高效液湘色谱法测定苯、苯酚、对苯醌、苯二酚和苯三酚.docx

高效液湘色谱法测定苯、苯酚、对苯醌、苯二酚和苯三酚额日和木;王旭;张煜琳;萨嘎拉;照日格图【摘要】 Based on the high performance liquid chromatography method ,benzene and its direct oxida-tion products :phenol , benzoquinone , o-Bihydroxybenzene , m-Bihydroxybenzene , p- Bihydroxybenzene , benzenetriol were completely separated by the YMC- C18(250mm x 46mm ,5pm) chromatographic column with acetonitrile- water(50:50 ,v/v) as mobile phase .The UV detection wavelength was set at 270 nm .The result showed good linearity (R>0 .99) ,the detection limit of the samples were between 0 .002-0 .008 pg/mL .The recoveries of internal standard method(ISM) ranged from 80 .40 to 101 .59% at the three spiked levels ,the relative standard deviation was below 9 .6% ;the recoveries of external standard method (ESM ) ranged from 82 .72 to 99 .48% at three spiked levels ,the relative standard deviation was below 10 .8% .It was indicated that the internal standard method was better than the external standard method for the quan-titative analysis of benzene and its products of oxidation .T his method is simple ,rapid ,sensitive and stabi-lized ,low consumption of sample and solution ,and analytical conditions are moderate .%本文采用高效液相色谱法，以乙腈-水( 50:50, v/v)混合溶液为 流动相，经YMC -C18 ( 250 mm x46mm ,5pm )色谱柱分离，紫外检测波长 为270nm时，测定了苯、苯酚、对苯醌、邻苯二酚、间苯二酚、对苯二酚和苯三 酚。

结果表明：苯、苯酚、对苯醌、邻苯二酚、间苯二酚、对苯二酚和苯三酚在各 自的测定范围内均有良好的线性关系(相关系数为>0.999 )，方法的检出限为0.002~0.008|jg/mL内标法（ISM ）回收率为 80.40%-101.59%,相对标准 偏差＜9.6%;夕卜标法（ESM ）回收率为82.72%~99.48%,相对标准偏差v 10.8%说明在苯、苯酚、对苯醌、邻苯二酚、间苯二酚、对苯二酚和苯三酚定量 分析方法中内标法优于外标法，并且该方法操作简便、快速、稳定性好、样品和溶 液用量少，分析条件温和期刊名称】《分析仪器》 【年（卷），期】2014（000）003 【总页数】6页（P34-39） 【关键词】苯;苯酚;内标法;外卜标法;高效液相色谱 【作者】额日和木;王旭涨煜琳;萨嘎拉;照日格图【作者单位】内蒙古师范大学化学与环境科学学院，内蒙古自治区绿色催化重点实 验室，呼和浩特010022;内蒙古师范大学化学与环境科学学院，内蒙古自治区绿 色催化重点实验室，呼和浩特010022;内蒙古师范大学化学与环境科学学院，内 蒙古自治区绿色催化重点实验室，呼和浩特010022;内蒙古师范大学化学与环境 科学学院，内蒙古自治区绿色催化重点实验室，呼和浩特010022;内蒙古师范大 学化学与环境科学学院,内蒙古自治区绿色催化重点实验室,呼和浩特 010022【正文语种】中文目前工业上90%的苯催化氧化制苯酚用异丙苯法［1］,而此方法存在着原料转化 率低，反应步骤多，产物选择性低等一系列问题，易生成多种、大量的副产物，造 成很大环境污染。

因此苯直接羟基化成为重要的发展趋势［2］而苯直接氧化羟 基化的主要产物为苯酚、对苯醌、邻苯二酚、间苯二酚、对苯二酚和苯三酚这些 产物是重要的有机化工原料，广泛用于石油化工、农业及工业生产等诸多领域，在 合成纤维、合成橡胶、塑料、医药、农药、香料、涂料、染料和炼油等工业中都有 着重要的用途［3］但是，众所周知苯为环境中的主要有毒有机污染物之一，被 国际卫生组织确认为具有高毒性的致癌物质［4］,而苯二酚的毒性与苯酚类似， 它们容易经吸入、食入、皮肤吸收进入人体，能够抑制中枢神经系统，损害肝、皮 肤功能［5］因而对这些有机污染物进行监测和监控，对环境系统的评价和毒理 分析起着重要的作用，因此对这些物质的快速高效的分离分析尤为重要目前文献 报道苯及其氧化产物的分析方法最常见的是气相色谱法［6］，高肖汉等，主要分 析了苯和苯酚Badol等［7］,采用吹扫补集-气相色谱，分析了苯和1, 3-丁二 烯臧立华和孙晓慧等［8,9］，分别用气相色谱质谱联用法分析了多种挥发性 有机物、Schupfer等［10,11］，采用固相微萃取-气相色谱质谱法技术分析了 苯系物，主要包括：苯、甲苯、乙苯等物质近年来也有研究者用高效液相色谱法 测定空气中的苯系物［13］,其一般方法为，运用吸附剂吸附，采用萃取方法获 得样品后再进行液相分析。

