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体臣卫校毕业论文题目三种肺炎支原体检测法的临床应用分析地 市 : 市学 校:体臣卫校号:考生： 陆施燕指导教师 :-可修编.2021 年 5 月 24 日三种肺炎支原体检测法的临床应用分析摘要目的 探讨肺炎支原体〔MP〕咽拭子快速液体培养法、咽拭子聚合酶链反响〔PCR〕 法和血清MP被动凝集法〔MP-Ab〕等方法在儿童MP感染诊断治疗过程中的敏 感性方法 采用3MP检测法对362例临床拟诊呼吸道〔非细菌性〕感染的患儿的 咽拭子和血清标本进展配对研究，每患儿取咽拭子做快速培养和PCR,同时取 血清做MP-Ab检测，对3种方法的检测结果与临床诊断治疗病例进展回忆性分 析结果 回忆临床病例诊断MP感染患儿152例MP快速培养法检出阳性78 例，阳性率为51.3%，病程为〔4.5±2.6〕天；PCR法检测出阳性103例，阳性率 为67.8%，病程为〔6.2±3.5〕天；MP-Ab法检测出阳性127例，阳性率83.5%， 病程〔8.1 ±4.5〕天结论3种MP检测法的敏感性与病程有相关性，临床医生 应根据患儿病程选取检测方法，以提高阳性检出率和敏感性关键词 肺炎支原体，快速培养法，咽拭子聚合酶链反响，血清抗体，配对研 究目录——匚 l前言 5第一章 文献综述 6§1.1 肺炎支原体的定义 6§1.2 肺炎支原体的发病机制 6§1.3 肺炎支原体的分类 6§1.4 肺炎支原体的临床表现 6§1.5 肺炎支原体的临床诊断 7§1.6 肺炎支原体的实验室检查 7第二章材料和方法 8§2.1 样本 8§2.2 方法概述 8§2.3 临床诊断 MP 感染的诊断标准 8§2.4 实验方法 9§2.5 统计学方法 9第三章结果 10第四章讨论 11结论 12参考文献 12致 13附录 14错误!未定义书签。

前言肺炎支原体〔m ycoplasma pneumoniae,MP〕是婴幼儿、青少年急道感染的主 要病原体之，临床上表现为呼吸道感染综合征，其中约3%〜10%可开展为支原 体肺炎但只根据临床病症很难鉴别由MP或病毒、细菌等病原体引起的儿童呼 吸道感染，给临床治疗带来一定的困难笔者采用3种MP检测法对362例临床 拟诊为呼吸道〔非细菌性〕感染患儿的咽拭子和血清标本进展配对研究，通过病 例回忆来探索对支原体肺炎敏感的实验室诊断方法，以协助临床准确做出诊治第一章 文献综述1.1 肺炎支原体的定义小儿肺炎支原体肺炎多见于 5~15 岁儿童，婴幼儿患病常表现为毛细支气管 炎多数为亚急性起病，发热无定型，或体温正常，咳嗽较重，初期为刺激性干 咳，常有咽痛，头痛等病症X线改变明显，多为单侧病变，也可见双侧病变， 以下叶为多见，有时病灶呈游走性，少数呈大叶性阴影；病程2~3周不等，X线 阴影完全消失比病症消退更延长 2~3 周之久，偶有延长至 6 周者1.2 肺炎支原体的发病机制肺炎支原体肺炎〔Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia， MPP〕的发病机制仍 不十分清楚，目前主要有呼吸道上皮吸附作用、MP直接侵入和免疫学发病机制 等学说，其中免疫调节异常在MPP的发生开展中可能起重要作用1.3 肺炎支原体的临床表现1. 多数为亚急性起病，发热无定型，或体温正常，咳嗽较重，初期为刺激性干 咳，常有咽痛，头痛等病症。

