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动物实验基本技术动物实验基本技术 1 1 一 实验动物标记编号的方法一 实验动物标记编号的方法 一一 染色法 染色法 1 1 单色涂染法 单色涂染法 在每组动物不超过在每组动物不超过l0l0只的情况下适用 只的情况下适用 实验动物 大鼠 小鼠 实验动物 大鼠 小鼠 常用染色剂 常用染色剂 3 53 5 苦味酸溶液 苦味酸溶液 可染成黄色 可染成黄色 第一节 小 鼠 2 2 方法步骤 方法步骤 1 1 涂染顺序 从左到右 从上到下 涂染顺序 从左到右 从上到下 2 2 左前肢为左前肢为l l号 左侧腹部号 左侧腹部2 2号 号 左后肢左后肢3 3号 号 3 3 头部头部4 4号 背部号 背部5 5号 号 尾根部尾根部6 6号 号 4 4 右前肢右前肢7 7号 号 右侧腹部右侧腹部8 8号 号 右后肢右后肢9 9号 号 5 5 不作染色标记为不作染色标记为1010号 号 3 3 2 2 双色涂染法 双色涂染法 在每组动物不超过在每组动物不超过100100只的情况下只的情况下 适用 适用 实验动物 大鼠 小鼠 实验动物 大鼠 小鼠 常用染色剂 常用染色剂 1 3 5 1 3 5 苦味酸溶液 可染成黄色 苦味酸溶液 可染成黄色 作为作为 个个 位数 位数 2 0 5 2 0 5 中性红或品红溶液 可染中性红或品红溶液 可染 成红色 成红色 作为作为 十十 位数 位数 4 4 方法步骤 方法步骤 1 1 用两种颜色同时进行染色标记 用两种颜色同时进行染色标记 2 2 用苦味酸用苦味酸 黄色黄色 染色标记作为个位染色标记作为个位 数 个位数的染色标记方法同单色数 个位数的染色标记方法同单色 涂染法 涂染法 3 3 用品红用品红 红色红色 染色标记作为十位数染色标记作为十位数 5 5 4 4 左前肢为 左前肢为1010号 号 左侧腹部左侧腹部2020号 号 左后肢左后肢3030号 号 头部头部4040号 号 背部背部5050号 号 尾根部尾根部6060号 号 右前肢右前肢7070号 号 右侧腹部右侧腹部 8080号 号 右后肢右后肢9090号号 第第100100号不作染色标记 号不作染色标记 6 6 二 小鼠的抓取保定 二 小鼠的抓取保定 器材 小鼠饲养盒器材 小鼠饲养盒 面罩面罩1 1套 套 方法步骤 方法步骤 1 1 用右手拇指和食指捏 用右手拇指和食指捏 住小鼠尾巴中部将小鼠提住小鼠尾巴中部将小鼠提 起 放在饲养合的面罩上 起 放在饲养合的面罩上 2 2 用左手拇指和食指迅速 用左手拇指和食指迅速 准确地捏住小鼠的两耳后 准确地捏住小鼠的两耳后 颈背部的皮肤 将小鼠提起 颈背部的皮肤 将小鼠提起 7 7 3 3 翻转左手掌 以左手掌心和中指夹 翻转左手掌 以左手掌心和中指夹 小鼠背部的皮肤 使小鼠整个呈一条小鼠背部的皮肤 使小鼠整个呈一条 直直 线 线 4 4 用左手无名指 用左手无名指 压住小鼠背部的压住小鼠背部的 皮肤 小指压住皮肤 小指压住 小鼠的尾巴根部 小鼠的尾巴根部 5 5 松开捏住小鼠尾 松开捏住小鼠尾 巴的右手拇指和食指 巴的右手拇指和食指 8 8 三 小鼠的给药方法 三 小鼠的给药方法 一 灌胃给药 原理 原理 将药液直接注入小鼠的胃内 将药液直接注入小鼠的胃内 器材 器材 小鼠灌胃针小鼠灌胃针1 1支 注射器支 注射器1 1支 支 小鼠饲养小鼠饲养盒盒 面罩面罩1 1套 生理盐水 套 生理盐水 烧杯 烧杯 9 9 方法步骤 方法步骤 1 1 将灌胃针连接在注射器上 吸入一定量 将灌胃针连接在注射器上 吸入一定量 的药液 的药液 2 2 左手捉持小鼠 使小鼠头部向上 左手捉持小鼠 使小鼠头部向上 3 3 右手将灌胃针头尖端从小鼠口角处进针右手将灌胃针头尖端从小鼠口角处进针 放进小鼠口咽部 顺咽后壁轻轻往下推 灌放进小鼠口咽部 顺咽后壁轻轻往下推 灌 胃针会顺着食管滑入小鼠的胃内 灌胃针插胃针会顺着食管滑入小鼠的胃内 灌胃针插 入约入约3cm 3cm 4 4 