原核细胞dna的复制教学教案.ppt

单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版副标题样式*1原核细胞DNA的复制林琳 生科院6666班（6666666666666）n什么是DNA复制n和DNA复制有关的的概念n和复制有关的酶n原核细胞DNA复制的分子机制什么是DNA复制n所谓DNA的复制，即以亲代DNA分子为模板合成与其完全相同的子代DNA的过程nDNA的复制可分为起始、延伸、终止三个阶段n复制叉：DNA复制时双链解开，形成一个Y形结构，称为复制叉和复制有关的酶n（一）DNA聚合酶npoln功能 53聚合酶活性； 酶与模板结合后构象改变，识别碱基，正确配对后才发挥聚合作用 3 5外切酶活性； 主要是对新生DNA链进行校对，防止“错配” 53外切酶活性； 主要是对DNA损伤的修复，以及在DNA复制时RNA引物 的切除及其空隙的填补内切酶活性：切掉不配对碱基nPol 功能53聚合酶活性；35外切酶活性 该酶无53外切酶活性；且活性很低，功能尚不清楚nPol nDNA 复制中起关键作用的酶n功能n53聚合酶活性；n35外切酶活性nPol 是由十种亚基构成的不对称二聚体， 、构成核心酶n Pol （二）DNA连接酶： 若双链DNA中一条链有切口，而且一端是3-OH，另一端是5-磷酸基，连接酶可催化这两端形成磷酸二酯键，而使切口连接。

3535OHP DNA连接酶不能将两个游离的DNA分子连接起来 大肠杆菌和其它细菌的DNA连接酶需要NAD+提供能量；在高等生物和噬菌体中，则要ATP提供能量T4 DNA连接酶可连接两个游离的DNA分子原核细胞DNA复制的分子机制全保留复制？分散式复制？半保留复制？DNA复制方式？半保留复制半保留复制的实验证据 1958年Meselson和Stahl用同位素15N标记大肠杆菌DNA，首先证明了DNA的半保留复制亲代第一代第二代n双链解开DNA旋转酶(拓扑异构酶)、 DNA解链酶、单链结合蛋白协同作用n起始-RNA引物的合成n在DNA模板上先合成一段RNA引物，DNA聚合酶从引物的3-OH末端开始合成新的DNA链nRNA引物的合成需要引物合成酶的催化n延伸n在DNA聚合酶的作用下，活化的脱氧核苷酸加到引物末端，同时脱掉一个焦磷酸n前导链连续合成n后随链以一些列冈崎片段和方式不连续合成n冈崎片段：DNA复制过程中，两条新生链都只能从5端向3端延伸，前导链连续合成，滞后链分段合成这些分段合成的新生DNA片段称冈崎片段n终止1、在DNA聚合酶催化下切除RNA引物；留下的空隙由该酶催化合成一段DNA填补上；2、在DNA连接酶作用下，连接相邻的DNA链；3、修复掺入DNA链的错配碱基；以修复方式填补终止区50-100bp的空缺。

这样以两条亲代DNA链为模板，各自形成一条新的DNA互补链，结果形成了两个DNA双股螺旋分子。