实验诊断学骨髓细胞学检查

1、骨髓细胞学检查,学习内容,血细胞的生成、发育规律及正常形态学特征 骨髓细胞检查的临床应用、适应症及禁忌症 骨髓细胞学检查的方法和内容 血细胞的细胞化学染色 细胞免疫分型和遗传学分析,学习内容,血细胞的生成、发育规律及正常形态学特征 骨髓细胞检查的临床应用、适应症及禁忌症 骨髓细胞学检查的方法和内容 血细胞的细胞化学染色 细胞免疫分型和遗传学分析,血细胞生成,造血干细胞 自我维持和更新 多向分化潜能 造血祖细胞 自我更新能力低 定向分化 原始及幼稚阶段 原始、幼稚、成熟细胞 镜下能识别,血细胞生成,细胞体积 大小 胞体由大变小，巨核细胞相反；早幼粒细胞可比原粒细胞稍大 形态 红系：始终呈圆形 粒系和淋巴系：保持圆形或椭圆形 单核系、浆细胞和巨核系：变为不规则形,血细胞发育过程中形态演变的一般规律,细胞质 量 由少变多，淋巴细胞除外 染色 由深蓝或浅染，甚至淡红，红细胞最终变为桔红色 颗粒 无颗粒（原始细胞） 嗜天青颗粒（早幼粒细胞） 特异性颗粒 （中性/嗜酸性/嗜碱性粒细胞）,血细胞发育过程中形态演变的一般规律,细胞核 大小 由大变小，由规则变不规则，甚至分叶；巨核系由小变大；红系变小、

2、规则，最终消失 染色质 由稀疏变粗糙、致密，染色由浅变深 核仁 从有到无，由清晰到模糊、消失 核膜 由不明显变明显 细胞核/细胞质比例 由大变小，巨核细胞相反,血细胞发育过程中形态演变的一般规律,胞体由大变小，始终呈圆形,核保持圆形，渐缩小，固缩，后脱核，成熟红细胞无核,浆由深蓝或浅蓝变为浅红，由少渐多,血细胞的正常形态学特征红系,胞体圆形或椭圆形，由大变小，早幼粒可比原粒稍大 颗粒由无到有 胞核一侧渐凹陷，后成分叶状,血细胞的正常形态学特征粒系,血细胞的正常形态学特征淋系,胞体圆形或椭圆形，由大变小 细胞质透明天蓝，颗粒少 胞核呈圆形或椭圆形,胞体圆形或卵圆形，由大变小 细胞质由浅蓝色变为深蓝色 胞核呈圆形,血细胞的正常形态学特征浆细胞,多发性骨髓瘤,血细胞的正常形态学特征单核细胞,胞体变为不规则 细胞质呈浅蓝色，颗粒由无到有 胞核变为一侧凹陷，后为肾形、不规则形，有扭曲折叠,血细胞的正常形态学特征巨核细胞,胞体和胞核均由小变大，变不规则 胞浆由少变多，出现细小紫红色颗粒，胞浆脱落产生血小板,学习内容,血细胞的生成、发育规律及正常形态学特征 骨髓细胞检查的临床应用、适应症及禁忌症 骨

3、髓细胞学检查的方法和内容 血细胞的细胞化学染色 细胞免疫分型和遗传学分析,骨髓穿刺术,部位 髂前上棘 髂后上棘 胸骨 椎体棘突,临床应用,诊断某些造血或非造血系统疾病（特征性的细胞形态学改变） 白血病、巨幼细胞性贫血、多发性骨髓瘤等 类脂质沉积病：Gaucher病、Niemann-Pick病等 辅助诊断某些疾病 淋巴瘤骨髓浸润、骨髓增生异常综合征、骨髓增殖性疾病、缺铁性贫血、溶血性贫血、免疫性血小板减少性紫癜 恶性肿瘤骨髓转移,临床应用,提高某些疾病的诊断率 疟疾、黑热病、组织胞浆菌病等 骨髓细胞学检查： 诊断疾病、观察病情、评价疗效、判断预后,适应症,外周血细胞成分及形态异常 不明原因发热，肝、脾、淋巴结肿大 骨痛、骨质破坏、紫癜、血沉明显加快 化疗后疗效观察 其他：骨髓活检、染色体核型分析、造血祖细胞培养、微生物和寄生虫检查等,适应症,绝对禁忌症：血友病 相对禁忌症：严重出血性疾病 慎重：孕妇,学习内容,血细胞的生成、发育规律及正常形态学特征 骨髓细胞检查的临床应用、适应症及禁忌症 骨髓细胞学检查的方法和内容 血细胞的细胞化学染色 细胞免疫分型和遗传学分析,肉眼观察,观察血膜颜色、