孙剑奇等［12］，用液相色谱法分析了苯二酚Ogawa等［14 ］分析苯的氧化产物时采用高效液相色谱法定量分析了苯酚、对苯 醌、1,2,4-苯三酚和二氧化碳蒋生祥等［15 ］采用涂敷后的C18柱子分离了 间苯三酚、3种苯二酚和苯酚等酚类化合物，有效分离3种苯三酚方面需要进一步 的研究利用气相色谱分析有机物时，色谱柱的高温条件易将一部分有机物分解和 裂变，存在分析条件苛刻、分析结果不准确等因素而液相色谱法可以对80%的 有机化合物进行分离分析，与气相色谱法相比，高效液相色谱法优势在于在较低温 度下能将邻苯二酚、间苯二酚和对苯二酚等同分异构体分离开，从而更准确地对这 3种物质进行定量本文采用高效液相色谱法，以乙腈-水( 50:50, v/v )作为 流动相，待测样经过滤(0.22pm )并超声前处理之后，分别采用内标法B--旧yZW1一 H长由)右来来々原来戾捋 d 二 二H®) n LnCNIZ 二旧yUIAIA 长m) ( ErlLn、EE9 寸 XEEOLnCN)出ffi88 二旧y^/SB H^s坦物泌-KH扼)s姓 H®«]理 N 盥柬配埠燎(5IOMCO Egs>s ) <9—_lus，勰ffi( U*O UEnou )<961—u，联埋媪® 帆(qdeso 柘 Eo」lo P5bn)<961 ,®H■饲单怒秘同念鄱(」£u 号 CPE① EOTOqdo」尊 ds s> vn) ><9—ads 怔固。

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富皿) 彩出ffiw-旧 y^/^iH同咄蜓 B、(喜.66AIMT 场、hmuoe<)SNJ二於垣 晶淫iel 14萄)号置想⑩二旧y最ImN蜓用U-2900双光束分光光度计，对10种标准溶液于200 ~ 600nm范围内进行扫描测定溶液的紫外最大吸收波长和在270nm处相对吸收值（以邻苯三酚为基准） 列于表1中表1显示，波长为254 ~270nm处为最强的吸收，因此选择检测波 长为270nm比较乙腈-水体积比分别为80 :20、70 : 30、60 : 40、50 : 50的 分离效果，结果显示50 : 50时，苯、苯酚、对苯醌、邻苯二酚、间苯二酚、对苯 二酚和苯三酚的峰形都比较对称，但随着乙腈比例的增加，保留时间逐渐缩短为 了避免杂质峰的干扰，选择乙腈-水（ 50:50, v/v ）作流动相，流速0.8 mL-min-1 ;检测波长 270nm ;色谱柱：YMC-Pack Pro C18 柱，柱温 40°C;进 样量20pLo表1各组分的紫外最大吸收波长物质苯苯酚对苯醌邻苯二酚间苯二酚对苯二酚邻 苯三酚1,2,4-苯三酚间苯三酚对甲酚最大吸收波长（nm ） 270nm处相对吸收 值 254 265 252 270 270 272 271 275 267 274 1.0 1.5 0.7 0.9 0.9 0.9 1.0 0.7 1.3 1.41.3标准溶液的配制标准储备液和标准工作液的配制：分别准确称取一定量的标准品固体（液体），用 乙腈溶解定容配制成0.1g・L-1的标准储备液（冰箱中冷藏保存）；用乙腈稀释上 述标准储备液，分别配制不同质量浓度的标准使用液。

1.4样品前处理将配好的标准溶液超声处理10min，使溶液充分脱气，再将标准溶液经0.22pm 的滤膜进行过滤，移至容量瓶中，准备进行定量分析2结果与讨论2.1色谱分离与定性在反相液相色谱柱中，通常情况下强极性的样品因与流动相之间的结合力强，因此 先被洗脱，极性相对较小的则后被洗脱本文以乙腈-水（ 50:50, v/v ）为流动 相，依次对苯、苯酚、对苯醌、邻苯二酚、间苯二酚、对苯二酚和苯三酚单独进行 检测，首先对单组分样品进行测试并记录其保留时间，然后将10个组分混合并加 入0.1mL的内标物对甲苯酚，平行测试3次，记录各组分的平均保留时间苯三 酚因具有3个羟基，其极性在苯的氧化产物当中是最强的，因此最先被流动相洗 脱，苯三酚的保留时间为Tr = 2.559min、Tr = 2.870min ;苯二酚因具有2个羟 基，所以极性比苯三酚弱，但比苯酚、对甲苯酚和苯都大，其保留时间在出现在苯 三酚之后，苯酚和对甲苯酚之前，邻苯二酚的保留时间为。