薯蓣皂苷元的提取分离和鉴别.docx

本文格式为Word版，下载可任意编辑薯蓣皂苷元的提取分离和鉴别 薯蓣皂苷元的提取分开和鉴别 一、测验目的 1．掌管甾体皂苷元（亲脂性和中性成分）的提取方法 2．熟谙薯蓣皂苷元的性质及鉴定法 二、仪器与试药 （一）仪器 SHB-循环水式多用真空泵 HHS型电热恒温水浴锅玻璃仪器气流烘干器 ZF-2型三用紫外仪电热恒温枯燥箱烧杯（1000mL、100mL）乳钵 电炉子空气回流管移液管（10mL、5mL）锥形瓶（100mL）沙式提取器（二）试药 薯蓣粗粉硫酸铵碳酸钠中性滤纸石油醚（30-60℃）无水乙醇活性炭 浓硫酸AI2O3软板（中性100～200目，活性Ⅲ级）苯甲醇 硅胶H-CMC硬板石油醚乙酸乙酯磷钼酸 三、药材中主要成分介绍 薯蓣皂苷元（Diosgenin）是一种甾体皂苷元，分子式（C27H42O31）,分子量414.61，为白色结晶，mp 204～207℃，溶于一般有机溶剂和醋酸，不溶于水目前，是制造多种甾体药物如口服避孕药（I号，II号避孕药片）和甾体激素（如可的松）等的重要原料在植物界主要分布在薯蓣科薯蓣属（Dioscorea）植物中，我国的薯蓣属植物有80余种，其中只有薯蓣根茎组（Stenophora）的17种、I亚种及一变种才含有甾体皂苷元，其它那么含有多量淀粉，无皂苷元。

已用于生产的主要有盾叶薯蓣（D.Zingiberensis C. H. Wright），穿龙薯蓣（D.nipponica Makino），黄山药（D.panthaica prain et Burkil），紫黄姜(D.nipponica Makinovar rosthani prain et Burk)等在植物体内薯蓣皂苷元是与葡萄糖、鼠李糖结合成薯蓣皂苷（Dioscin）而存在提取分开时，一般是先用稀酸将薯蓣皂苷水解成薯蓣皂苷元与单糖（葡萄糖、鼠李糖）因薯蓣皂苷元不溶于水，混存于植物残渣中，故可用有机溶剂（如石油醚）直接从植物残渣中提取出薯蓣皂苷元 四、测验内容 1．皂苷预试 （1）泡沫试验 （2）李伯曼—布哈德（Liebermann-Burchard）回响 glu (rha)2 3 2．薯蓣皂苷元的提取 注一：检查薯蓣皂苷元是否提尽，可用李伯曼回响，参考测验二“注三”项下 注二：回收石油醚的方法见测验一“注四”项下 注三：所得薯蓣皂苷元（粗品）用石油醚抽洗后，即可测定熔点，若熔点不合格时，才举行重结晶。

五、薯蓣皂苷元的鉴定 1．熔点测定：204～209℃ 2．薄层层析鉴定： 样品：白色结晶的无水乙醇液 标准品：薯蓣皂苷元无水乙醇液 方法一：吸附剂：Al 2O 3软板（中性100～200目，活性Ⅲ级） 开展剂：苯-甲醇（9：1） 方法二：吸附剂：硅胶H-CMC 硬板 粉碎碎块（3-5mm 左右的小颗粒）50g 置于100ml 锥形瓶中，再参与2NH 2SO 4500ml ，安上空气回流管，在电炉上直火加热（隔石棉网）回流4小时（从回流开头计时）水解物放冷，水洗两次后，用Na 2CO 3粉中和，在布氏漏斗上水洗至中性，尽量抽干 +植物组织等） 滤渣置盘中，在60℃枯燥（枯燥过程中要留神压散团块并翻动） 枯燥的中性滤渣置沙氏提取器中，以石油醚（bp30-60℃）在水浴上回流提尽皂苷元[注一]回收石油醚[注二]至约10-15ml 时中断，倾入小锥形瓶，密塞，冷却析晶，抽滤，用少量石油醚快速抽洗[注三]用无水乙醇重结晶（必要时用少许活性碳脱色），枯燥（105℃）白色晶体（薯蓣皂苷元） 开展剂：石油醚-乙酸乙酯（7：3） 显色剂：10%磷钼酸乙醇溶液。

喷雾后加热10～20分钟 3．化学回响： （1）Liebermann-Burchard回响 （2）CHCl3 - 浓H2SO4回响 （3）五氯化锑回响（Kahlenberg回响）：与五氯化锑的氯仿溶液呈紫蓝色 4．制备衍生物： 乙酰化物的制法：取样品100mg溶于3mL吡啶中，参与20mL醋酐，煮沸半小时至一小时后，将回响物倒入冰水中（冬季操作使用冷水即可）待析出白色晶体后，抽滤，析出物丙酮重结晶即得mp196～193℃ 5．紫外吸收光谱的测定： 取样品5mg，参与浓H2SO4 10mL，在40℃水浴上加热1小时，放冷，测定薯蓣皂苷元应有以下最大吸收峰： λmax271nm 415nm 514nm lg 3.99 4.06 3.64 六、测验结果 1．细致记录定性回响结果 2．绘制色谱图，并计算R f值 3．总坚固验过程中遇到的问题和解决方法 — 5 —。