黄连中小檗碱的提取.docx

黄连中小檗碱的提取、精制、鉴定及含量测定黄连为毛茛科黄连属植物黄连(coptis chinensis Eraneh)、三角叶黄连 (coptis deltoidca C. Ycheng et Hsiao)或云连(coptiteetoidesC.Y.cheng) 的干燥根茎黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小案碱 (berberine)、掌叶防己碱(palmatine)、黄连碱(jatrorrhizine)等其 中小案碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中小案碱有 很强的抗菌作用，己广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小 案碱相似一、 目的要求1、 从黄连中提取小案碱的原理和方法，以及小案碱精制方法2、 学习渗漉法提取天然产物的方法3、 熟悉握小案碱的化学性质和鉴定方法二、 实验原理小案碱为黄色针状结晶，mp为145°C，游离的小案碱能缓缓溶于水(1： 20) 及乙醇中(1： 100)，易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷 等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐盐酸盐为1： 500,枸橼 酸盐1： 125,酸性硫酸盐1： 100,硫酸盐1： 30,但在热水中都比较容易溶解。

小案碱常以季铵碱形式存在，碱性强(pka11.53)，能溶于水中，其水溶液 有三种互变形式季铵式(红棕色)醇式(黄色)醛式(黄色)小檗碱（黄连素）掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、 乙醚等有机溶剂盐酸掌叶防己碱为黄色针状结晶，并有强烈的黄色荧光易溶 于热水或热乙醇，在冷水中的溶解度也比盐酸小檗碱大掌叶防己碱本实验是利用小檗碱属于季铵碱，其游离型在水中的溶解度最大而它们的 盐类以含氧酸盐在水中溶解度较大，不含氧酸盐难溶于水，其盐酸盐在水中溶解 度则更小利用此性质结合盐析法，可从黄连中提取小檗碱再利用两种生物碱 极性不同，采用柱色谱分离三、 仪器与试剂1、 试剂：黄连粗粉50g，2%硫酸溶液，苯，乙酸乙酯，甲醇，异丙醇，氨水， 饱和石灰水，氯化钠2、 仪器：粉碎机，渗漉筒，烧杯，硅胶G-CMA-Na薄层板，真空干燥箱四、 实验步骤：1、提取分离黄连粗粉50g加0.3%H SO 500mK超过药材0.2cm），浸渍20分 钟， 2 4装入渗漉筒，30分钟，滤过滤液］加石灰乳调PH值至中性放置10分钟，抽滤 滤液加HCl调PH2〜3，加滤液体积10%的NaCl， I放置过夜，抽滤盐酸小檗碱粗品2、精制盐酸小檗碱粗品［加饱和石灰水，趁热过滤滤液”加盐酸调ph至1-2,冷却。

放置，析晶 析出大量黄色沉淀,,常压过滤沉淀v蒸馏水洗结晶，过滤，三次沉淀］80C以下干燥1小时称重，计算提取率（精制的盐酸小檗碱）3、鉴定检识实验（1） 取自制精制盐酸小檗碱0.05g溶于50ml热水中，加入10%NaOH溶液2ml， 混合均匀后，于水浴上加热至50°C，加入丙酮5ml，放置，即有柠檬色丙酮小檗 碱结晶析出抽滤，水洗后，干燥，测mp2） 取自制精制盐酸小檗碱少许，加稀盐酸2ml待溶解后，加漂白粉少许， 即显樱红色3） 取自制精制盐酸小檗碱少许，加水1ml待溶解后，加浓硝酸1〜2滴，即 产生绿色硝酸小檗碱沉淀4）取自制精制盐酸小檗碱少许，加水1ml待溶解后，加锌粉少许，再分数 次加入浓硫酸数滴，每隔10min加1次，观察其黄色是否消退薄层色谱检识吸附剂：硅胶G-CMC-Na薄层板对照品：盐酸小檗碱甲醇溶液样品：不同色带的甲醇溶液展开剂：CHCl3-MeOH-冰醋酸（7： 1： 2）检视：先在紫外灯光（365nm）下观察荧光，再喷改良碘化铋钾试剂记录图谱并计算Rf值五、 注意事项1. 渗漉速度不可太快；2. 精制时加饱和石灰水后要趁热过滤六、 思考题1、 提取分离过程中加NaCl起什么作用？2、 根据盐酸小檗碱的性质，还可以用其他方法进行提取与分离？3、 小檗碱属于哪一类生物碱，可以用盐酸水溶液提取吗？。