牛乳中酪蛋白的制备.ppt

 实验七实验七  牛乳中酪蛋白的制备牛乳中酪蛋白的制备   目的要求目的要求     学习从牛乳中分离纯化酪蛋白的原理和方法   实验原理实验原理        牛牛乳乳中中主主要要的的蛋蛋白白质质是是酪酪蛋蛋白白，，含含量量约约为为3535g/Lg/L酪酪蛋蛋白白是是一一些些含含磷磷蛋蛋白白质质的的混混合合物物，，等等电电点点为为4.74.7利利用用等等电电点点时时溶溶解解度度最最低低的的原原理理，，将将牛牛乳乳的的pHpH调调至至4.74.7时时，，酪酪蛋蛋白白就就沉沉淀淀出出来来用用乙乙醇醇洗洗涤涤沉沉淀淀物物，，乙乙醚醚除除去去脂脂类类杂杂质质后后便便可可得得到纯的酪蛋白到纯的酪蛋白试剂和器材试剂和器材•试剂：试剂：95%乙醇；乙醇—乙醚混合液 (V/V=1∶1);无水乙醚0.2mol/L pH4.7醋酸—醋酸钠缓冲液•材料材料 纯牛奶(蒙牛)    1 1．将．将2525mLmL牛奶加热至牛奶加热至40℃40℃在搅拌下慢慢加入预热至在搅拌下慢慢加入预热至40℃40℃、、pH4.7pH4.7醋酸缓冲液醋酸缓冲液2525mLmL用用精密试纸调精密试纸调pHpH值至值至4.74.7。

2. 2. 将上述悬浮液冷却至室温离心将上述悬浮液冷却至室温离心1010min(3000r/min)min(3000r/min)弃去弃去上清液，得酪蛋白粗制品上清液，得酪蛋白粗制品 3 3．用水洗沉淀两次，离心．用水洗沉淀两次，离心5 5min(3000r/min)min(3000r/min)，，弃去上清液弃去上清液 操作方法操作方法         3 3．用乙醇洗沉淀．用乙醇洗沉淀1 1次，离心次，离心5 5min(3000r/min)min(3000r/min)，，弃去上清弃去上清 液用乙醇液用乙醇——乙醚混合液洗沉淀乙醚混合液洗沉淀1 1次最后用乙醚洗沉淀次最后用乙醚洗沉淀1 1次，次， 各离心各离心5 5min(3000r/min)min(3000r/min) 4 4．将沉淀摊开在表面皿上，．将沉淀摊开在表面皿上，风干风干；得酪蛋白纯品得酪蛋白纯品 5 5．准确称重，计算含量酪蛋白．准确称重，计算含量酪蛋白g/100mLg/100mL牛乳（牛乳（g%g%））, ,并和并和 理论含量为理论含量为3.53.5g/100mLg/100mL牛乳相比较，求出实际得率。

牛乳相比较，求出实际得率1．制备高产率纯酪蛋白的关键是什么？．制备高产率纯酪蛋白的关键是什么？ 思考题。