利用核磁共振波谱研究慢性心衰心气虚证心肌能量代谢的病生-1
32页1、利用核磁共振波谱研究慢性心衰 心气虚证心肌能量代谢的病生理机制,林 谦 李岩 北京中医药大学东方医院,第二届全国中西医结合心血管病中青年论坛 第二届黄河心血管病防治论坛,国家自然基金项目(No.30772693),1/18/2019,立 题 依 据,研究内容、目标,实 验 结 果,讨论与结论,内容概述,1/18/2019,动力泵、 高耗能,能量不足引起的能量超负荷性心肌病,心脏特点,01,心力衰竭,02,CHF实质,能量产生不足、消耗增加,03,立项依据,现代医学对CHF和心肌能量的认识,1/18/2019,立项依据,1,2,3,4,“气” 能量 相似性,心气虚 CHF 基本病机,中医治疗 CHF 特色优势,益气治疗 CHF 心气虚证 效果显著,中医对“气”和心气虚的认识,1/18/2019,立项依据,慢性心衰,心气虚证,能量代谢,心肌能量 代谢障碍 病理生理 关键环节,心气虚证 慢性心力衰竭基本病机,能量代谢障碍 CHF心气虚证研究的切入点,ADP+ Pi,Cr+ Pi,ATP,PCr,CK穿梭机制,心肌能量代谢及其调控机制,直接能量物质,能量储备物质,mi- CK,CK-MM/MB
2、/BB,立项依据,血流动力学,能量调控-CK穿梭机制,能量物质-ATP、PCr,提高能量物质含量,维持CK穿梭机制,益气药通过提高心肌能量物质含量、维持CK穿梭机制治疗心气虚证,心气虚证,提出假说,1/18/2019,研究内容,复制CHF心气 虚大鼠模型 益气药物治疗,模型大鼠 心气虚证指标 血流动力学,慢性心衰,心气虚证,心肌能量代谢障碍,CHF不同时相 心肌能量物质 动态变化,能量调控机制关键分子 基因表达水平,心气虚,1/18/2019,动物实验 造模、干预、血流动力学,分子生物学 基因及蛋白质表达,核磁共振 心肌能量物质水平,理论升华 心气虚证实质,从心肌能量代谢角度进一步阐明心气虚证实质,研究目标,假手术,结扎冠脉,左心室插管,RT-PCR,31P核磁共振波谱,技术路线,1/18/2019,研究方案-动物分组,动物实验 分组及给药,假手术组:不结扎冠状动脉,术后给予生理盐水,联合用药组:术后给予党参、黄芪卡托普利,中药组 亚组1:术后予党参; 亚组2:术后予黄芪; 亚组3:术后予党参黄芪 (益气组),模型组:术后给予生理盐水,西药对照组:术后给予卡托普利,1/18/2019,
3、心率加快,a,心悸,呼吸频率加快,b,气短、气促,活跃程度下降反抗轻微,c,神疲,力竭性游泳时间缩短,d,乏力,研究方案-一般状态,检测指标,心气虚证,1/18/2019,研究方案-血流动力学,监测心电 颈动脉插管 心室内压 舒缩功能,心脏功能,左室舒张末压,血流动力学检测,左室收缩压,左室收缩压最大变化速率,左室舒张压最大变化速率,收缩功能 舒张功能,1/18/2019,保存 提取,样品 制备,实验 参数,数据 处理,核磁共振波谱检测流程,大鼠心脏组织液氮急冻。用1:1的CH3CN:H2O匀浆、离心取上清液,水提残渣加入重水混匀,离心取上清液加入核磁管中,加入TSP/D2O溶液和MDP/D2O溶液(终浓度2mM),谱宽sw=12000,采样点np=8192,90度脉冲宽度pw=14.1,弛豫延迟时间d1=17s,采样次数nt=100,采样温度为27。,对所得NMR数据经傅立叶变换得到谱图,然后调整相位并进行基线校正,研究方案-能量物质,1/18/2019,研究方案-能量物质,PCr,ATP,PCr/ATP,31P核磁共振波谱检测,1.心气虚证与心肌能量物质含量的相关性 2.益气药对心
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