抗核抗体的检测及医学意义
3页1、抗核抗体的检测及医学意义抗核抗体(antinuclear antibody,ANA) 是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称。ANA的性质主要是IgG,也有IgM、IgA 和IgD,其无器官和种属特异性,故该类抗体可与所有动物的细胞核发生反应。迄今已有二十余种抗核内不同成分的抗核抗体被相继发现。ANA主要存在于血清中,也可存在于胸水、关节滑膜液和尿液中。ANA在未治疗的SLE 患者中的滴度较高,在大多数自身免疫性疾病中均可呈阳性,如SLE、R A、混合性结缔组织病(M CTD )、干燥综合征(SS)、硬皮病、慢性活动性肝炎,正常老年人也可有低滴度的ANA。ANA阳性并不一定患有自身免疫性疾病。由于细胞核成分的复杂性,不同成分的抗原性不同,因此可产生多种类型的ANA,在其众多类型中,作为针对某一特定核成分的个别抗体,只在某一疾病中出现,成为诊断该疾病的血清标志性抗体。各种ANA在不同的自身免疫性疾病中出现不同组合,可形成各种疾病或疾病亚群的特征性抗体谱。因此,总的ANA检测在临床诊断与鉴别诊断中是一个极为重要的筛选试验,ANA阳性者进一步检测各亚类ANA抗体对明确
2、诊断、临床分型、病情观察、预后及治疗评价都具有重要意义。目前按细胞内分子理化特性与抗原分布部位将ANA分为四大类,即抗DNA抗体;抗组蛋白抗体;抗非组蛋白抗体和抗核仁抗体,每一大类又因不同的抗原特性再分为许多亚类。在临床检测中ANA的命名通常按以下三种方式进行:1根据抗原的化学名称命名如抗dsDNA、抗RNP、抗DNP抗体。2以第一位检出该抗体的患者命名如抗S m、抗Ro、抗La 抗体。3以相关疾病命名如抗SSA、抗SSB 抗体。常见的AN A 荧光图形及临床意义1均质性(homogeneous,H )细胞核均匀着染荧光,有些核仁部位不着色,分裂期细胞染色体可被染色出现荧光。与均质型相关的自身抗体主要有抗不溶性DNP,抗组蛋白抗体,抗dsDNA 抗体也可产生均质性。高滴度均质型主要见于SLE患者,低滴度均质型可见于RA、慢性肝脏疾病、传染性单核细胞增多症或药物诱发的狼疮患者。2斑点型(speckled,S)细胞核内出现颗粒状荧光, 分裂期细胞染色体无荧光显色。与斑点型相关的自身抗体涉及抗核糖体核蛋白颗粒抗体,如抗Sm、抗Ru1R NP、抗SSBLa 等抗体。高滴度的斑点型常见于MCTD
3、,同时也见于SLE、硬皮病、SS等自身免疫性疾病。3核膜型(mem branous,M )又称周边型(rim),荧光着色主要显示在细胞核的周边形成荧光环,或在均一的荧光背景上核周边荧光增强;分裂期细胞染色体区出现荧光着色。相关抗体主要是抗dsDNA抗体。高滴度的周边型几乎仅见于SLE,特别是活动期SLE,其他自身免疫疾病很少见周边型,因此周边型对SLE 的诊断价值极大,且提示病情活动。4核仁型(nucheolar,N)荧光着色主要在核仁区,分裂期细胞染色体无荧光着色。相关抗体是抗核仁特异的低分子量RN A,抗RNA聚合酶1、抗U3RNP、抗PMScl 。核仁型在硬皮病中出现率最高, 尤其是高滴度核仁型对诊断硬皮病具有一定特异性,但核仁型也见于雷诺现象者,偶尔也出现于SLE 。未经治疗的SLE或MCTD 患者几乎95以上都有抗核抗体,且滴度较高,一般1100 以上具有临床诊断价值。抗核抗体阴性对排除SLE的阴性预告值较高,所以抗核抗体检测是SLE 的最佳筛查试验。抗核抗体滴度与自身免疫性疾病的临床活动性无相关关系。抗核抗体在其他自身免疫病中也可出现阳性,但滴度较低,其各自的阳性检出率见下表。常见自身免疫性疾病的ANA阳性检出率荧光抗体检查判定结果时,各实验室须在自己的实验条件下进行一定数量的正常人调查,定出正常人血清ANA水平的上限。如为测定ANA效价,则可将阳性血清再自正常上限开始作双倍连续稀释。判定阳性或阴性时,首先用低倍镜观察,并与相应对照比较。判定染色图像时,物镜选用40X或60X,也有人用100X,但应固定使用一个放大倍数。待测血清只在阳性上限以下稀释。染色图像只有相对的参考意义,必要时应进一步作特异性抗核抗体的检查。抗核抗体的荧光图形分类对了解自身免疫性疾病的鉴别诊断具有提示作用,但要确是哪一亚类的自身抗体,必须作进一步的抗核抗体谱系的检测,不能仅凭荧光核型作出相关自身抗体的判断
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