3620硅酸镁载体柱净化.docx

方法 3620硅酸镁载体柱净化1．0适用范围1. 1硅酸镁载体(Florisil), Floridin公司注册的商品名，是一种带酸性的硅酸镁 在用气相色谱进行样品分析之前，作为一种净化方法用于普通的柱色谱1.2 一般应用.净化农药残留和其它的氯代烃类；从烃类中分离氮化合物；从脂肪族 一芳香族的混合物中分离芳香化合物;及对于脂肪类、油类和蜡类(Floridin)的类似的应用 另外，在分离甾族化合物、酯类、酮类、甘油酯类、生物碱类和一些糖类(Gordon和Ford) 方面，硅酸镁载体被认为是很有用的1.3 特定应用本法包括如下待测物组：酞酸酯类、亚硝胺类、有机氯农药类、硝基 芳香化合物、卤代醚类、氯代烃类和有机磷农药等的样品提取液的净化指导2. 0方法摘要见方法36 10第2.0节3.0干扰见方法36 10第3.0节4.0仪器和设备见方法36 10第4.0节5.0试剂5. 1硅酸镁载体.农药残留物(PR)级(60或100目)：购买1250F(67712)活化的产品, 贮存于带磨口玻璃塞或衬箔的螺旋盖的玻璃容器中5. 1. 1硅酸镁载体的脱活：对酞酸酯类净化，为使用作准备放入lOOg硅酸镁载体 于500ml烧杯中，并在400C加热大约16h。

加热后，转移至500ml试剂瓶中密封并冷却至 室温冷却后，加3ml试剂水.摇荡或转动lOmin以充分混合，放置至少2h,将瓶密封严 紧5. 1. 2硅酸镁载体的活化：对于亚硝胺、有机氯农药和多氯联苯类（PCBs）、硝基芳香 化合物卤代醚类、氯代烃类和有机磷农药的净化在即要使用前，用铝箔不盖严的玻璃容器 在130°C时活化各批物料至少16h.或者在13O0C时于烘箱中保存硅酸镁载体.使用之前在 干燥器中冷却硅酸镁载体（从不同的批料或不同来源的硅酸镁载体，其吸附能力可能不同 将所使用的合成硅酸镁载体的量标准化，建议使用月桂酸值，参考方法测定每克硅酸镁载体 吸附已烷溶液中月桂酸的量（mg）应用于各柱的硅酸镁载体的量是将此比值除110,并乘以 20g（mills）来计算的5. 2硫酸钠（ACS）粒状，无水（在浅盘中于40012加热4h纯化）5.3洗脱溶剂5.3.1二乙醚：见方法3610第5.2.1节5. 3. 2丙酮、己烷、二氯甲烷、戊烷、石油醚（沸程30〜6OoC）,农药级或相当规格6. O样品的采集、保存和处理6.1见本章前言，有机分析物第4.1节7. O步骤7.1酞酸酯类7. 1. 1在净化之前，将样品取捉液体积减至2ml,萃取溶剂应为己烷。

7. 1. 2将10g的硅酸镁载体加入到10mm内径的色谱柱中轻敲柱子以填实硅酸镁载 体并加1cm的无水硫酸钠至柱子顶端7. 1. 3用40ml己烷预洗脱柱所有洗脱速度应大约为2ml/min弃去洗脱液，正当 硫酸钠层刚要暴露于空气之前，定量转移2ml样品提取液至柱上，用另外2ml己烷来完成转 移，正当硫酸钠层刚要暴露于空气之前，加40ml己烷并继续洗脱柱子弃去此已烷洗脱液7. 1. 4然后，用100ml 20%乙醚一己烷液（V/V洗脱柱子，流入带有10ml浓缩管的 500ml K-D瓶里浓缩收集到的级分，不需要更换溶剂调整净化提取物的体积至所需体积 （对于方法8060为10m1）,并用气相色谱法分析，此级分中所洗捉的化合物有：①双（2 —乙 基己基）酞酸酯；②丁基苄基酞酸酯；二一正一丁基酞酸酯；③二--乙基酞酸酯；④二一甲 基酞酸酯；⑤二--正一辛基酞酸酯7.2亚硝胺类7. 2. 1在净化之前，将样品提取的体积减少至2m17. 2. 2将22g活化的硅酸镁载体放人一支20mm内径的色谱柱，轻敲柱子以填实合成 硅酸镁载体，并加大约5mm的无水硫酸钠至柱顶部7. 2. 3用40ml乙醚一戊烷（15： 85）（V / V）预洗脱柱子，弃去洗脱液，正当硫酸钠层 要暴露于空气之前定量地转移2ml样品提取物至柱上，应用另外2ml戊烷以完成定量转移。

