胰岛妊娠期糖尿病患者素受体底物基因多态与胰岛关研性肥胖及素抵抗的相性究.pdf

华中科技大学 硕士学位论文 胰岛妊娠期糖尿病患者素受体底物基因多态与胰岛关研性肥胖 及素抵抗的相性究 姓名：王欢 申请学位级别：硕士 专业：妇产学科 指导教师：邹丽 20090501 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 妊娠期糖尿病患者胰岛素受体底物基因多态性与妊娠期糖尿病患者胰岛素受体底物基因多态性与 肥胖及胰岛素抵抗的相关性研究肥胖及胰岛素抵抗的相关性研究 华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科 硕士生 ：王 欢 导 师 ：邹 丽 教授 中文摘要中文摘要 研究目的研究目的 研究妊娠期糖尿病患者胰岛素受体底物（IRS）基因多态性与肥胖及 胰岛素抵抗的相关性 方法方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析方法检测华中 科技大学同济医学院附属协和医院和湖北省妇幼保健院收治的80例GDM孕妇(GDM 组)及 100 例健康孕妇(对照组) IRS-1 基因 Arg972Gly 和 IRS-2 基因 Asp1057Gly 多态 性，测定空腹血糖和空腹血胰岛素水平，并计算体重指数 BMI 和 HOMA-IR。

结果结果 (1)正常湖北汉族孕妇中存在 IRS-1Arg972Gly 和 IRS-2Asp1057Gly 多态性, IRS-1 基因 Gly/Gly， Arg/Gly 型频率分别为 0.970， 0.030 IRS-2 基因 Gly/Gly， Asp/Gly 型频率分别为 0.970 和 0.030，符合 Hardy-Weinberg 平衡2)GDM 患者 IRS-1 基因 Gly/Gly，Arg/Gly 型频率分别为 0.975，0.025，与对照组相比 IRS-1Arg972Gly 基因型 分布和等位基因频率差异无统计学意义( P 0.05) (3)GDM患者IRS-2基因Gly /Gly， Asp/Gly 型频率分别为 0.825 和 0.175，与正常对照组相比 IRS-2Asp1057Gly 基因型分 布和等位基因频率差异有统计学意义( P 0.05) （表 1） IRS-2 基因 PCR 扩增产物经限制性内切酶 Nco1 酶切后产物电泳结果（图 2） ：正 常 GlyGly 型纯合子为 183 和 102 bp 两条带；AspGly 型杂合子为 285、183 和 102 bp 3 条带。

GlyGly、AspGly 基因型频率在 GDM 组分别为 0.825 和 0.175，对照组中为 0.97，0.03，两组间 A1057G 基因型频率分布差异有统计学意义( P 0.05)（表 2） 经 Hardy-Weinberg 定律的吻合度检验, IRS-1Arg972Gly、IRS-2Asp1057Gly 位点 不同基因型个体数的观察值和期望值差异无统计学意义,表明等位基因频率分布符合 Hardy-Weinberg 平衡 13 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 表 1 两组 IRS-1 基因 972 位点基因型和等位基因频率的比较 组别 例数 基因型频率 等位基因频率 Group N Genotype Frequency Allele Frequency GlyGly ArgGly ArgArg Gly Arg GDM 80 78（0.975） 2（0.025） 0 158（0.987） 2（0.013） Control 100 97（0.970） 3（0.030） 0 197（0.985） 3（0.015） 表 2 两组 IRS-2 基因 1057 位点基因型和等位基因频率的比较 组别 例数 基因型频率 等位基因频率 Group N Genotype Frequency Allele Frequency GlyGly GlyAsp AspAsp Gly Asp GDM 80 66（0.825） 14（0.175）* 0 146（0.912） 14（0.088）** Control 100 97（0.970） 3（0.030） 0 197（0.985） 3（0.015） 注：* 、** 与对照组比较 ( P 0.05)。

GDM组中含IRS-2GlyAsp基因型者BMI（26.8±0.2kg/m2)显著高于GlyGly基因型 （21.6±0.2kg/m2)，差异具有统计学意义( P0. 05)，相关性分析结果显示Asp1057Gly 多 态 性 与 BMI 显 著 正 相 关 (r=0.71,P0.05) 表 3 GDM 组中不同 IRS 基因型间 BMI、HOMA-IR 的比较（x±s) 位点 例数 BMI(kg/m2) HOMA-IR locus n IRS-1A972G GlyGly 78 21.3 0.8±0.1 ArgGly 2 22.8 0.7±0.2 IRS-2A1075G GlyGly 68 21.6 0.6±0.1 AspGly 12 26.8 * 0.7±0.2 注：* 与GlyGly型比较( P 0.05) 16 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 四 讨论 四 讨论 妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus ，GDM)是妊娠期发生或首次识别出的 不同程度的葡萄糖耐量异常,其病因至今尚不十分清楚。

