中药制剂分析：03－中药制剂的检查-2.ppt

第三节 特殊杂质检查方法检查方法列在该药品标准项下西洋参 人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1、F3、F11等人参人参皂苷R0、Ra、Rb1、Rb2、Rc、Rd、Rg1、Rg2、Rh1、Rh2、Rh3等（补气养阴，清热生津）（大补元气，复脉固脱，生津）一、西洋参中人参的检查 TLC 西洋参和人参主要含各种人参皂苷，但所含皂苷的种类及含量有差别生晒参红参西洋参对照RfF11三七例 西洋参 Ch.P.（2010） 【检查】人参 取人参对照药材 1g，照鉴别项下对照药材溶液制备的方法制成对照药材溶液照薄层色谱法（附录 B）试验，吸取鉴别项下的供试品溶液和上述对照药材溶液各2l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13:7:2）510放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10硫酸乙醇溶液，在105加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯（365nm）下检视供试品色谱中，不得显与对照药材完全相一致的斑点 二、土大黄苷的检查正品大黄 大黄酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚及苷类、番泻苷伪品大黄 不含或仅含痕量大黄酸和番泻苷（泻热通肠、凉血解毒）（外用收敛止血药或兽药）正品大黄（蓼科） 掌叶大黄 Rheum palmatum L. 唐古特大黄 Rheum tanguticum Maxim.ex Balf. 药用大黄 Rheum officinale Baill伪品大黄（大黄属波叶大黄组） 藏边大黄 Rheum emodi Wall. 河套大黄 Rheum hotaoense C.Y.Cheng et C.T.Kao 华北大黄 Rheum franzenbachii Munt 天山大黄 Rheum wittrochii Lundstr.又称山大黄或土大黄正品大黄 含有极少量土大黄苷伪品大黄 含有较大量土大黄苷土大黄苷检查方法 色谱法（PC、TLC）检查原理土大黄苷亮蓝紫色荧光UV灯365nm药材新鲜折断面在紫外光灯下显蓝紫色荧光例 大黄 Ch.P.（2010） 【检查】土大黄苷 取本品粉末0.2 g，加甲醇2 ml，温浸10分钟，放冷，取上清液10 l ，点于滤纸上，以45%乙醇展开，取出，晾干，放置10分钟，置紫外光灯（365nm）下观察，不得显持久的亮紫色荧光。

例 三黄片 Ch.P（2000） 【检查】土大黄苷 取本品粉末加热回流30分钟后的滤液，点样于硅胶G-CMC-Na板上，以酯酸丁酯-丁酮-甲酸-水（10:7:1:1）展开，置紫外光灯（365nm）下检视，在盐酸小檗碱对照品所显斑点的上方位置，不得显持久的亮蓝紫色荧光斑点例 三黄片 Ch.P（2005） 【处方】大黄300g，盐酸小檗碱5g，黄芩浸膏21g（相当于黄芩苷15g） 【检查】土大黄苷 取【鉴别】（2）项下的供试品色谱，置紫外光灯（365nm）下检视，在盐酸小檗碱所显斑点的上方位置，不得显持久的亮蓝紫色荧光斑点供对例 三黄片 Ch.P.（2010） 【检查】土大黄苷 取本品小片2片或大片1片，糖衣片除去糖衣，研细，加甲醇15 ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液作为供试品溶液另取土大黄苷对照品，加甲醇制成每1 ml含0.3 mg的溶液，作为对照品溶液照薄层色谱法（附录VI B）试验，吸取上述两种溶液各2 l ，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸-水（100:30:2:3）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的荧光斑点。

