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最全HEK293细胞系汇总.docx

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  • 卖家[上传人]:壹****1
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    • 最全HEK293细胞系汇总众所周知,哺乳动物细胞作为蛋白的表达系统具有糖基化、乙酰 化、硫酸化、硫酸化等翻译后修饰而蛋白翻译后修饰,如糖基化修 饰,会直接影响蛋白在体内的半衰期及稳定性和生物学活性、影响配 体识别及结合,影响其免疫原性,影响胞间作用等等功能目前,哺乳动物细胞已被广泛用于重组蛋白、疫苗、抗癌试剂及 其他临床相关的药物的生产中CHO细胞、BHK细胞、Sp2/0等细胞常被用于制备生物制药然 而这些小鼠来源的细胞与 HEK293 细胞相比,缺乏人的细胞翻译后修 饰系统,因此与人源系统表达的蛋白有差异目前, HEK293 细胞被 广泛用于生产蛋白、疫苗、抗癌试剂及重组腺病毒包被等HEK293细胞1) 转染效率高;2) 可悬浮培养用于大规模表达;3) 表达蛋白结构最接近其在人体内构象;4) HEK293细胞在培养体系中能够快速增长,高密度培养5) HEK293 细胞与神经元细胞一样,对外界微环境较为敏感,利 用这一特点,可用于药物发现及细胞毒性测试Fi iniH『胪 hiirrM^i Ei|:Jry【:"o 4 rfihfcigniiSrTtnd i¥ith thr nCRjR^rw- afldihe p CRJBgacj 2 血1口汕{E) EMS. mutajgpnesis. Rtin icieakinIJJ bli?urrib jh-DHflgi^TRP^ns feeban wih 彳伽幡心 Jd&rwMLrfi h* 5 DMStable irinshedJDn wtth |xCf4A3.1- sea-STendaT刘胡靶 1rAn?fKttcifi Ih 甩飢r«tpWH占阿衬 and W.PPTT rEponer cHasmid丁钗etf xfk she p 刃 ND BDCGJfrviirkin Hi hi&dFijninr :飞也 in MAptn^onHEK293细胞系概览1973年,最原始的HEK293细胞来源于一个夭折的人类胚胎肾细 胞中。

      将人的胚胎肾细胞中转化入人5型腺病毒DNA片段,得到的细 胞即为HEK293细胞HEK293细胞,何许人也?注:以下细胞系介绍中,HEK293细胞简称为293细胞293T细胞293 细胞中转入 SV40T-antigen 基因形成的高转衍生株,即为293T细胞系这使得包含SV40ori 的质粒能够在该细胞系中显著扩增,从而促进表达载体 的扩增,促进蛋白的表达293T细胞除了可用于各类基因表达及蛋白 生产,还可用于高滴度逆转录病毒及其他病毒生产,如腺病毒及其他 哺乳动物病毒293T/17 细胞293T细胞中共转染入pBND和pZAP质粒,获得的具有G418耐 受的细胞系即为293T/17细胞系该细胞系在保有293T细胞的优良 性能之外,还具有高转染性的特点293T/17 SF 细胞293T/17 SF细胞系指的是在293T细胞中转入EBV基因形成的转 化细胞系,该细胞系主要用于细胞的瞬时转染及蛋白表达293H细胞293H 细胞则指的是将 293 细胞驯化后得到的能够在无血清培养 体系下快速生长、具有高转染效率及高效蛋白表达性能的细胞系另 外,该细胞系贴附力好,而被用于噬菌斑检测等应用293E细胞293E 细胞指的是在 293-H 细胞中插入 EBNA-1 基因的细胞系, 该基因能够稳定表达 EBV 病毒的 EBNA1 蛋白。

      含有 EBV 复制起点 (oriP )的重组表达质粒,能够在H293E细胞中复制,并实现蛋白的 高效表达293-6E细胞293-6E 细胞则是在 293-H 细胞中插入截短过后的 EBNA-1 基因 的细胞系,其能够在无血清培养基中高表达生产蛋白及病毒载体293 F细胞293F细胞是一类能够在无血清中高表达蛋白的野生型293细胞系293FT细胞293FT 细胞则是在 293F 细胞系中插入 pCMVSPORT6TAg.Neo 质粒的转化细胞系,能够快速增值,易转染,其能够用于慢病毒载体 的生产293FTM细胞293FTM细胞则是来源于Flp-In TM T-RE TM293细胞,该细胞 系中转染了 ecotropic receptor 质粒及 MAPPIT(mammalian protein-protein interaction trap)报告质粒,该细胞系主要用于蛋白 互作的筛选293S细胞293S 细胞则指的被驯化成能够悬浮培养且能够耐受低钙离子培养 条件的293细胞系293SG细胞将 293S 细胞用甲基磺酸乙酯诱变处理,蓖麻毒素选择后再转染 pcDNA6/TR质粒得到耐受蓖麻毒素的细胞系即为293SG。

      该细胞系缺乏乙酰氨基葡萄糖转移酶 I 活性,因此可促进蛋白的 Man 5GlcNAc2N-聚糖型糖基化修饰此外,该细胞系中具有四环素 表达抑制基因,可用于四环素诱导的蛋白表达研究这类细胞系常用 于同源的N-糖基化蛋白的表达293SGGD 细胞293SGGD 细胞系则指的是在 293SG 转染 pcDNA3.1-zeo- STe ndoT质粒的细胞系,其主要用于糖基化工程研究中完本篇文章仅仅是汇总了常见的HEK293细胞系,PS :特别感谢北京义翘神州余博士对于本篇文章内容指导帮助参考文献:1:Lin Y C, Boone M, Meuris L, et al. Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations[J]. Nature communications, 2014, 5: 4767.2:Hu J, Han J, Li H, et al. Human Embryonic Kidney 293 Cells: A Vehicle for Biopharmaceutical Manufacturing, Structural Biology, and Electrophysiology[J]. Cells Tissues Organs, 2018, 205(1): 1-8.。

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