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实用医技杂志 2009 年 12 月第 16 卷第 12 期Journal of Practical Medical Techniques，December 2009，Vol. 16，No. 12 介绍大鼠各组织器官石蜡切片制作法 山西省中医院 （030012 ）高宝红 在科研工作中， 实验标本多为动物模型， 如大鼠、 小鼠及 兔等大小鼠及兔的组织脏器较人体组织脏器稚嫩柔软， 水 分含量多因此在制作组织切片的过程中， 必须根据其组织 结构特点， 采用不同于人体组织的处理方法， 注意各种动物 组织在固定、 脱水、 透明浸蜡、 包埋、 切片的每个程序中选择 最佳的时间方案， 才能避免组织块变脆， 切片易碎、 有裂隙， 染色时易脱片等常见不良后果的发生， 保证高质量石蜡切片 一次成功本研究就如何制作优质的大鼠各组织器官石蜡切 片作了总结， 现从固定、 取材、 脱水、 透明、 浸蜡、 包埋到切片、 烤片、 脱蜡、 染色的经验介绍如下 1如何制作优质大鼠各器官石蜡切片 1.1标本： 大鼠各个脏器———心、 肝、 脾、 肺、 肾、 大脑、 脊髓、 胃肠、 垂体、 胸腺、 淋巴结、 肾上腺、 卵巢、 睾丸、 子宫、 膀胱、 附 睾。

1.2固定液： 中性甲醛溶液， 固定时间为 24 h 1.3取材： 心脏： 最大纵断面取 1 块， 厚度为 2 mm； 肝脏： 右 叶纵断面取 1 块， 厚度为 2 mm； 脾脏： 纵断面取 1 块， 厚度为 2 mm； 肺脏： 纵断面取 1 块， 厚度为 2 mm； 肾脏： 最大面剖开 取一半， 包括皮质、 髓质和肾盂； 大脑： 最大面剖开取一半； 脊 髓： 横断面剖开取 1 块， 厚度 2~3 mm； 胃： 沿大弯侧剪开， 纵 切一长条， 长 1 cm， 宽 2 mm； 肠： 横断面切取一段， 约 2 mm； 垂体： 全包； 胸腺： 全包； 淋巴结： 全包； 肾上腺： 全包； 卵巢： 全 包； 子宫： 横断面剖开取一段， 厚度 2 mm； 睾丸： 最大面剖开， 取半； 附睾： 纵断面剖开取半； 膀胱： 剖开取半 1.4各个脏器的脱水透明浸蜡时间： 见第 1024 页表 1 1.5包埋： 胃肠、 子宫、 膀胱立埋， 其余脏器平埋， 蜡温为 65~ 70 ℃ 1.6切片： 厚度 4 μm， 摊片水温 56 ℃左右， 选取无皱折的 4 片 2动物组织石蜡切片苏木素-伊红 （HE ） 染色切片置 70 ℃的 烤箱中 30 min 入二甲苯脱蜡 20 min； 入梯度乙醇 100%→95%→85% →75%， 自来水冲洗 2 min； 入苏木精 30 min， 取出自来水冲 洗 2 min； 入盐酸乙醇分化 5 s， 自来水冲洗 2 min； 入伊红 5 s， 自来水冲洗 2 min； 入梯度乙醇 75%→85%→95%Ⅰ→ 95%Ⅱ→100%→100%； 入二甲苯Ⅰ→二甲苯Ⅱ； 中性树 胶封片。

3石蜡切片中注意事项 广泛接触宫颈表面， 特别是宫颈管上皮细胞更不易取得TCT 使用软质塑料宫颈刷， 可更广泛接触宫颈表层及宫颈管， 易于 取得广泛而更有代表性的标本②巴氏涂片在制片时易丢失 较多量细胞 ③巴氏涂片质量不易控制， 易造成涂片过厚或过 薄， 细胞重叠、 退变， 对取材医生经验有更高要求 TCT 由自动 细胞制片机系统制片， 制成的涂片较薄、 较均匀④巴氏涂片 为原始标本， 易带有白细胞、 红细胞、 黏液及滴虫、 真菌、 细菌 等病原体，造成涂片背景不清晰，可能对阅片造成一定的影 响 TCT 涂片经细胞保存液和滤膜的过滤处理， 洗脱大部分白 细胞、 红细胞、 黏液及滴虫、 真菌、 细菌等病原体成分， 制成的 涂片背景清晰、 成分单一， 易于阅片这是 TCT 比巴氏涂片较 为优越的因素 子宫颈液基薄层细胞学新技术及 TBS 分类法对宫颈病 变的诊断率提高了 31.3%，对低度鳞状上皮以上病变的检出 率提高了 65%[7] 本研究，所检查的 5 322 例患者的结果中细胞学诊断为 鳞癌有 3 例， 病理活检均为鳞癌， 符合率为 100%； 11 例 HSIL 中： CINⅢ9 例， 原位癌 2 例， 符合率为 100%； 19 例 LSIL 活检 均为 CIN Ⅰ符合率为 100%。