1. 伪品大黄在紫外灯下显 A. 黄色 B. 紫红色 C. 棕色或红棕色 D. 蓝色或灰蓝色 E. 亮蓝紫色 2. 正品大黄植物是 A. 蓼科植物 B. 原植物有掌叶大黄 C. 原植物有波叶大黄 D. 原植物有唐古特大黄 E. 原植物有药用大黄 3. 大黄所含在UV灯下呈亮蓝紫色荧光 的物质是 A. 大黄酸苷 B. 芦荟苷 C. 土大黄苷 D. 芦丁 E. 大黄素4. 下列化合物中泻下作用最强的是 A. 大黄素甲醚 B. 番泻苷 C. 芦荟苷 D. 芦荟大黄素苷 E. 大黄素葡萄糖苷59 A. 一般杂质 B. 特殊杂质 C. 两者均可 D. 两者均不可 5. 阿胶需检查“挥发性碱性杂质” 6. 复方鸡血藤膏需检查“干燥失重” 7. 正品大黄药材、大黄流浸膏和三黄片需 检查“土大黄苷” 8. 肉桂油需检查“相对密度”和“折光率” 9. 杂质检查BABDC 三、阿胶中水不溶物的检查 阿胶为马科动物驴Equus asinus L. 的干燥皮或鲜皮经煎煮、浓缩制成的固体胶 具有补血滋阴，润燥，止血的功效 例 阿胶 Ch.P.（2010） 【制法】将驴皮浸泡去毛，切块洗净，分次水煎，滤过，合并滤液，浓缩（可分别加入适量的黄酒、冰糖及豆油）至稠膏状，冷凝，切块，晾干，即得。

阿胶的生产与水质有极大关系，福牌、东阿镇牌阿胶之所以能闻名天下，就是因为采用得天独厚的制胶水源狼溪泉水的原因 在阿胶生产过程中，如果应用硬度偏高的水煎煮驴皮，使胶沫不易提出，煎煮液过滤效果不理想； 原料驴皮炮制处理不洁净，掇皮不彻底，均可使阿胶中水不溶物增加例 阿胶 Ch.P.（2010） 【检查】水不溶物 取本品1.0 g，精密称定，加水5 ml，加热使溶解，转移至已恒重10 ml具塞离心管中，用温水5 ml分3次洗涤，洗液并入离心管中，摇匀置40水浴保温15分钟，离心（转速为每分钟2000转）10分钟，去除管壁浮油，倾去上清液，沿管壁加入温水至刻度，离心，如法清洗3次，倾去上清液，离心管在105加热2小时，取出，置干燥器中冷却30分钟，精密称定，计算，即得本品水不溶物不得过2.0% 四、乌头酯型生物碱的检查双酯型生物碱来源 由乌头中乌头碱型生物碱与乙乙酸、苯甲酸缩合而成，是乌头有大毒的主要毒性成分例 乌头碱、美沙乌头碱乌头碱双酯型检查方法1. 比色法 双酯型生物碱在碱性条件下与盐酸羟 胺反应，生成异羟肟酸，再与三价铁离子反应，生成红色的异羟肟酸铁，在520nm波长处有特征吸收，在此波长处测定吸光度，可得到总酯型生物碱的含量。

Ch.P（2005）例 制川乌 Ch.P（2005） 【检查】酯型生物碱OH-Fe3+红色Ch.P规定 本品含酯型生物碱以乌头碱 （C34H47NO11）计，不得过0.15%2. 薄层层析法 以乌头碱为对照品，采用薄层层析法对含乌头制剂进行薄层层析，通过比较样品中与乌头碱对照品色谱相应位置上出现的斑点大小及有无进行检查 Ch.P.（2010）主要为含有制川乌、制草乌、附子的制剂 Ch.P.（2010）共收载25种制剂应用TLC法检查乌头碱的限量例 跌打镇痛膏 Ch.P.（2010） 【检查】乌头碱限量 取乌头碱对照品适量，精密称定，加三氯甲烷制成每1 ml含0.4 mg的溶液，作为对照品溶液照薄层色谱法（附录VI B）试验，精密吸取对照品溶液与士的宁检查项下的供试品溶液各10 l，分别点于同一用2%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙醚-甲醇（60:1）为展开剂，展开，取出，晾干，碘蒸气显色供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上出现的斑点，应小于对照品斑点或不出现斑点 3. HPLC法 以乌头碱、次乌头碱和新乌头碱为对照品，采用HPLC法对制川乌、制草乌、附子进行测定，规定上述双酯型生物碱的总量不得过限量。

