酶标仪使用详解.ppt

酶标仪使用详解工作原理Ø酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测 被测物的吸光值在特定波长下测定每一 种物质都有其特定的波长，在此波长下， 此物质能够吸收最多的光能量如果选择 其它的波长段，就会造成检测结果的不准 确因此，在测定检测物时，我们选择特 定的波长进行检测，称为测量波长注意 这里提出了两个关键概念OD值（吸光值） 和波长常用酶标仪Ø雷勃-MK3常用酶标仪Ø科华ST-360酶标板Ø96孔透明酶标板酶标仪基础设置Ø增加酶标仪仪器设置内容Ø仪器类别 Ø必须选择“酶标仪” Ø酶标仪设置 Ø波长 Ø振板频率 Ø振板时间 Ø进板方式 Ø空白形式酶标仪项目设置项目设置Ø项目性质 Ø必须选择”酶标仪目” Ø阳性公式 Ø阳性公式: OD=NC*2.5 Ø弱阳性公式 Ø阳性公式: OD= NC*2.1 ØCutOff公式 Ø NC*2.1控制界面Ø酶标板酶标板Ø组成 Ø酶标板是由12*8个孔组成的，每一个孔可以理 解为一个标本每一板中还需要设置和阳性公 式相关的孔阳性、阴性、空白等 Ø酶标项目 Ø每一行可以设置一个酶标项目（下拉方式）， 可以设置为单板单项和单板多项酶标板Ø每一个孔代表可以设置的含意 Ø普通(纯数字) = 标本号 Ø空白孔=(BC+N) Ø阴性孔=(NC+N) Ø阳性孔=(PC+N) Ø质控孔=(QC+N)酶标板Ø空白对照=(BC1+BC2+BC3…)/N • 阴性对照=(NC1+NC2+NC3…)/N • 阳性对照=(PC1+PC2+PC3…)/N • Cutoff=Cutoff公值的计算值酶标板Ø模板 Ø可以把当前设置好的酶标板保存为模板，供以 后使用。

Ø标本号设置 Ø可以使用拖动的方式增加标本号，标本号生成 可以分为横行和纵向酶标板Ø酶标板的显示内容 Ø样本编号=标本号 Ø原始OD值=仪器传回来没有减去空白的OD值 （OD值=吸光度值） ØOD值=根据参数来判断是否要减去空白孔的值 （BC） Ø定性值=根据公式计算出孔是阴性、阳性、弱 阳性双波长测量介绍Ø使用参考波长过滤一些环境因素（样本的 浊度、干扰色、噪音、漂移、电压）,使结 果更稳定 Ø使用双波长测量是不需要设置空白孔的 Ø对一些比较敏感的项目最好使用双波长如 HIV双波长测量Ø只需要设置了参考波长程序就认为当前要 使用双波长进行测量 Ø难点： Ø怎样确认当前波片的波长酶标板项目设置Ø单板单项 Ø一个酶标标只有一个项目，常用于标本量比较 大的时候Ø单板多项 Ø一块板可以做多个项目，注意项目是横向排列 的而且每个项目都必须设置公式中需要的阴性 阳性孔工作流程练习Ø按要求建立酶标项目见练习文档提纲 十）。