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毕业论文：蜂胶的免疫增强作用及在疫苗佐剂中的应用综述范文 毕业论文：蜂胶的免疫增强作用及在疫苗佐剂中的应用综述 摘要： 蜂胶作为一种天然的生物活性物质，化学成分复杂，具有广泛的生物学作用，特别在抗菌、抗病毒及增强机体免疫功能等方面具有显著的生物活性，是疫苗佐剂的良好原材料相对于传统佐剂，蜂胶具有绿色天然，安全可靠，副作用小，来源丰富，成本低廉的优势因此，近年来，对于蜂胶的免疫增强作用及其在疫苗佐剂中的应用研究不断深入，并在畜禽用疫苗的实验中取得了满意效果，为新型有效疫苗的研制和开发提供了新的发展思路关键词 蜂胶；疫苗；佐剂；免疫增强；1.前言 1.1 现状 大多数疫苗中所含的醇化抗原，不能自行引起强大的免疫应答，存在抗原性弱、直接接种该类疫苗只能引起缓慢的弱免疫应答的问题，无法达到有效预防接种目的对于抗原性更弱的新一代基因工程疫苗如重组亚单位和粘膜疫苗，这个问题更为严重鉴于在分子水平上改造抗原提高其抗原性的方法，在成本效率层面上都难以让人满意，目前的解决方案是在疫苗中加入免疫佐剂提高疫苗整体的抗原性，从而增强免疫应答 1.2常用疫苗佐剂及问题 目前国内外广泛使用的铝胶类等无机物佐剂、油乳类化学性免疫增强剂以及微生物来源佐剂有副作用大、局部刺激强、致癌、制备和使用不便、不能充分提高弱杭原的抗原性等弊端。

因此，研制高效、低毒的新型免疫增强剂已成为亟待解决的问题[ ]. 1.3 蜂胶作为佐剂的优势 蜂胶是一种天然生物活性物质，具有良好的免疫增强作用，其本身不具有抗原性但却能引发免疫应答与传统佐剂相比，蜂胶绿色安全、来源丰富、成本合理、增强免疫作用更加显著，有明显优势 1.4 选题原因 本文试图通过分析蜂胶的基本特性与免疫增强作用以及实验案例，探讨蜂胶佐剂疫苗的实际应用价值和比较相对传统铝胶类、油乳类佐剂疫苗的优劣，总结蜂胶佐剂疫苗研究进展和应用，为更好的寻找理想佐剂提供参考意见 2. 蜂胶概述 2.1 物理性质 蜂胶是指蜜蜂从树芽、树皮或其他植物的幼芽上采集的树脂，混入腭腺分泌物和蜂蜡等物质而形成的一种具有芳香气味的胶状不透明固体粘性物质，呈褐色、灰褐色或青绿色、黑色蜂胶是一种亲脂性物 的作用此后，她们用肠炎沙门氏菌制备的完全抗原免疫大白鼠，分组观察证明，蜂胶合并抗原注入动物机体，能引起较强的浆细胞反应和刺激局部与远区淋巴结的抗体生成105106用蜂胶作为佐剂注射的大白鼠，其局部淋巴细胞增生比用皂素作佐剂的或单纯抗原组强3.7-6倍，蜂胶组大白鼠血清凝集素滴度比其其它组高3-4倍。