7. 2. 4用90ml乙醚一戊烷（15： 85）（V / V）洗脱柱子，并弃去洗脱液此级分将包含 二苯胺，若其存在于提取物中7. 2. 5然后，用100ml丙酮一乙醚（5： 95） （V/V）洗脱柱流入一个装有10ml浓缩管 的500m1 K—D瓶中此级分将包含该方法范围中所列出的全部亚硝胺类7. 2. 6加15m1甲醇至收集的级分中用戊烷预湿K—D柱来浓缩，并将水浴调在70 〜75C当装置冷却后，取下snydcr柱，并用1〜2ml戊烷冲洗瓶及其下部的接头流入浓缩 管内，用气相色谱分析7. 3有机氯农药、卤代醚类和有机磷农药（见表4—7和4—8关于所检测化合物的分布 图）7. 3. 1在净化之前，将样品提取物的体积减少至10ml；提取溶剂必须为己烷表4-7氧化农药、PCBs和卤代醚类进入硅酸镁载体柱的成分的分布化合物级分的百分回收率（%）a123艾试剂100a—BHC100B—BHC97S—BHC98y—bhc100氯丹1004，4，—DDD994，4，—DDE984，4，—DDT100狄试剂0100硫丹I3764硫丹II0791硫丹硫酸盐00106异狄试剂496乙醛异狄试剂06826卤代醚类R七氯100七氯还氧化物100毒杀酚96PCB-101697PCB-122197PCB-1232954PCB-124297PCB-1248103PCB-125490PCB-126095注：a.洗脱液成分：级分1： 6%乙醚已烷溶液；级分2:15%乙醚己烷溶液；级分3： 5% 乙醚己烷溶液。

R=回收（未列出百分回收数据）资料来源：U.S.EPA和FDA数据表 4 —8 有机磷农药进入硅酸镁载体柱的组分的分布级分的百分回收率（％）a化合物1234益棉磷2080Bolstar(Sulprofos)NDNDNDND毒死蜱>80蝇毒磷NRNRNR一零五九100二嗪农100乐果NRNRNRNR乙拌磷Ar? —r 七k Ar? -r>k 卡十-H-卡十-H-NDNDNDND邻－乙基－邻－对硝基苯基苯>80基硫代磷酸酯（EPN）灭克磷VVV丰索磷NDNDNDND倍硫磷RR马拉松（四零四九）595脱叶亚磷VVV速灭磷NDNDNDND久效磷NDNDNDND二溴磷NRNRNR对硫磷（1605）100甲基对硫磷100甲拌磷（3911）0-62皮蝇磷>80杀虫畏NDNDNDND硫特普VV特普（焦磷酸四乙酯）NDNDNDNDTokuthion(Prothiofos)>80壤虫磷>80注：a.洗脱液成分：级分1： 200ml 6%乙醚的己烷溶液；级分2： 200ml 15%乙醚的已 烷溶液；级分3： 200m1 50%乙醚的己烷溶液；级分4： 200ml 100%乙醚R=回收（未给出百分回收率资料）（U. S. FDA）.”只=没有回收（u. s. FDA）。

