
市售高丽参与中国红参的质量评价【临床医学论文】.doc
5页临床医学论文-市售高丽参与中国红参的质量评价作者:张语迟,王淑敏,宋凤瑞,刘志强【摘要】 目的:比较市售高丽参与中国红参中人参皂苷的含量,初步作出二者的质量评价方法:采用比色法对市售高丽参与中国红参进行总皂苷含量测定,采用高效液相色谱法对高丽参与中国红参中主要单体皂苷进行测定比较结果:中国红参总皂苷和主要的单体皂苷含量均高于韩国高丽参,而且红参中含有高丽参中不存在的单体皂苷 Rg3、20S-Rg3结论:市售中国红参质量高于市售高丽参 【关键词】 红参;高丽参;比色法;高效液相色谱法高丽参为韩国人参用韩国独有的技术加工而成的人参制品,具有色泽鲜艳、柔软美观、具人参特有香气的特点[1]在市场上高丽参的售价往往是中国红参的几倍甚至十几倍[2]为考察两者之间的质量差异,我们对两种人参总皂苷和主要单体皂苷进行了分析比较1 实验部分1.1 仪器与材料 Varian 紫外可见分光光度计(美国 VARIAN 公司澳大利亚分公司);Waters600 半制备型高效液相系统,ELSD 2000 检测器(美国Alltech 公司);电子分析天平:SanoriusBSl10S(北京赛多利斯有限公司,一万分之一);KQ2500E 型医用数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);醋酸、乙腈为色谱纯,购于 Fisher 试剂公司;其它试剂为分析纯;水为超纯水(1812MΩ·cm);红参与高丽参对照药材均购于中国药品生物制品检定所。
市售红参与高丽参均购于吉林大药房人参皂苷标准品Rg1、Re、Rf、Rb1、Rb2、Rc、Rd、Rg3 由吉林大学药学院提供1.2 实验方法与结果1.2.1 标准曲线的制备 精密称取人参皂苷 Re 标准品 10.01 mg,定容于10 mL 容量瓶中,制成每 1 mL 含 1.001 mg 的对照品溶液分别精密移取对照品溶液 30、60、90、120、150 μl,分别加入干燥具塞的试管中,水浴挥干溶剂,各加 5%香草醛冰醋酸溶液 0.2 mL,高氯酸 0.8 mL 于 60℃恒温水浴加热 15 min,取出,流水冷却 2 min,加冰醋酸 5 mL,摇匀,随行空白,于 550nm 处测定吸光度值以吸光度值 A 为纵坐标,浓度 c 为横坐标,得出标准曲线为:A=0.11693c-0.03604,r=0.9998,样品在 0.1-10 mg/mL 范围内线性关系良好1.2.2 样品溶液的制备 分别取红参、高丽参对照药材和样品粉末 2 g,分别置于索氏提取器中,用三氯甲烷连续回流 3 h 脱脂,脱脂后药渣置于 100 mL 锥形瓶中,加入水饱和正丁醇 30 mL,超声提取 1 h(30℃、500W),滤过,滤液蒸干,残渣以甲醇+4 滴吡啶定容于 10 mL 容量瓶中,备用。
1.2.3 样品含量测定 取供试品 200μl 3 份,分别置于干燥具塞的试管中,水浴挥干, 加入 5%香草醛冰醋酸溶液 0.2 mL,高氯酸 0.8 mL60℃水浴加热 15 min,取出后流水冷却 2 min,加冰醋酸 5 mL,摇匀,于 550nm 处测定吸光度,根据标准曲线计算人参总皂苷含量,结果红参对照药材 3.052%,高丽参对照药材 2.891%,市售红参 2.651%,市售高丽参 2.058%1.3 高效液相色谱法测定高丽参和红参中人参单体皂苷含量1.3.1 高效液相条件 美国 Waters 600LC 系统,Alltech 2000 型 ELSD检测器,检测器条件为 Temp:110℃;GasFlow:2.1L/min;Gain:1;Impactor:OffAgilent 1100 Series 自动进样器;CapcellPakC18 色谱柱(4.6×250 mm,5 μm)(迪马),柱温 35℃;采用二元线性梯度洗脱:流动相:(A)0.2%冰醋酸水溶液;(B)乙腈流动相梯度组成:0-2 min,A:B 为 75%:B25%;2-50 min,A75%-50%,B 25-50%;50-80 min,A 50%-0%,B 50%-100%。
