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(完整版)高中生物选修三教材原文考点 一、1 1、由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫DNA重组技术，即指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和人物产品 2、限制酶（限制性核酸内切酶），主要是从原核生物中分离纯化出来的，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部分的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 3、两类DNA连接酶：大肠杆菌→E.coliDNA 连接酶→互补黏性末端 T4唑菌体→T4DNA连接酶→两者皆可，平末端效率较低 ４、质粒作为载体将基因送入细胞中，质粒是一种裸露的、结构简单，独立于细菌非核DNA之外并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切割位点供外浮DNA片段（基因）插入其中质粒进入受体细胞后自我复制或整合到染色体DNA随其同步复制。

５．基因工程中使用的载体除质粒外，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等 —、2 1、基因工程主要有四个步骤： 目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定 2、PCR是多聚酶链式反应的缩写，PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，PCR是利用DNA双链复制的原理，将基因的核苷酸序列不断地加以复制促其数量指数方式增加 3、基因表达载体: 目的基因 启动子：位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位 终止子：位于基因的尾端，也是一段有特殊结构的DNA段片段 标记基因：是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因 使目的基因在受体细胞中稳定存在（转化），并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用（转化） 4、 (1)导入目的基因（植物）：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法（中国独创） (2)导入目的基因（动物or受精卵）操作顺序：表达载体提纯.（DNA浓度1～3μg/mL）----→取卵受精----→显微注射仪显微注射（目的基因）----→胚胎早期培养----→移植 (2)导入目的基因（微生物） 原核生物优点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 大肠杆菌转化方法：Ca2+ 处理细胞----→使细胞处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(感受真细胞) ----→重组表述载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合----→一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子。

5、 （1）检验目的基因插入 DNA分子杂交技术：提取转基因生物基因组DNA----→在含有目的基因的DNA----→片段上用放射性同位素标记----→以此为探针与基因组DNA杂交----→显系杂交带证明目的基因 （2）检验MRNA转录：用标记的目的基因作探针和MRNA杂交 （3）检验蛋白质翻译：抗原—抗体杂交 （4）个体生物学水平鉴定:抗虫抗病接种试验 一、1 1、由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫DNA重组技术，即指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和人物产品 2、限制酶（限制性核酸内切酶），主要是从原核生物中分离纯化出来的，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部分的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 3、两类DNA连接酶：大肠杆菌→E.coliDNA 连接酶→互补黏性末端 T4唑菌体→T4DNA连接酶→两者皆可，平末端效率较低 ４、质粒作为载体将基因送入细胞中，质粒是一种裸露的、结构简单，独立于细菌非核DNA之外并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。

质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切割位点供外浮DNA片段（基因）插入其中质粒进入受体细胞后自我复制或整合到染色体DNA随其同步复制 ５．基因工程中使用的载体除质粒外，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等 —、2 1、基因工程主要有四个步骤： 目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定 2、PCR是多聚酶链式反应的缩写，PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，PCR是利用DNA双链复制的原理，将基因的核苷酸序列不断地加以复制促其数量指数方式增加 3、基因表达载体: 目的基因 启动子：位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位 终止子：位于基因的尾端，也是一段有特殊结构的DNA段片段 标记基因：是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因 使目的基因在受体细胞中稳定存在（转化），并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用（转化） 4、 (1)导入目的基因（植物）：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法（中国独创） (2)导入目的基因（动物or受精卵）操作顺序：表达载体提纯.（DNA浓度1～3μg/mL）----→取卵受精----→显微注射仪显微注射（目的基因）----→胚胎早期培养----→移植 (2)导入目的基因（微生物） 原核生物优点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 大肠杆菌转化方法：Ca2+ 处理细胞----→使细胞处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(感受真细胞) ----→重组表述载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合----→一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子。

5、 （1）检验目的基因插入 DNA分子杂交技术：提取转基因生物基因组DNA----→在含有目的基因的DNA----→片段上用放射性同位素标记----→以此为探针与基因组DNA杂交----→显系杂交带证明目的基因 （2）检验MRNA转录：用标记的目的基因作探针和MRNA杂交 （3）检验蛋白质翻译：抗原—抗体杂交 （4）个体生物学水平鉴定:抗虫抗病接种试验 。