2. 可出现多系统多器官的损害，皮肤粘膜表现为麻疹样或猩红热样皮疹；偶见 非特异性肌痛和游走性关节痛；也有表现心血管系统、神经系统损害、血尿及溶 血性贫血等3. 全身病症比胸部体征明显体检肺部体征不明显，偶有呼吸音稍低及少许干 湿罗音者1.4 肺炎支原体的临床诊断病原学诊断肺炎支原体快速鉴定培养法优于被动凝集法，在肺炎支原体肺炎感染的早期可 提供重要的依据，可做为临床诊断 MP感染的优先试验[8];气管肺泡灌洗液 MP-DNA测定不仅能诊断MP感染，且支气管肺泡灌洗术可促进呼吸道病症的改 善及体征恢复，且通过纤维支气管镜收集支气管肺泡灌洗液 MP-DNA，痰液 MP-DNA及血清MP抗体检测阳性率没有差异CRP的检测是肺炎病原体的辅 助诊断方法，一定程度可区分细菌性肺炎和支原体肺炎聚合酶链反响(PCR)技 术检测MP具有可靠、特异性高的特点，逐渐成为早期特异诊断的有力武器1.5肺炎支原体的实验室检查急性期 MPP患儿血清hs-CRP、C3、CA、IgM、IgG明显升高，IgA明显降低； 而恢复期hs-CR、IgG仍然较高，而IgM和IgA均没有明显变化，补体C3、C4 在恢复期也没有明显变化，因此血清C-反响蛋白、免疫球蛋白和血清补体的监 测对诊断急性期或恢复期MPP有重要意义。

MP-IgM和冷凝集试验同时检测可提 高小儿支原体肺炎实验诊断的准确率；支原体肺炎患儿外周血白细胞大多正常占 80%，中性粒细胞增高占61%； 65.6%患儿C-反响蛋白增高；53.6%患儿血沉增快； 58.4%患儿心肌酶谱增高；24.0%患儿肝酶增高；16.8%患儿尿酸增高5流行病学 特点及进展MP肺炎发生率约为22.3%，9〜12岁感染率最低,3〜6岁最高,10〜12月是发 病顶峰月，小儿支原休肺炎发病率有所上升，发病年龄有趋小倾向，秋冬季发病率 高，肺炎支原体只要通过呼吸道进展传播，尤其发病率较高的地区，局部区域每 隔 3-5 年可发生一次肺炎支原体感染，每 2-6 年可发生一次大围的肺炎支原体感 染，每次感染的时间都持续较长，有的感染可持续一年左右，因此，有关部门一 定要采取相应的预防措施，切断呼吸道飞沫传播途径对控制疾病发生和流行具有 重大意义控制支原体感染的发生和流行第二章 材料和方法2.1 样本收集黄河中心医院检验科2013年1月1日〜8月6日在儿科就诊住院患儿病 例，有呼吸道感染病症，已经初诊为非细菌性感染的患儿 362 例作为研究对象， 其中男175例，女187例；年龄为2个月〜12岁，病程为1〜90天。

2.2 方法具体方法有：〔1〕用MP快速培养法、PCR法和MP-Ab法等3种MP检测法对 362 例研究对象同时进展检测，记录结果 〔 2 〕通过研究对象病历回忆统计MP感染的例数，并按年龄、病程和3种MP检测法结果进展统计学分析2.3 临床诊断 MP 感染的诊断标准按文献［1］、临床病症、体征标准，包括回忆性诊断——即患儿经红霉素治疗有 效，经青霉素、头孢菌素治疗无效者等；以及实验室检查3 种检测法至少有一种 阳性病程计算方法：以病历本记录为准，即在患儿开场有病症或体征时开场计 算，到患儿来就诊检测时为止进展计算2.4 MP快速培养法支原体别离鉴别培养液由市浪峰生物技术提供清晨患儿未洗漱 用咽拭子取咽局部泌物，严格按说明书进展，将咽拭子用无菌生理盐 水处理，接种到预温的培养基中，37 °C培养；培养基液体颜色由紫 红色变为草绿色或嫩绿色且清亮，并且在静置时，瓶底有蓝色颗粒或 物质沉淀为阳性，5天后培养基颜色不变或无蓝色颗粒或物质沉淀为 阴性PCR 法：试剂由大学达安基因股份提供应用PCR 法检测 MP-DNA ，严格按试剂盒说明书进展，以在紫外灯下出现 180 bp 扩增 带结果判为阳性。

