几种细胞破碎方法.docx

匀浆器的几种细胞破碎方法发布时间：2010-08-02 点击次数：60研磨是常用的一种方法，它将细胞悬浮液与玻璃小珠，石英砂或氧化铝一起快速搅拌或 研磨，使达到细胞的某种程度破碎这些装置的主要缺点是在破碎期间样品温度迅速升高， 通过用二氧化碳来冷却容器可得到部分解决X-press 法一种改进的高压方法是将浓缩的菌体悬浮液冷却至-25C至-30C形成冰晶体，利用 500MPa 以上的高压冲击，冷冻细胞从高压阀小孔中挤出细胞破碎是由于冰晶体的磨损， 包埋在冰中的微生物的变形所引起的该法的优点是适用的范围广，破碎率高，细胞碎片的 粉碎程度低以及活性的保留率高，该法对冷冻—融解敏感的生化物质不适用超声波法 细胞的破碎是由于超声波的空穴作用，从而产生一个极为强烈的冲击波压力，由它引起 的粘滞性旋涡在介质中的悬浮细胞上造成了剪切应力，促使细胞内液体发生流动，从而使细 胞破碎对于不同菌种的发酵液，超声波处理的效果不同，杆菌比球菌易破碎，革兰氏阴性 菌细胞比革兰氏阳性菌细胞容易破碎，对酵母菌的效果级差该法不适于大规模操作，因为 放大后，要输入很高的能量来提供必要的冷却，这是困难的酶解法 利用酶反应，分解破坏细胞壁上特殊的键，从而达到破壁的目的。

优点：专一性强，发 生酶解的条件温和，缺点:酶水解费用较贵，一般只适用于小规模的实验室研究溶菌酶是 应用最多的酶，它能专一地分解细胞壁上糖蛋白分子的a-1, 4糖苷键，使脂多糖解离，经 溶菌酶处理后的细胞移至低渗溶液中使细胞破裂自溶作用 是酶解的另一种方法，所需溶胞的酶是由微生物本身产生的影响自溶过程的因素有温 度，时间,pH缓冲液浓度，细胞代谢途径等自溶法在一定程度上能用于工业规模，但是， 对不稳定的微生物容易引起所需蛋白质的变性，自溶后的细胞培养液过滤速度也会降低渗透压冲击是较温和的一种破碎方法，将细胞放在高渗透压的介质中（如一定浓度的甘油或蔗糖溶 液），入达到平衡后，介质被突然稀释，或者将细胞转入水或缓冲液中，由于渗透压的突然 变化，水迅速进入细胞内，引起细胞壁的破裂渗透压冲击的方法仅对细胞壁较脆弱的菌， 或者细胞壁预先用酶处理,或合成受抑制而强度减弱时才是合适的冻结融化法 将细胞放在低温下突然冷冻和室温下融化，反复多次而达到破壁作用对于细胞壁较脆 弱的菌体，可采用此法但通常破碎率很低即使反复循环多次也不能提高收率另外，还可 能引起对冻融敏感的某些蛋白质的变性干燥法 可采用空气干燥，真空干燥，喷雾干燥和冷冻干燥等。

空气干燥主要适用于酵母菌真 空干燥适用于细菌的干燥冷冻干燥适用于较不稳定的生化物质干燥法条件变化较剧烈 容易引起蛋白质或其它组织变性。