流速为 0.5 mL/min样品进样量为 10 μl[4]色谱图见图 1 和图 2图 1 市售高丽参高效液相色谱图 (略) 图 2 市售红参高效液相色谱图(略)1:Rg1 2:Re 3:Rf 4:Rb1 5:Rc 6:Rb2 7:Rd 8:Ro 9:Rg3 10:20s-Rg31.3.2 标准曲线的制备 分别精密称取人参皂苷 Rb11.21 mg、Rb21.45 mg、Rc1.36 mg、Rd 1.13 mg、Re 0.94 mg、Rf1.03 mg、Rg11.08 mg、Rg30.98 mg,将上述 8 种标准品用甲醇定溶于 2 mL 容量瓶中,摇匀,待用分别取上述标准品溶液 10、12、14、16、18μl 注入色谱仪,以峰面积的自然对数值为纵坐标,进样量为横坐标绘制标准曲线Re+Rg1:y=1.1489x+12.813,r=0.9994;Rf:y=0.6392x+13.82,r=0.9989;Rb1:y=1.3349x+12.743,r=0.9993;Rb2:y=1.54x+12.272,r=0.9993;Rc:y=0.8734x+13.481,r=0.9993;Rd:y=1.6513x+11.971,r=0.9995;Rg3:y=1.210x+11.012,r=0.9994。
1.3.3 样品溶液的制备 分别取红参对照药材、市售红参、高丽参对照药材、市售高丽参样品 2 g,分别置于索氏提取器中,用三氯甲烷连续回流 3 h 脱脂,脱脂后药渣置于 100 mL 锥形瓶中,加入水饱和正丁醇 30 mL,超声提取 1 h(30℃、500W),滤过,滤液蒸干,残渣以甲醇+4 滴吡啶定容于 10 mL 容量瓶中,备用1.3.4 样品含量测定 将红参对照药材、市售红参、高丽参对照药材、市售高丽参样品过 0.4um 微孔滤膜后注入 HPLC-ELSD 系统,测定高丽参与红参对照品和样品单体皂苷含量见表 1表 1 高丽参、红参单体皂苷含量(略)2 小结与讨论实验结果表明,市售红参中总皂苷含量比高丽参中总皂苷含量高高丽参对照药材中总皂苷含量稍高,单体皂苷含量测定高丽参中只有 Re 与 Rg1 的含量稍高于中国红参,f、Rb1 含量大致相同通过文献[5]得知 8、9、10 号色谱峰分别为人参皂苷 Ro、Rg3、20S-Rg3,在图 1 与图 2 中我们可以明显看出红参要高于高丽参,其它几种常见皂苷高丽参均比中国红参少所以,从化学成分含量角度看高丽参不如中国人参红参参考文献】[1]谢正理,曾碧珊.高丽参的真伪鉴定[J].中国中医药信息杂志,1995,2(10):13-14.[2]曹志强,金 慧,梁永寿,等.高丽红参加工方法的研究[J].人参研究,2002,14(4):11-14.[3]国家药典委员会编.中华人民共和国药典[M].北京:化学工业出版社,2005:105.[4]李 丽,刘春明,吴 巍,等.高效液相色谱-电喷雾质谱联用法测定人参和西洋参的皂苷类成分[J].分析化学,2005,33(8):1087-1090.[5]张 旭.人参的配伍及物质基础研究[D].长春:中国科学院长春应用化学研究所,2006:8.。