巴拉鲁金纳指出单用沙门氏菌抗原免疫家兔时，在免疫后7天，血清中己经能检测出抗体，2l天抗体滴度达到最高峰，此后降至维持水平，此水平至少维持65天 沈志强等以蜂胶为佐剂成功研制禽霍乱蜂胶灭活疫苗，免疫7天后产生坚强免疫力，近期保护率达10%，免疫期长达6个月以上并在以后的研究中证明，蜂胶可增强机体免疫反应、激活与保护免疫器官，是优良的免疫佐剂，他认为蜂胶对机体免疫系统具有广泛的作用，既可增强体液免疫功能也可增强细胞免疫功能，对胸腺、脾脏及免疫系统具有有益的影响，能促进抗体的生成，增强巨噬细胞的吞噬能力和自然杀伤性细胞的活性 Dimov等[ ]研究了蜂胶水溶性物质的免疫调节作用，发现对金黄色葡萄球菌和白色念球菌感染具有良好的免疫调节作用 Ivanovska等对蜂胶的机体体内免疫调节作用进行了一系列的研究，结果发现:苯乙烯酸和咖啡酸对红血球溶解具有良好的抑制作用，无论对机体损伤造成的免疫功能低下还是本身原有的免疫功能缺乏都有很好的效果；其对革兰氏阴性菌感染的免疫调节主要是通过提高巨噬细胞活力，增强其吞噬功能来完成的 李淑华等用单克隆抗体技术检测试验小鼠药物处理前后T细胞总数及亚群变化，并用MTT法检测T细胞增殖研究，结果显示，蜂胶乙醇提取物能促进Con A诱导的淋巴细胞增殖，增加T细胞总数并调整T细胞亚群紊乱，表明EEP对免疫功能低下小鼠细胞免疫功能具有免疫刺激和调节作用。

于晓红等试验结果证明，蜂胶能够增强免疫功能低下小鼠的抗体生成细胞功能，提高溶血素含量，增强单核吞噬细胞功能[ 、 ] 4. 在佐剂中的作用 4.1 佐剂概述 佐剂“adjuvant”一词来自拉丁文“adjuvare”，意思是帮助，在免疫学中是指与抗原混合后注射动物可增加抗原的免疫原性，起辅佐抗原的作用，并增强或调节抗原体液和细胞免疫应答佐剂通过激活抗原递呈细胞(APC)以表达共刺激分子和免疫效应因子，没有佐剂，纯化蛋白或基因工程肽等弱抗原不能诱导机体产生有效的免疫保护反应世界范围内有多个实验室都在寻找理想的抗原佐剂[ ]理想的佐剂不仅能增强免疫反应，还能使宿主获得最佳的保护性免疫 4.2 传统佐剂 4.2.1 铝胶佐剂 铝盐佐剂包括硫酸钾铝、磷酸铝、按明矾、钾明矾和氢氧化铝[Al(OH)3]等，以氢氧化铝最为常用1926年Glenny首先应用铝故作为佐剂吸附白喉类毒素至今铝盐佐剂仍是唯一被美国FDA批准使用的人用疫苗佐剂铝胶佐剂主要激活Th2型免疫细胞[ ]，只诱导体液免疫反应，免疫保护期短 4.2.2 油佐剂疫苗 油佐剂疫苗可以保证抗原在机体内缓慢的释放，从而不断的刺激机体产生高水平的细胞免疫和体液免疫应答。

双相油乳剂疫苗粘度低，副作用小，容易吸收[ ]，因而能够刺激动物机体迅速产生免疫力，油乳剂疫苗免疫保护期长，但注射部位吸收不完全，可能产生脓肿，肉芽肿等[ ] 4.3 蜂胶佐剂 蜂胶具有广谱生物学活性，是一种良好的免疫增强剂和刺激剂，其中的许多酶类、醇类、脂类和酸类物质对机体的免疫系统具有广泛的作用根据上述蜂胶对于免疫的增强作用，它既能引起和增进特异性免疫应答，又能启动和增强非特异性防御机制，有增强免疫抗体生成和提高自细胞吞噬能力的明显效果，又能全面启动机体的免疫防卫系统，刺激机体细胞免疫、体液免疫、红细胞免疫系统和巨噬细胞补体系统都产生免疫应答，使动物机体血液中的T淋巴细胞比例显著增加[ ]接种蜂胶疫苗后，机体的体液免疫与细胞免疫都是活跃的蜂胶佐剂疫苗，在实际作用时，以蜂胶中的有机大分子为基础，结合特异氨基酸和多糖，构成特殊的类似抗原的免疫刺激空间结构，各种成分协同作用，有效地增强其抗原性[ ] 柴家前等[ ]对蜂胶疫苗的超微结构进行了研究，在电子显微镜下，可见到许多大小不等的圆形蜂胶颗粒，小的直径50nm，大的可达500nm，大部分直径是100~200nm，蜂胶颗粒周围吸附有大量的病毒粒子，同时，蜂胶之间也相互吸附，使蜂胶颗粒-病毒-蜂胶颗粒-病毒-蜂胶颗粒相互联结成网状结构或不规则的聚集状结构、包被状结构。