Ch.P.（2010）另外 Ch.P.（2010）收载的木瓜丸、二十五味珊瑚丸应用HPLC法检查酯型生物碱和乌头碱的限量例 制川乌 Ch.P.（2010） 【检查】双酯型生物碱 照含量测定项下色谱条件，供试品溶液的制备方法试验 对照品溶液的制备 取乌头碱对照品、次乌头碱对照品及新乌头碱对照品适量，精密称定，加异丙醇-三氯甲烷（11）混合溶液分别制成每1 ml含乌头碱50g、次乌头碱和新乌头碱各0.15 mg的混合溶液，即得 测定法 分别精密吸取对照品溶液与含量测定项下的供试品溶液各10l，注入液相色谱仪，测定，即得 本品含双酯型生物碱以乌头碱（C34H47NO11）、次乌头碱（C33H45NO10）及新乌头碱（C33H45NO11）的总量计，不得过0.040%例 木瓜丸 Ch.P.（2010） 【处方】木瓜制川乌40g，制草乌40g 【功能与主治】祛风散寒，除湿通络 【检查】双酯型生物碱 取本品100丸，除去包衣，精密称定， 照高效液相色谱法本品含双酯型生物碱以乌头碱、次乌头碱和新乌头碱的总量计，每丸不得过10g 例 二十五味珊瑚丸 Ch.P.（2010） 本品为藏药验方 【处方】珊瑚，珍珠，榜那 【功能与主治】开窍，通络，止痛。

【检查】乌头碱限量 照高效液相色谱法本品含榜那以乌头碱计，不得过0.15mg 五、千里光中阿多尼弗林碱的检查 千里光为菊科植物千里光Senecio scandens Buch.-Ham. 的干燥地上部分其味苦，性寒，具有清热解毒，明目、之功效 阿多尼弗林碱 千里光主要含有吡咯里西啶生物碱（pyrrolizidine alkaloids，PAs），金丝桃苷、蒙花苷等黄酮类，羽扇豆烯酮、齐墩果烷等三萜类，-谷甾醇、胡萝卜苷等甾体类，千里光内酯和挥发油等成分 对肝脏有毒的天然植物有毒成分 例 千里光 Ch.P.（2010） 【检查】阿多尼弗林碱 照高效液相色谱-质谱法（附录VI D和二部附录IX J）测定 色谱、质谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.5%甲酸溶液（793）为流动相；采用单级四极杆质谱检测器，电喷雾离子化（ESI）正离子模式下选择质荷比（m/z）为366离子进行检测理论板数按阿多尼弗林碱峰计算应不低于8000 校正因子测定 取野百合碱对照品适量，精密称定，加0.5%甲酸溶液制成每1 ml含0.2g的溶液，作为内标溶液取阿多尼弗林碱对照品适量，精密称定，加0.5%甲酸溶液制成每1 ml含0.1 g的溶液，作为对照品溶液。

精密量取对照品溶液2 ml，置5 ml量瓶中，精密加入内标溶液1 ml，加0.5%甲酸溶液至刻度，摇匀，吸取2l，注入液相色谱-质谱联用仪，计算校正因子 测定法 取本品粉末（过三号筛）约0.2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入0.5%甲酸溶液50 ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）40分钟，放冷，再称定重量，用0.5%甲酸溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2 ml，置5 ml量瓶中，精密加入内标溶液1 ml，加0.5%甲酸溶液至刻度，摇匀，吸取2l，注入液相色谱-质谱联用仪，测定，即得 本品按干燥品计算，含阿多尼弗林碱不得过0.004% 六、大孔吸附树脂有机残留物检查 大孔树脂吸附技术广泛应用于中药和天然药物有效成分的纯化与富集由于大孔吸附树脂在合成过程中，使用大量有机溶剂，包括交联剂、致孔剂等，因此大孔吸附树脂生产的药品可能带有树脂有机残留物，从而影响产品的安全性 例 三七三醇皂苷 Ch.P.（2010） 【检查】树脂残留 照残留溶剂测定法（二部附录VIII P第二法）测定 色谱条件与系统适用性试验 以键合/交联聚乙二醇为固定相的毛细管柱（柱长为30 m，内径为0.53 mm，膜厚度为1.0m）；柱温为程序升温：起始温度30，保持6分钟，再以每分钟10的速率升温至150，并保持2分钟；再以每分钟30的速率升温至180，保持2分钟。

氢火焰离子化检测器检测，检测器温度220，进样口温度200理论板数按苯乙烯峰计算，应不低于20000；正己烷、苯、甲苯、苯乙烯的分离度应大于1.5；二甲苯类峰、二乙烯苯类峰与其他峰之间的分离度应大于1.5 本品含正己烷、甲苯、二甲苯、苯乙烯、二乙基苯和二乙烯苯均不得过0.002%，苯不得过0.0002% 第四节 农药残留量的检查 对中药制剂进行农药残留量检查已成为必然，尤其是出口中药材及中药制剂则必须进行该项检查为何要对中药材及中药制剂进行农药残留量检查 中药。