4、厚薄、骨髓小粒等,低倍镜下检查,了解取材、涂片、染色是否满意 取材 观察骨髓小粒、脂滴，镜下可见骨髓特有细胞 涂片 镜下细胞分散排列，不重叠 染色 细胞核、质颜色分明，胞浆颗粒清楚，没有沉渣,低倍镜下检查,估计骨髓增生程度 在低倍镜（10）下观察骨髓成熟红细胞与有核细胞的大致比例。,成熟红细胞:有核细胞 = 1:20,增生活跃,成熟红细胞:有核细胞 = 1:10,增生明显活跃,成熟红细胞:有核细胞 = 1:1,增生极度活跃,成熟红细胞:有核细胞 = 50:1,增生减低,成熟红细胞:有核细胞 = 200:1,增生明显减低,低倍镜下检查,计数巨核细胞数目 位于涂片的边缘和尾端 1.5cm3.0cm范围内约有735个巨核细胞 特殊细胞与其他 涂片的边缘和尾端 转移癌、Gaucher细胞、Niemann-Pick细胞、疟原虫、黑热病原虫、组织胞浆菌等,观察巨核细胞,腺癌骨髓转移,低倍镜下检查小结,了解取材、涂片、染色是否满意 估计骨髓有核细胞增生程度 计数巨核细胞数目 特殊细胞与其他,油浸镜检查,有核细胞分类计数：连续计数200500个细胞 按不同系列、发育阶段分别计数 计算出各系列、阶段细胞

5、占有核细胞总数的百分比 观察各系增生程度，各发育阶段细胞数量和质量的变化 观察细胞形态,各系列、发育阶段细胞比例粒系,约占有核细胞的5060% 各系列/阶段比例 原粒细胞 1 % 早幼粒细胞 5 % 中、晚幼粒细胞 15 % 杆状核粒细胞 （16-32） 分叶核粒细胞 （4-21） 嗜酸性粒细胞 5 % 嗜碱性粒细胞 1 %,粒系细胞增多 各型粒细胞性白血病 急性炎症和感染性疾病 类白血病反应 粒系细胞减少 再生障碍性贫血 粒细胞缺乏或减少症,各系列、发育阶段细胞比例红系,约占有核细胞的20% 各系列/阶段比例 原红细胞 1 % 早幼红细胞 5 % 中、晚幼红细胞 均10 %左右,红系细胞增多 增生性贫血 急性红白血病 真性红细胞增多症 红系细胞减少 再生障碍性贫血 纯红再障,各系列、发育阶段细胞比例淋系,淋系约占有核细胞的20%，原淋+幼淋细胞5% 淋系细胞增多 急、慢性淋巴细胞性白血病 淋巴瘤 传染性淋巴细胞增多症 传染性单核细胞增多症 病毒感染 淋系细胞减少 再生障碍性贫血 粒细胞缺乏或减少症,各系列、发育阶段细胞比例其他,单核细胞系不到有核细胞的4%（4%），成熟单核为主 浆细