可见， TCT 对宫颈癌和 CIN 的阳 性检出率高， 尤其对 CIN Ⅱ以上的危害性较大的宫颈癌显示 极高的阳性符合率， 假阳性率低本组资料还表明 TCT 除对 癌前病变和癌有较高的诊断率外， 对各种微生物， 如滴虫、 霉 菌、 细菌和 HPV 感染等也可提供直接诊断或提示诊断， 对上 述疾病的及时治疗有很大帮助 积极推广液基细胞技术及采用 TBS 诊断分级标准作为 妇女每年一次的常规普查， 能及早发现宫颈早期病变， 是防止 宫颈癌发生的关键 参 考 文 献 1刘树范. 宫颈及阴道细胞病理学诊断报告建议. 中华妇产科杂 志，1998，33 （5 ） ：316-318. 2郎景和. 迎接子宫颈癌预防的全球挑战与机遇. 中华妇女杂 志，2002，37 （3 ） : 1-2. 3赵方辉，戎寿德，乔友林. 宫颈癌及其癌前病变筛查方法现状. 中国医学科学院报，2001，23 （6 ） ：638-641. 4刘植华，李悦. 子宫颈癌的早期诊断. 中国实用妇科和产科杂 志，2004，2007 （7 ） ：435-436. 5Frable WJ, Austin RM, Greening SE, et al. Medicolegal affairs. International Academy of Cytology Task Force summary. Diagnos－ tic cytology towards the 21st century: an jnternational expert con－ ference and tutorial. Acta Cytol, 1998, 42 （1 ） : 76-119. 6Joseph MG, Cragg F, Wright VC, et al. Cyto-histological corre－ lates in a colposcopic clinic: a 1-year prospective study. Diagn Cytopathol,1991, 7 （5 ） : 477-481. 7zur Hausen H. Papillomavirus infections--a major cause of hu－ man cancers. Biochim Biophys Acta,1996, 1288 （2 ） : F55-78. （收稿日期： 2009-10-16 ） 1023·· 实用医技杂志 2009 年 12 月第 16 卷第 12 期Journal of Practical Medical Techniques，December 2009，Vol. 16，No. 12 · 作者 · 编者 · 读者 · 关于中英文摘要的书写要求 摘要是以提供文献内容梗概为目的， 不加评论和解释， 简明确切地记述文献重要内容的短文。

摘要应具 有自明性和独立性， 并拥有与一次文献同等量的主要信息， 即不阅读全文就能获得必要的信息通常中文文 摘以不超过 400 字为宜， 应以第三人称的语气书写， 不要使用 “本文” 、“作者” 、“我们” 等作为陈述的主语 摘要一律采用四要素式， 即： ①目的 （objective ） ： 简要说明研究的目的， 说明提出问题的缘由， 表明研究的 范围和重要性②方法 （methods ） ： 简要说明研究课题的基本设计， 使用了什么材料和方法， 如何分组对照， 研 究范围及精确程度， 数据是如何取得的， 经何种统计学方法处理③结果 （results ） ： 简要列出研究主要结果和 数据， 有什么新发现， 说明其价值及局限 叙述要具体、 准确 并需给出结果的置信值、 统计学显著性检验的确 切值 ④结论 （conclusion ） ： 简要说明经验证、 论证取得的正确观点其理论价值或应用价值， 是否可推荐或推广 等英文摘要的内容与中文摘要的内容大体一致， 英文摘要四要素的小标题应根据实际情况确定单复数 在英文摘要内容前还需附英文文题、 作者单位 （包括邮政编码 ） 及作者姓名中、 英文摘要具体书写格式 同前。

敬请广大读者、 作者周知， 并遵照此要求投稿， 力求杂志更加规范化、 标准化 本刊编辑部 表 1各个脏器的脱水透明浸蜡时间min 脏器75%乙醇85%乙醇95%乙醇95%乙醇100%乙醇100%乙醇二甲苯Ⅰ二甲苯Ⅱ苯蜡蜡Ⅰ蜡Ⅱ 心2020209020202020202020 肝2020209020202020202020 脾1515159015151515151515 肺3030309020202020202020 肾2020209015152020202020 大脑30303042030303030303030 脊髓2020209020202020202020 胃2020209020202020202020 肠202020902020220202020 垂体555905555555 胸腺1010109010101010101010 淋巴结1010109010101010101010 肾上腺1515159015151515151515 卵巢20202042020202025252525 睾丸20202042020202025252525 膀胱2020209020202020202020 子宫2020209020202020202020 附睾20202042020202525303030 固定时间不宜过长， 最长不得超过 1 周， 过长则使组织变 硬、 脱水、 浸蜡差， 不易制作出优质切片， 且在染色中易出现 细胞核、 质着色较浅， 轮廓不清的现象。

组织脱水透明和浸蜡的时间要严格控制，时间过长会造 成组织过硬变脆； 时间不充足， 组织块脱水不彻底， 则出现组 织块软， 既不好切片， 又不好着色 切片刀要锋利， 否则易造成裂痕、 破碎不完整现象 组织切片机各个零件和螺丝应旋紧， 否则将会产生震动， 以致切片厚薄不均 （收稿日期： 2009-08-27 ） 1024·· 。