V=变动的回收（U. S. FDA）ND=未测定资料来源：EPA和FDA数据.7. 3. 2取一定量硅酸镁载体（通常20g），利用校准预测，加至一支20mm内径的色 谱柱中轻敲柱子以填实硅酸镁载体加无水硫酸钠至硅酸镁载体的顶上以形成1〜2cm 厚层加60ml己烷润湿和冲洗硫酸钠和硅酸镁载体当硫酸钠刚要暴露于空气之前， 关闭色谱柱上的活塞以停止己烷的洗脱，弃去洗脱液7. 3. 3用己烷调整样品提取物体积至10ml并将其从K-D浓缩管转移至硅酸镁载 体柱子上，用1〜2ml己烷冲洗管2次，将每次冲洗液加入柱中7. 3. 4将一个500ml K-D瓶和干净的浓缩管放于色谱柱之下排出柱子进入瓶中, 直至硫酸钠层几乎露出，用200ml 6%乙醚的己烷溶液（y/y）（第一级分）以大约5ml/ min的流速洗脱柱子所有的卤代醚都在此级分中移走K-D瓶并放于一边以备作以后 的浓缩用200ml 15%乙醚的己烷溶液（V/V）（第二级分）再洗脱柱子，进入第二个K-D 瓶中用200ml 50%乙醚的己烷溶液（V/V）（第三级分）进行第三次洗脱，用200ml 100% 乙醚（第四级分）进行最后一次洗脱，移入单独的K-D瓶中。

l7. 3. 5以标准K-D技术在水浴温度大约为8512（对于第四级分为75〃C）时浓缩洗 脱物调整最后体积至所需的体积（1〜10m1）用气相色谱分析 l7. 4硝基芳香化合物和异佛尔酮 17. 4. 1在净化之前，将样品提取物的体积减少至2m10 17. 4. 2在二氯甲烷一己烷（1： 9）（V / V）中制备10g活化的硅酸镁载体悬浮液，并 将其放人一支10mm内径的色谱柱中轻敲柱子以填实硅酸镁载体并加1cm无水硫酸 钠至顶部调整洗脱速度至大约2ml/min _7. 4. 3正当硫酸钠层将暴露于空气之前用另外2ml己烷定量地转移样品萃取物 至柱上；在硫酸钠层将暴露于空气之前，加30ml二氯甲烷一己烷（1： 9）（V / V）并继续 洗脱柱子，弃去洗脱液7. 4. 4然后，用30ml丙酮一二氯甲烷（1： 9）（V / V）洗脱柱流入一个装配10ml浓 缩管的500ml K-D瓶中浓缩收集的级分，并将溶剂更换为己烷为了更换溶剂，将洗 脱溶剂减少至大约10m1加50rnl己烷、一粒新沸石，并将重装好的K-D装置放回到热 水浴中调整净化萃取物的最后体积至所需的体积（1〜10m］）,在本级分所洗脱的化合物 为：①2, 4 —二硝基甲苯； ②2,6-二硝基甲苯；③异佛尔酮；④硝基苯（用气相色谱 分析）。

7.5氯代烃类7. 5. 1在净化之前，将样品萃取液的体积减少至2ml；提取溶剂必须是己烷7. 5. 2将12g硅酸镁载体放入一支10mm内径的色谱柱中轻敲柱子以填实硅酸镁 载体并加l〜2cm无水硫酸钠至顶端 17. 5. 3用100ml石油醚预洗脱柱弃去洗脱液，正当硫酸钠层将暴露于空气之前 用倾注法，继用石油醚洗涤，定量转移样品提取液至柱中，弃去洗出液正当硫酸钠层 将暴露于空气之前，用200ml石油醚洗脱柱，并收集洗出液于一个装配有10ml浓缩管 的500ml K-D瓶中本级分将包含所有氯代烃类：①2-氯萘；②1，2—二氯苯；③1， 3-―二氯苯；④1,4—二氯苯；⑤六氯苯；⑥六氯丁二烯；⑦六氯环戊二烯；⑧六氯乙 烷；⑨l,2,4-三氯苯7. 5. 4浓缩该级分，用己烷预湿柱子当装置冷却后，移走Snyder柱，并用己烷 冲洗瓶及其底部接头、流入浓缩管中，调整净化萃取液的最后体积至所需体积 （1〜 10m1。