实验1--玻璃器皿的包扎与灭菌
16页1、2009,Central Laboratory of Biology,实验一 玻璃器皿的包扎及灭菌,微生物学实验,课前预习与目的要求,【课前预习】 1. 高压蒸汽灭菌原理。 2. 上海申安LDZX-50KBS灭菌锅的使用方法。 【目的要求】 1. 学习并掌握玻璃器皿的包扎方法。 2. 掌握高压蒸汽灭菌的基本原理及操作方法。,基本原理,微生物学实验所用的器皿,大多数要进行消毒、灭菌,才能用来培养微生物。 玻璃器皿的包装方法正确合理,在使用过程中才能有效防止杂菌的污染。 玻璃器皿包装好后,一般用高压蒸气灭菌法进行灭菌。,基本原理,高压蒸气灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸气。 待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,关闭排气阀,继续加热,此时由于蒸气不能溢出,而增加了灭菌锅内的压力,从而使沸点增高,得到高于100的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。,实验用品,棉花,试管,培养皿,纱布,三角瓶,橡皮筋,量筒,牛皮纸(或旧报纸),LDZX-50KBS立式高压蒸气灭菌锅等。,方法步骤,1. 熟悉微生物学实验的结构与功能。 2.
2、 清洗试管、三角瓶,培养皿等玻璃器具,烘干。 3. 制作试管棉塞及三角瓶棉塞(参照微生物学实验基本操作技术)。 4. 用量筒或吸管取适量自来水于三角瓶和试管中,包装好以制备无菌水。 5. 包装空培养皿,移液管。 6. 灭菌(参照)。,玻璃器皿清洗方法,玻璃器皿在使用过程中确保干净,用过的器皿应及时清洗。 器皿一般可以用去污粉、肥皂或洗洁净清洗。 琼脂培养基的器皿应先将培养基刮去。 琼脂和固体物不能丢弃到水池中,以免堵塞管道。 清洗方法详见。,棉塞的制作,棉塞的作用有二:一是防止杂菌污染,二是保证通气良好。 形状,大小,松紧适度。,培养皿的包装,培养皿常用旧报纸紧紧包裹,一包710套,包好后干热或湿热灭菌。 也可用金属筒包装。,移液管的包装,作用:以免使用时将杂菌吹入其中,或不慎将微生物吸出管外。,试管和三角瓶的包装,试管口和三角瓶瓶口塞棉花塞或硅胶塞; 用二层报纸包扎好(如有牛皮纸,效果更好),进行干热或湿热灭菌。 试管较多时,一般7个或10个一组,再用双层报纸包扎。,上海申安LDZX-50KBS灭菌锅的使用,1)打开电源与开关,检查水位显示灯; 2)加灭菌物品; 3)盖紧; 4)设定温度和时间; 5)查看排气(水)阀旋至排气处; 6)排气; 7)结束后取物。,实验结果,记录自己制作的实验用品(含无菌水)名称的规格与数量。,注意事项,1. 实验前,熟悉实验室平面布局图,了解实验仪器用品摆放规律及用途。 2. 制备无菌水时,试管装水量要超过试管高度的1/5,三角瓶装水量不要超过规格容量的1/2(装量过多,灭菌过程中易喷出或润湿棉塞); 3. 灭菌锅的操作安全。,实验报告,1. 高压蒸气灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽灭菌完毕后,为什么待压力降低“0”时才能打开排气阀,开盖取物。 2. 在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时,怎样杜绝一切不安全的因素。 3. 灭菌在微生物实验操作中有何重要意义。,Central laboratory of Biology,生物学实验教学中心,Thanks for your attention!,
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