
真菌常用培养基的配方.docx
4页酵母菌、霉菌常用培养基的配制一、目的要求 了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理 学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏 培养基的配制方法二、基本原理麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌马铃薯葡 萄糖培养基有时也可用于培养放线菌豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用麦芽汁培养基为天然培养基,马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基,而 察氏培养基则为合成培养基培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱 调节而自然呈现的 pH三、实验材料(一)药品葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KC1、MgSO4・7H2O, FeS04、琼脂二)仪器天平、高压蒸汽灭菌锅三)玻璃器皿 移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等四)其他物品药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报 纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等四、实验内容(一)麦芽汁培养基的配制1.培养基成分 新鲜麦芽汁一般为 10-15 波林2.配制方法⑴用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6-12h,置于15°C阴凉处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘 干,研磨成麦芽粉,贮存备用。
2) 取一份麦芽粉加四份水,在65C水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至 糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化 完全)3) 糖化液用 4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清, 加水20 ml,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)4) 用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH 至 6.4如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到 10-15波林后使用5) 如配固体麦芽汁培养基时,加入2%琼脂,加热融化,补充失水6) 分装、加塞、包扎7) 高压蒸汽灭菌 100 Pa 灭菌 20 min二) 马铃薯葡萄糖培养基的配制 1、培养基成分马铃薯20g葡萄糖2 g琼脂1.5-2g水100ml自然 pH配制方法(1) 配制20%马铃薯浸汁 取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000ml80C 浸泡lh,用纱布过滤,然后补足失水至所需体积100 Pa灭菌20 min即成20%马 铃薯浸汁,贮存备用2) 配制时,按每100 m1马铃薯浸汁加入2g葡萄糖,加热煮沸后加入2g琼脂, 继续加热融化并补足失水。
3) 分装、加塞、包扎4)高压蒸汽灭菌 100 Pa 灭菌 20 min(三) 豆芽汁葡萄糟培养基的配制1.培养基成分黄豆芽10g葡萄糖5g琼脂1.5-2g水100ml自然 pH2.配制方法(1) 称新鲜黄豆芽10g,置于烧杯中,再加入100 ml水,小火煮沸30 min,用 纱布过滤,补足失水,即制成 10%豆芽汁2) 配制时,按每100 ml 10%豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g琼脂,继 续加热融化,补足失水3) 分装、加塞、包扎4) 高压蒸汽灭菌 100 Pa 灭菌 20 min四) 察氏(czapck)培养基的配制 1.培养基成分蔗糖3gNaN030.3gK2HP040.1gKCl0.05gMgSO4・7H2O0.05 gFeS040.001 g琼脂1.5-2g蒸馏水100ml自然 pH2.配制方法(1) 称量及溶化 量取所需水量约2/3 左右加入到烧杯中,分别称取蔗糖、NaNO3、K2HP04、KC1、MgSO4依次逐一加入水中溶解按每100 ml培养基加3 2 4 4入 1ml 0.1% 的 FeS04 溶液2) 定容 候药品全部溶解后,将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。
3) 加琼脂 加入所需量琼脂,加热融化,补足失水4) 分装、加塞、包扎5) 高压蒸汽灭菌 100 Pa 灭菌 20 min五、实验报告内容记录你所配制培养基的名称及成分。
