状观察,步骤方法 果蝇的培养 培养瓶的准备:可用广口瓶、指管等洗净培养瓶,倒置使水流干备用将滤纸剪成小块,用蒸汽消毒瓶塞用棉花外包纱布制成,也可用海绵做瓶塞,也用蒸汽消毒 果蝇培养基的配制:果蝇真正的食料是发酵果实上的酵母培养基如下,果蝇培养和性状观察,步骤方法 果蝇的培养 配制时先用水将已剪碎的琼脂放入烧杯中煮沸,再用剩余的水将小麦粉调成糊状,等琼脂熔化后加入烧杯,再加蔗糖,充分搅拌,煮沸数分钟即可滴入乙酸以防止霉变培养基在未完全冷却前倒入培养瓶,厚度约2厘米,冷却后加入酵母液数滴将滤纸做成酒杯状插在培养基上 配好的培养基在25℃下放置12小时,如无菌生长即可将果蝇放入培养,果蝇培养和性状观察,步骤方法 果蝇的培养 果蝇麻醉法:用于麻醉的瓶子可用与培养瓶一样的瓶子,配上棉塞或软木塞麻醉步骤如下 轻摇或轻拍培养瓶使果蝇落于培养瓶底部 取下培养瓶塞迅速将麻醉瓶口与培养瓶口对接严密 麻醉瓶在上,用手遮住培养瓶,使果蝇趋光自动飞入麻醉瓶中 迅速分开两瓶,各自盖好。

      再将麻醉瓶的果蝇拍到瓶底,迅速拔出瓶塞,在塞子上滴几滴乙醚,重新塞上麻醉瓶 约半分钟后果蝇便不再爬动,转动瓶子,果蝇在瓶壁上站不稳,麻醉完成因麻醉过度被杀死的果蝇翅膀外展,与身体呈45°角 如果在观察时果蝇苏醒过来,可进行补救麻醉,即用一平皿,内贴一带乙醚的滤纸条,罩住果蝇一会,果蝇培养和性状观察,步骤方法 果蝇的性状观察 雌雄果蝇的形态特征比较,果蝇培养和性状观察,实验结果,果蝇幼虫唾腺细胞染色体的制备和观察,目的要求 了解果蝇唾液腺染色体的形态学及遗传学特征学习分离果蝇幼虫唾液腺的技术掌握唾液腺染色体制片方法 实验材料 黑腹果蝇三龄幼虫 步骤方法 取一条果蝇三龄幼虫,置于载玻片上,并加一滴生理盐水,在双筒解剖镜下观察幼虫具一钝尾和一带黑色口器的尖头端,果蝇幼虫唾腺细胞染色体的制备和观察,步骤方法 在解剖镜下用解剖针压住幼虫头部,压点尽可能靠头部口器处再用另一解剖针压住尾部(或用镊子夹住),平稳快速一拉,使口器部分断开,体内各器官也从切口挤出,一对唾液腺也随之而出 分离的腺体可能伴有消化道和脂肪体在载玻片上再加一滴生理盐水,用刀片或解剖针仔细剔除这些杂物 用滤纸将多余生理盐水吸去(注意不要吸走腺体),然后滴一滴醋酸洋红染液,染色10分钟。

      加上盖玻片,再放上吸水纸,用拇指按压一下,使染色体分散开来,果蝇幼虫唾腺细胞染色体的制备和观察,步骤方法 显微镜下观察,果蝇幼虫唾腺细胞染色体的制备和观察,实验结果,人体细胞中巴氏小体的观察,目的要求 学习人类性染色质的检查方法,了解 X 染色体失活假说 实验材料 人类口腔黏膜细胞,人体细胞中巴氏小体的观察,步骤方法 取材及制片: 受检者用水漱口数次,然后用无菌牙签刮取口腔颊部黏膜,将刮取物均匀涂布于载玻片上,晾干 将制片置甲醇-冰醋酸(3∶1)固定液中20min 将制片依次放入95%、70%、50%乙醇及蒸馏水中,每次2~3min 将制片置5mol/L盐酸中水解5s 蒸馏水漂洗2~3次,每次10~15s,人体细胞中巴氏小体的观察,步骤方法 染色与观察: 硫堇染色10~20min,蒸馏水漂洗,晾干即可镜检如染色太深则可在95%乙醇中分化30s左右,如太浅可复染 在制作的玻片标本中,选择细胞轮廓清楚、染色清晰、核大、核质呈均匀细网状的细胞100个,统计Barr氏小体的频率(可与男性细胞对照观察),人体细胞中巴氏小体的观察,实验结果 巴氏小体常位于核膜内侧直径为1μm左右,其形状有微凸形、三角形、卵形、短棒形和双球形等。

      女性细胞30%~50%发现有一个巴氏小体,有些实验室在男性细胞中发现巴氏小体有2%的出现率,数量性状的生物统计法分析,目的要求 通过对作物品种某些数量性状的资料整理和数学分析,初步了解数量性状的基本特征,学会基本的生物统计法及其在研究变异和作物育种中的作用,数量性状的生物统计法分析,预备知识 作物品种的各种性状,通常可分为质量性状和数量性状数量性状可以用数字或长度、重量等单位来表示研究数量性状时,可把变异的数量登记起来,经过系统化的整理归类,以递减或递增的方式排列如果变异的数值不是整数,或是整数而变数值的范围很大时,可以分为若干组,各组的组距相等,算出组中值,然后加以归类如陆地棉纤维长度为24mm至35mm,可分为24.0~25.9,26.0~27.9,28.0~29.9,30.0~31.9,32.0~33.9,34.0~35.9等6组,各组的中价为25,27,29,31,33,35,组距为2mm,然后归类经过整理归类之后,通常可以看到数量性状呈两头小中间大的常态分布,数量性状的生物统计法分析,预备知识 经过整理归类的资料,就可进一步进行统计分析,通常表示性状变异程度最常用的是:①平均数;②标准差;③变异系数,数量性状的生物统计法分析,步骤方法 在籽棉样品中取50囊,每囊取中部籽棉一粒,共50粒籽棉,用左右分梳法测量每粒籽棉上纤维的长度,以毫米为单位,逐一记载。

      分梳时先用解剖针将纤维自种子腹中缝处分开,然后用小梳子向左右两边梳整齐,得到蝶形的标本两手分别握住左右两边纤维黏于黑绒板上,籽粒尖端向下测量时为方便起见,通常把籽棉两边纤维长度称为两倍纤维长度,将两倍绒长记入绒长统计表内,数量性状的生物统计法分析,步骤方法 在棉花绒长的资料中找到最大和最小的数值,应用组分类法按递减或递增加以归类,看是否是两头小中间大的变异数列 求各组的组中值,按照公式计算平均数、标准差和变异系数,数量性状的生物统计法分析,实验结果,数量性状的生物统计法分析,实验结果,。

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