在疫苗中还可见到游离的蜂胶颗粒和病毒其中游离的病毒占总病毒的15%左右蜂胶疫苗的这种独特超微结构使蜂胶疫苗的稳定性很强，在体内缓慢释放，从而起到贮存作用这种结构同时也具有耐热和耐冷的特点，决定了该疫苗免疫保护期长，可低温或高温保存 蜂胶颗粒能与病毒粒子相互交联成类免疫刺激复合物结构，具有抗原“仓库”和免疫刺激复合物作用同时蜂胶颗粒和病毒粒子仍保持各自完整的形态结构，有利于被机体吸收而后发挥各自的功效和作用，这是蜂胶疫苗高效、持久的主要原因，同时疫苗中又有少量的裸露游离病毒粒子和蜂胶颗粒，接种机体后可迅速刺激机体产生免疫应答，由此决定了注射疫苗后能很快产生坚强的免疫力[ ][ ][ ] 5. 实际应用 蜂胶的种种特性表明将它作为免疫佐剂，与其它常规佐剂如羊毛脂、Freund等比价，既可保持抗原特性，又能成为良好的免疫增强剂和刺激剂蜂胶作为一种新型的免疫佐剂，已经广泛应用于生产，并取得了良好的效果1978年，著名蜂疗专家，苏联学者基瓦尔金娜等在第三届国际蜜蜂疗法学术讨论会上，报道了蜂胶对猪的伪狂犬病疫苗的免疫促进作用在国内，李心坦等用蜂胶佐剂制成的布鲁氏菌病疫苗比氢氧化铝胶或矿物油作佐疫苗接种动物产生的血凝素高8~10倍[ ]。

沈志强等研制的禽霍乱蜂胶疫苗，保护率高、免疫期长、无毒无污染，是一种绿色、环保、安全、有效的新型疫苗制品 与其它类型的灭活疫苗相比，蜂胶灭活疫苗具有以下特点：快速、高效、持久：全面启动机体的免疫防卫系统，包括细胞免疫系统、体液免疫系统、红细胞免疫系统、巨噬细胞和补体免疫系统，产生特异性和非特异性免疫力，这在灭活苗家族中是绝无仅有的；安全、无残留、绿色、环保；无注苗反应，无刺激性，免疫所造成的应激小，不影响精神、食欲、注射局部无肿胀，无坏死，而且它本身是一种纯天然物质，无残留，对人体完全无害[ 、 、 、 ] 向会耀等，比较了多价大肠杆菌氢氧化铝胶和蜂胶佐剂灭活苗，对同血清型菌株攻击的保护作用试验结果表明，对大肠杆菌病而言，用蜂胶佐剂苗的效果优于铝胶苗蜂胶佐剂疫苗保护率为100％，氢氧化铝胶佐剂疫苗保护率为88％[ ] 张锋钢 [36] 三批蜂胶佐剂灭活苗的免疫效果与猪肺炎支原体国产灭活苗和Mhp进口灭活苗进行了对比，结果发现： 1.安全方面，蜂胶佐剂苗接种后对受试猪只的精神、饮食无不良影响；注射部位无肿胀和组织坏死；具有轻微地促生长作用，但是差异不显著(P>0.05)；对繁殖性能无不良影响。

2.效力方面，蜂胶佐剂苗能够快速、高效地启动体液免疫应答，在接种后第7天时抗体平均水平明显高于国产油苗组和进口疫苗组(P0.05)；淋转试验结果表明，蜂胶佐剂苗能够很好地激发动物机体的细胞免疫，蜂胶苗组的淋巴细胞刺激指数高于国产苗组(P0.05)试验结果初步提示该蜂胶佐剂苗安全有效，具有完全替代进口灭活苗的可能[ ] 6. 前景展望和面临的问题 13。