用右手食指将针栓慢慢往下压 将注射 用右手食指将针栓慢慢往下压 将注射 器中的药液灌入小鼠的胃中 器中的药液灌入小鼠的胃中 1010 剂量 约剂量 约0 5ml0 5ml 10g10g体重 体重 注意 在灌胃过程中 避免误插入气管 注意 在灌胃过程中 避免误插入气管 1111 二 注射给药 1 1 皮下注射给药 皮下注射给药 原理 将药液注入皮下结缔组织 经原理 将药液注入皮下结缔组织 经 毛细血管 淋巴管吸收进入血液循环 毛细血管 淋巴管吸收进入血液循环 器材 器材 1m11m1注射器注射器1 1支 生理盐水 烧支 生理盐水 烧 杯 酒精 碘酒 棉球 杯 酒精 碘酒 棉球 1212 方法步骤 方法步骤 1 1 注射部位 选小鼠项背部的皮下 注射部位 选小鼠项背部的皮下 2 2 常规消毒注射部位的皮肤 用注射针头取一常规消毒注射部位的皮肤 用注射针头取一 锐角角度锐角角度刺入皮下 刺入皮下 3 3 将针头轻轻向左右将针头轻轻向左右 摆动 摆动 易摆动易摆动则表示已则表示已 刺入皮下 再轻轻刺入皮下 再轻轻抽吸抽吸 如无回血 可缓慢地将如无回血 可缓慢地将 药物注入皮下 药物注入皮下 注射量 注射量 0 01ml 0 03ml0 01ml 0 03ml g g体重 体重 1313 2 2 肌肉注射给药 肌肉注射给药 原理 将药液注入动物的肌肉组织 经原理 将药液注入动物的肌肉组织 经 毛细血管吸收进入血液循环 毛细血管吸收进入血液循环 器材 器材 1ml1ml注射器注射器1 1支 生理盐水 烧支 生理盐水 烧 杯 酒精 碘酒 棉球 杯 酒精 碘酒 棉球 1414 方法步骤 方法步骤 1 1 操作时操作时1 1人先将小鼠捉持保定好 人先将小鼠捉持保定好 2 2 另另1 1人用左手抓住小鼠的人用左手抓住小鼠的1 1条后肢 右手拿条后肢 右手拿 注射器 常规消毒注射部位的皮肤 注射器 常规消毒注射部位的皮肤 3 3 将注射器针头在动物后将注射器针头在动物后 肢肢大腿外侧肌肉丰富处呈大腿外侧肌肉丰富处呈 6060度角度角迅速刺入后注入药液 迅速刺入后注入药液 注射量 注射量 0 01m10 01m1 g g体重 体重 1515 3 3 静脉注射给药 静脉注射给药 原理 将药液注入小鼠的尾静脉 原理 将药液注入小鼠的尾静脉 器材 器材 1m11m1注射器注射器1 1支 生理盐水 支 生理盐水 烧烧 杯 金属笼或杯 金属笼或小鼠固定器小鼠固定器 酒精 碘 酒精 碘 酒 棉球 酒 棉球 1616 方法步骤 方法步骤 1 1 将小鼠放在金属笼或将小鼠放在金属笼或小鼠固定器小鼠固定器中 中 通过金属笼或通过金属笼或小鼠固定器小鼠固定器的孔拉出小鼠的孔拉出小鼠 尾巴 尾巴 2 2 用左手捏住小鼠尾巴中部 用用左手捏住小鼠尾巴中部 用7575 酒精棉球反复擦拭尾部 酒精棉球反复擦拭尾部 1717 3 3 注射时 以左手拇指和中指捏住鼠尾注射时 以左手拇指和中指捏住鼠尾 两侧 用食指从下面托起尾巴 以无两侧 用食指从下面托起尾巴 以无 名指夹住尾巴的末梢 名指夹住尾巴的末梢 4 4 右手持右手持4 4号针头的注射器 使针头与号针头的注射器 使针头与 静脉平行 小于静脉平行 小于3030度角 度角 1818 5 5 从小鼠尾巴下从小鼠尾巴下1 1 4 4处进针 仔细观察 处进针 仔细观察 如果无阻力 无白色皮丘出现 说明如果无阻力 无白色皮丘出现 说明 已刺入血管 即可注入药物 已刺入血管 即可注入药物 6 6 拔出针头后 用干棉球压住注射部位拔出针头后 用干棉球压住注射部位 约约l l 2min2min 防止出血 防止出血 注射量 注射量 0 005m1 0 01 m10 005m1 0 01 m1 g g体体 重 重 1919 4 4 腹腔注射给药 腹腔注射给药 原理 将药液注入小鼠的腹腔 原理 将药液注入小鼠的腹腔 器材 注射器器材 注射器1 1支 生理盐水 烧杯 支 生理盐水 烧杯 酒精 碘酒 棉球 酒精 碘酒 棉球 2020 方法步骤 方法步骤 1 1 用左手将小鼠捉持保定 使鼠腹部用左手将小鼠捉持保定 