每次试验均设阳性、阴 性对照〔阳性对照为 MP 质 粒，阴性对照为无菌生理盐水〕由专人进展操作，质量控制MP-Ab 法：试剂为日本瑞必欧株式会社 MP-Ab 检测试剂SERODIA-MYCO II 凝集试验试剂盒，严格按试剂盒说明书操作，抽取患儿静脉血3 ml, 采用明胶颗粒被动凝集法，用血清检测，结果以》1 : 40判断为阳性 每次试验均设未致敏明胶颗粒、致敏明胶颗粒和阳性、阴性血清进展 测定2.5 统计学方法计量资料用均数土标准差〔x土s〕表示，各年龄组与3种检测方法结果比拟用 Spearman检验；各年龄组间确诊病例的阳性率比拟用检验；3种检测方法阳性 结果与病程之间的比拟用q检验第三章 结果3.1 阳性样本经过回忆性诊断，在配对研究组362例研究对象中有152例符合MP感染的 诊断标准，即有152 例确诊病例，其中肺炎45例，支气管炎56例，上呼吸感染 49例，支气管哮喘2例MP快速培养法检测出78例阳性，PCR法检测出103 例阳性，MP-Ab法检测出127例阳性3.2 结果分析各确诊病例的年龄分布，见表1表1显示儿童MP感染的年龄以3〜4岁年 龄段的病例最多，为46例，阳性率最高，为70.77%,与其余年龄组段比拟P<0.05。

3 种检测法的阳性检测结果与年龄分布见表 1，表 1 显示 3 种检测法与年龄之间 差异无统计学意义，以 3〜4 岁的年龄段与其余年龄组段比拟差异无统计学意义， P>0.05不同病程患儿3种检测法的检测结果，见表2,表2显示MP快速培养 法为阳性的患儿病程均值较短为〔4.5±2.6〕天，PCR法为阳性的患儿病程均值 为〔6.2±3.5〕天，MP-Ab法为阳性的患儿病程均值较长为〔8.1±4.5〕天3组 之间两两比拟，差异有统计学意义〔P<0.05〕表1不同年龄组MP感染确诊病 例和3种检测方法结果比照分析注：△□代表与年龄组3〜4岁组段比拟结果表 2不同病程患儿3种检测方法阳性结果比照分析注：△代表三组之间的两两比拟第四章 讨论MP 感染的临床表现常无特异性，临床的实际工作中，容易与一般病毒性感冒 相混淆在临床上患儿有以下病症：〔1〕发热呈弛热或不规那么热刺激性咳嗽 非脓性痰，偶带血丝〔2〕可有咽痛、头痛、胸痛，全身病症比体征明显〔3〕 肺部体征不典型而胸片炎症显著，可见云雾状大片阴影〔4〕WBC正常或升高〔5〕青霉素类、磺胺类抗生素治疗无效，改用或一开场用大环酯类抗生素有效 〔6〕实验室 MP 检验有 1 项或 1 项以上阳性具备以上 2 个条件或以上者可初步 诊断为 MP 感染。

多时候，临床医生为了尽快缓解患儿的病症，需根据患儿的病 症、体征和病史做 MP 感染的诊断性治疗，但应与肺结核相互鉴别2近年来由于诊断技术的提高，MP感染报道日渐增多，一般认为MP感染以年 长儿发病较多，本文表1资料显示，2〜8岁年龄段是发病的顶峰期［2］占同 期呼吸免疫科住院患儿的 9.3%，比有关文献报道各年龄组支原体肺炎占肺炎发 病的 10%〜20%低说明 MP 感染的发病年龄有提前，且年龄越小，临床表现愈 不典型3 临床实验室检测 MP 的方法很多，过去所用的冷凝集试验法诊断 MP 感染缺乏 特异性，敏感性也差，易受病程的影响［ 3 ］ 本文采用配对资料研究，对疑为MP感染的患儿进展3种MP检测法，以探讨MP快速培养法、PCR法和MP-Ab 法等方法在儿童支原体肺炎诊断治疗过程中的敏感性提示临床医生根据患儿不 同的病程选取不同的检测方法，以提高实验室的阳性检出率4 MP 快速培养法是利用 MP 生长代产物使培养基液体中指示剂颜色发生改变来 判断 MP 生长；标本中的其他支原体和细菌那么因培养基中参加了青霉素和醋酸 陀均被抑制该法阳性结果可 48 h 检出结果显示，培养法阳性率为 51.3% 〔78/152〕，低于另外两种方法的阳性率。

可能与在检测前患儿已经用了 MP 敏 感药物有关表 2 结果显示，该法阳性病例病程最短提示病程时间较短的患儿 选择此方法对检测的阳性率较高MP培养是诊断MP的金标准［4］5 咽拭子 PCR 法检测质粒核酸，该法快速、敏感和特异，通过一技术可从患儿 痰中检测MP-DNA由于此方法相当敏感，易。