白藜芦醇对神经母细胞瘤SH-SY5Y增值和凋亡的影响
18页1、白藜芦醇对神经母细胞瘤白藜芦醇对神经母细胞瘤SH-SY5Y增值和凋亡的影响增值和凋亡的影响 一、立项依据(项目的意义、前一、立项依据(项目的意义、前期工作及现状分析):期工作及现状分析):白藜芦醇(Resveratro,Res)化学名称为3,5,4-三羟基苯二烯,对植物本身具有保护作用。20世纪90年代后,白藜芦醇的药用价值得到人们的注意。大量研究显示,白藜芦醇具有多种生物活性,包括抗氧化、抗肿瘤、免疫调节、心血管保护与延缓衰老以及抗神经损伤和促进神经修复等作用作用。在白藜芦醇药用价值发现的同时,其生物学效应的研究也在广泛开展。大量实验表明,白藜芦醇对人和动物多种细胞的生物活性具有高度的浓度双向依赖性效应,即在低浓度下表现为促进细胞增殖;而在高浓度下,特别是对于多种肿瘤细胞,表现为抑制细胞生长和诱导细胞凋亡的作用。白藜芦醇的促进细胞增殖和抑制增殖、诱导细胞凋亡的效应对不同细胞具有不同的浓度范围。在促进细胞生长、存活和抗氧化损伤研究方面,有研究认为,白藜芦醇发挥了植物雌激素样作用,具有强抗氧化剂的效应,能使氧化应激中的细胞减少过氧化氢的产生,恢复谷胱甘肽水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性
2、,进而抑制活性氧产生,清除氧自由基,抵抗由于氧化和氧自由基过度产生所导致的DNA损伤。在白藜芦醇的抗神经损伤实验中发现,损伤神经元内Bcl-2(B细胞淋巴瘤/白血病-2基因)表达量升高且Bax(bcl2 associated x protein)表达量下降,从而抑制细胞凋亡,其中白藜芦醇还抑制了DNA的合成,使细胞周期停留于S期,促进其DNA有充足的时间得以修复,从而起到神经组织的保护作用。另有研究表明白藜芦醇还起到对细胞周期的调节作用。目前报道中,白藜芦醇对胃癌、宫颈癌、前列腺癌、乳腺癌、胰腺癌、脑胶质瘤、神经母细胞瘤等细胞均有显著的抑制作用,且该作用发挥于肿瘤的起始、促进和发展的三个阶段。高浓度的白藜芦醇同样可以调节Bcl-2/Bax通路,但使得肿瘤细胞的Bcl-2的表达下调,从而促进了bax的表达,而诱导了凋亡的发生。同时还发现,白藜芦醇的肿瘤抑制作用与其对肿瘤细胞K+、Ca2+离子通道调节有关,即促进Ca2+细胞内流而引起凋亡。Survivin是凋亡抑制家族中的一员,可在肿瘤细胞、胎盘和未分化的一些组织中高表达,使细胞逃避凋亡。白藜芦醇则能通过抑制前列腺癌、胃癌等多种肿瘤细胞内
3、Survivin表达,从而促进肿瘤细胞凋亡进程。综上所述,白藜芦醇对多种细胞的生物学效应具有显著的双向浓度依赖性效应,尽管在不同研究中运用了不同浓度范围白藜芦醇作用于多种细胞,但表现出的细胞效应均与细胞周期、细胞凋亡的调控相关。SH-SY5Y是一个来自于人类的多巴胺能的神经母细胞瘤,是研究药物抗肿瘤作用的重要细胞模型。因此,本研究以其为研究对象,通过探讨白藜芦醇在不同浓度下对SH-SY5Y细胞增殖与细胞周期的影响及变化规律,为进一步研究该物质对多巴胺类神经母细胞瘤的作用机制和开发利用其生物学效应提供依据。同时对于白藜芦醇的药用价值的发挥和临床应用提供了重要的基础。参考文献:参考文献:1 周福成,周艳琴,郭婷婷,等.白藜芦醇的研究进展J.中国医药导报,2009,6(8):11-13.2周海斌.白藜芦醇促进成骨细胞分化的机制研究D.山东济南:山东大学,2008.3 周杰,雷鹏,张翔,等.白藜芦醇对大鼠创伤后伤区神经细胞凋亡的影响J.创伤外科杂志,2008,10(1):20-24.4 夏志平,郑航,彭伟.白藜芦醇对前列腺癌PC-12细胞Bcl-2和Survivin表达的影响J.医学新知杂志,
4、2009,19(2):98-100.5 张生军,刘敏丽,魏晓丽,等.白藜芦醇对人胃癌细胞凋亡及其与Survivin蛋白表达的影响J.中国现代医学杂志,2009,19(2):270-273.6 张黎,李勇,周畅,等.白藜芦醇对人胰腺癌细胞Capan-1增殖和细胞周期的影响J.实用医学杂志,2010,26(1):14-16.7 张黎,李勇,张洁,等.白藜芦醇对小鼠胚胎成纤维细胞增殖和细胞周期的影响J.细胞与分子免疫学杂志,2009,25(12):1109-1111.8 李运红,陈敏,邹晓平,等.白藜芦醇对胃腺癌细胞株增殖和凋亡的影响J.南京医科大学学报(自然科学版),2011,31(8):1192-1195.二、项目实施方案、实施计划和可行性分析:实施方案1.SH-SY5Y的培养的培养 将将SH-SY5Y培养于含有培养于含有10%胎牛血清(胎牛血清(FBS)的)的DMEM高糖培养液中,置于含有高糖培养液中,置于含有5CO2的细胞培养箱中于的细胞培养箱中于37静置培养。待细胞生长至近融合状态时,用含静置培养。待细胞生长至近融合状态时,用含EDTA的的0.25胰酶消化传代,每胰酶消化传代,每3
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