6、胞系不到有核细胞的2%（2%） 巨核系约有735个巨核细胞（1.5cm3.0cm），产板巨为主 网状、内皮、组织细胞等非造血细胞少见,学习内容,血细胞的生成、发育规律及正常形态学特征 骨髓细胞检查的临床应用、适应症及禁忌症 骨髓细胞学检查的方法和内容 血细胞的细胞化学染色 细胞免疫分型和遗传学分析,原理 结果 原粒阴性，自早幼粒起至成熟中性粒细胞，阳性反应逐渐增强 单核细胞系大多呈弱阳性/阴性 淋巴细胞呈阴性反应,过氧化物酶（POX）染色,临床意义 急性粒细胞白血病多呈强阳性反应 急性单核细胞白血病呈弱阳性/阴性 急性淋巴细胞白血病呈阴性反应 用于急性粒细胞白血病和急性淋巴细胞白血病的鉴别,过氧化物酶（POX）染色,过氧化物酶（POX）染色,原理 偶氮偶联法（灰黑色沉淀） 钙钴法（棕黑色沉淀） 结果 该酶主要存在于成熟阶段中性粒细胞（分叶核及杆状核），其他血细胞均呈阴性反应 反应强度分5级：“-”、“1+”、“2+”、“3+”、“4+”,中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）染色,中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）染色,中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）染色,+,+,+,+,+,+,-,嗜酸性粒细胞：

7、-,参考值 观察100个成熟中性粒细胞阳性反应的百分率和积分值： 阳性率：逐个做出反应强度分级:，记录各级阳性细胞所占百分比 积分值：各级所占百分率乘以级数，然后相加，即为积分值 成人NAP阳性率10-40%；积分值为4080分,中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）染色,临床意义 感染性疾病急性化脓菌感染时活性明显升高；病毒感染时活性正常或降低 慢性粒细胞白血病活性极度减低，积分值常为0；类白血病反应时活性极度升高 急性粒细胞白血病时积分值减低；急性淋巴细胞白血病时多增高；急性单核细胞白血病时一般正常或减低 再生障碍性贫血时活性升高；阵发性睡眠性血红蛋白尿时活性减低 其他：慢淋、恶性淋巴瘤、骨髓增殖性疾病时中度升高 腺垂体或肾上腺皮质功能亢进，应用肾上腺皮质激素、ACTH、雌激素等时积分增高,中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）染色,原理,铁染色,结果细胞外铁 以含铁血黄素形式储存在骨髓中的单核-吞噬细胞系统内的铁 反应强度分5级：“-”、“1+”、“2+”、“3+”、“4+”,铁染色,结果细胞内铁 存在于幼红细胞（主要是晚幼红细胞）胞质中的铁 正常幼红细胞（主要晚幼）核周可见15个蓝色细小铁颗粒

8、，这种含有铁颗粒的幼红细胞称铁粒幼细胞 含粗大深染的铁粒在10个以上，并环绕胞核排列超过核周径2/3以上者，称环状铁粒幼细胞 油镜下连续计数100个幼红细胞，计算铁粒幼细胞所占幼红细胞的百分率,铁染色,铁粒幼细胞,环形铁粒幼细胞,参考值 细胞外铁：1+ 2+，大多为2+ 细胞内铁：20 90%，平均值为65% 临床意义 缺铁性贫血：内铁减少（常 3+ 4+ 铁粒幼细胞性贫血和MDS RAS：环形铁粒幼细胞 15%,铁染色,-醋酸萘酚酯酶（- NAE）/ 非特异性酯酶（NSE）染色,NSE主要存在于单核细胞中，是单核细胞的标记酶 临床意义 急性单核细胞白血病呈强阳性反应，但可被NaF抑制 急性粒细胞白血病呈阴性或若阳性，且阳性反应不能被NaF抑制 用于急性单核细胞白血病和急性粒细胞白血病的鉴别,糖原（PAS）染色,主要在原粒细胞和幼红细胞中呈阴性 临床意义 红血病或红白血病呈强阳性反应 识别不典型的巨核细胞（M7、MDS中的小巨核细胞） 急性粒细胞白血病时原粒细胞呈阴性或若阳性，细颗粒状；急性淋巴细胞白血病常呈阳性反应，粗颗粒或块状；急性单核细胞白血病多为阳性，弥漫均匀红色 Gaucher细胞、腺癌细胞呈强阳性反应,学习内容,骨髓细胞检查的临床应用、适应症及禁忌症 血细胞的生成、发育规律及正常形态学特征 骨髓细胞学检查的方法和内容 血细胞的细胞化学染色 细胞免疫分型和遗传学分析,免疫表型分析,免疫表型分析,免疫表型分析,免疫表型分析,免疫表型分析,染色体核型分析,结构异常,染色体核型分析,数目异常,染色体核型分析,数目异常,染色体核型分析,染色体核型分析,谢谢！,

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