使鼠腹部 朝上 鼠头略低于尾部 朝上 鼠头略低于尾部 2 2 右手持注射器将针头在下腹部靠近右手持注射器将针头在下腹部靠近 腹白线的两侧进行穿刺 腹白线的两侧进行穿刺 2121 3 3 针头刺入皮下后进针针头刺入皮下后进针3mm3mm左右 接着左右 接着 使使 注射针头与皮肤呈注射针头与皮肤呈4545度角刺入腹肌 穿过腹度角刺入腹肌 穿过腹 肌进入腹膜腔 当针尖穿过腹肌进入腹膜腔肌进入腹膜腔 当针尖穿过腹肌进入腹膜腔 后抵抗感消失 后抵抗感消失 4 4 固定针头 保持针尖不动 固定针头 保持针尖不动 回抽针栓 如无回血 肠液回抽针栓 如无回血 肠液 和尿液后即可注射药液 和尿液后即可注射药液 注射量 注射量 0 01m1 0 02 m10 01m1 0 02 m1 g g体重 体重 2222 三 小鼠的采血三 小鼠的采血 摘除眼球采血法 摘除眼球采血法 原理 将小鼠的眼球摘除后取血液原理 将小鼠的眼球摘除后取血液 的方法 的方法 器材 眼科弯镊 试管 器材 眼科弯镊 试管 2323 方法步骤 方法步骤 1 1 左手抓住小鼠颈部皮肤 轻压在实左手抓住小鼠颈部皮肤 轻压在实 验台上 取侧卧位验台上 取侧卧位 2 2 左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈 后压 使眼球突出 后压 使眼球突出 2424 3 3 用眼科弯镊夹去眼球 将鼠倒立 用眼科弯镊夹去眼球 将鼠倒立 用试管接住流出的血液 用试管接住流出的血液 4 4 采血完毕立即用纱布压迫止血 采血完毕立即用纱布压迫止血 采血量 每次采血量 每次0 6 1 0ml 0 6 1 0ml 次 次 2525 一 大鼠的抓取保定 一 大鼠的抓取保定 器材 大鼠饲养盒器材 大鼠饲养盒 面罩面罩 1 1套 套 方法步骤 方法步骤 1 1 首先戴好防护手套 首先戴好防护手套 2 2 用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将 用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将 大鼠提起 放在大鼠饲养盒的面罩上 大鼠提起 放在大鼠饲养盒的面罩上 3 3 左手顺势按 卡在大鼠躯干 左手顺势按 卡在大鼠躯干 背部 稍加压力向头颈部滑行 背部 稍加压力向头颈部滑行 4 4 以左手拇指和食指捏住大鼠两耳 以左手拇指和食指捏住大鼠两耳 后部的头颈皮肤 其余三指和手掌后部的头颈皮肤 其余三指和手掌 握住大鼠背部皮握住大鼠背部皮肤 完成抓取保定 肤 完成抓取保定 第二节第二节 大鼠大鼠 2626 二 大鼠的给药方法 二 大鼠的给药方法 一一 灌胃给药灌胃给药 原理 将药液直接注入大鼠的胃内 原理 将药液直接注入大鼠的胃内 器材 大鼠灌胃针器材 大鼠灌胃针1 1支 注射器支 注射器1 1支 大鼠支 大鼠 饲养盒饲养盒 面罩面罩l l套 生理盐水 烧杯 套 生理盐水 烧杯 2727 方法步骤 方法步骤 1 1 将灌胃针连接在注射器上 吸入一定量 将灌胃针连接在注射器上 吸入一定量 的药液 的药液 2 2 左手捉持保定大鼠 右手将灌胃针头尖 左手捉持保定大鼠 右手将灌胃针头尖 端放进大鼠口咽部 顺咽后壁轻轻往下推 端放进大鼠口咽部 顺咽后壁轻轻往下推 灌胃针会顺着食管滑入大鼠的胃内 灌胃针会顺着食管滑入大鼠的胃内 灌胃针插入约灌胃针插入约5cm 5cm 2828 3 3 用右手食指将针栓慢慢往下压 将注 用右手食指将针栓慢慢往下压 将注 射器中的生理盐水灌入大鼠的胃中 射器中的生理盐水灌入大鼠的胃中 剂量 剂量 0 01 0 02ml0 01 0 02ml g g体重 体重 注意 在灌胃过程中 避免误插入气管 注意 在灌胃过程中 避免误插入气管 2929 二二 注射给药注射给药 1 1 皮下注射给药 皮下注射给药 原理 将药液注入皮下结缔组织 经毛细原理 将药液注入皮下结缔组织 经毛细 血管 淋巴管吸收进入血液循环 血管 淋巴管吸收进入血液循环 器材 。