目前多数学者认为胰岛素抵抗 （Insulin Resistance ，IR）是导致GDM发生发展的主要原因研究发现[3] GDM患者 存在糖耐量异常，但主要表现为胰岛素抵抗及高胰岛素血症（Hyperinsulinism, HI） GDM患者空腹血糖 （FPG） 及空腹血胰岛素 （FIN） 水平和胰岛素抵抗指数 （HOMA-IR） 显著高于正常妊娠组和对照组（P0.05） ，这与Tok等[14]在土耳其人群中的 研究结果类似，但与Fallucca等[15]研究结果有明显差别 国内研究对IRS-1Arg972Gly位点和IRS-2Asp1057Gly位点多态性与 2 型糖尿病的 关系报道结果不尽相同： 方启晨等[16]对上海地区人群研究表明IRS-1 Arg972Gly突变与 2 型糖尿病的发生无明显相关性；王涤非[17]等研究中国辽宁地区 80 例汉族糖尿病人 IRS - 1 基因变异结果显示 ：2 型糖尿病 IRS - 1 基因存在GCA804GCG及 GGG971AGG的变异，与胰岛素抵抗密切相关 IRS - 1 基因变异是 2 型糖尿病重要 的遗传背景之一王国英[18]等报道北京地区汉族人群IRS-1 Arg972Gly 多态性不是 2 型糖尿病的主要致病因素。

洪天配等[19]报道IRS-2 基因密码子 1057 G/A多态性的AA 基因型在 2 型糖尿病中明显减少, 但 2 型糖尿病各种中间表型特征在不同基因型间 均无明显差异陈新华等[20]报道IRS - 2 基因 1057G/A 多态性可能是PCOS患者发生 胰岛素抵抗( IR)的机制之一 本研究结果还显示，两组间IRS-2 A1057G基因型分布差异有统计学意义 （P0.05） ，A等位基因在GDM组中分布频率高于对照组，提示IRS-2 基因 1057 位点 A/G多态性可能与GDM易感性有一定关系 目前对IRS-2 A1057G这一位点基因多态性 变异与GDM发病机制的相关性还未见相关报道Le等[21] 研究发现同时携带IRS-1 和 IRS-2 基因变异体的个体更易产生IR， 认为IRS-1 和IRS-2 两者在功能上存在协同作用， 两基因同时变异时导致更严重的IR发生但本研究中未发现同时含这两个多态性位点 基因的携带者出现以上研究结果的差别可能与种族间遗传背景差异或样本量大小有 18 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 关。

另外， 在我们研究中还发现GDM组中含有IRS-2AG杂合型等位基因的个体孕前体 重指数有增高的趋势，相关性分析进一步证实IRS-2 A1057G多态性与BMI显著正相关 (r=0.71,PArg972 amino acid polymorphism in insulin receptor substrate-1 affects glucose metabolism in skeletal muscle cells. J Clin Endocrinol Metab. 2000 May;85(5):2004-2013 14. Tok EC, Ertunc D, Bilgin O, et al. Association of insulin receptor substrate-1 G972R variant with baseline characteristics of the patients with gestational diabetes mellitus . Am J Obstet Gynecol. 2006 Mar;194(3):868-872 15. Fallucca F, Dalfrà MG, Sciullo E, et al. Polymorphisms of insulin receptor substrate 1 and beta3-adrenergic receptor genes in gestational diabetes and normal pregnancy. Metabolism. 2006 Nov;55(11):1451-1456 16. 方启晨，项坤三，陆惠娟，等.胰岛素受体底物 1（IRS-1）基因 Gly972Arg 突变与 中国人糖尿病的相关性.中国糖尿病杂志.2000，8（6） ：327-329 17. 王涤非，邱忠霞，张锦，等.北方汉族 2 型糖尿病人胰岛素受体底物 1 基因多态性 的研究. 中国病理生理杂志,2005, 21(4) :793 - 796 18. 王国英，洪天培，张路，等.胰岛素受体底物 1 基因 Gly972Arg 多态性与 2 型糖 尿病不相关. 中国糖尿病杂志.2002,10(5):265-267 19. 洪天配，王海宁，徐希平.胰岛素受体底物-2 基因多态性与 2 型糖尿病的相关性 研究. 中国糖尿病杂志.2002,10 (3):163-166 20. 陈新华， 任慕兰， 丁昌平.胰岛素受体底物- 2 基因多态性在多表卵巢综合征中的初 步研究.中国民康医学,2007 ,19 (8):612 - 6133. 21. Le Fur S, Le Stunff C, Bougnères P. Increased insulin resistance in obese children who have both 972 IRS-1 and 1057 IRS-2 polymorphisms. Diabetes. 2002 Dec;51 Suppl 3:S304-307 22. Villuendas G .Botella-Carretero JI, Roldán B, Sancho J,et alPolymorphisms in the insulin receptor substrate-1 (IRS-1)gene and the insulin receptor substr。