AS-DNCE染色SOP.pdf

检验科质量管理记录：HYSZXYY ∕JYK 实验室 : 临床室责任部门：检验科氯化醋酸 AS-D萘酚酯酶（ AS-DNCE ） 染色标准操作操作规程编号: HYSZXYY/JYK版序：C/1编制：肖启国审核：肖启国批准：卿文衡实施：2011-01-011目的规范氯化醋酸AS-D萘酚酯酶（ AS-DNCE ）染色的操作，保证操作安全可靠运行，为临床提供准确可靠的结果2SOP程序编写依据依据 ISO15189：2003《医学实验室—质量和能力的专用要求》《氯化醋酸AS-D萘酚酯酶（ AS-DNCE ）染色液说明书》《全国临床检验操作规程》（第 3 版）3SOP变动程序本操作程序的变动，可由其使用的工作人员提出，报经专业主管和科主任签字批准，方可变更4适用范围适用于血细胞内氯化醋酸AS-D萘酚酯酶的染色测定，用于辅助诊断5. 实验原理血细胞内的氯化醋酸AS-D 萘酚酯酶（ AS-DNCE ）将氯化醋酸AS-D萘酚水解，产生萘酚AS-D，后者与重氮剂偶联形成有色沉淀物，沉淀物的显色深浅与AS-DNCE 活性成正比。

6. 标本采集6.1 病人准备：了解病人是否对局麻药有过敏史凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病，穿刺部位有炎症或有畸形，晚期妊娠妇女作骨髓穿刺时要慎重6.2 标本种类：新鲜抽取的骨髓穿刺液6.3 标本采集要求6.3.1 高压消毒的穿刺针，一次性无菌手套和抽取骨髓液的无菌注射器6.3.2 临床上首选穿刺部位为髂后上棘；翻身困难， 需多部位穿刺患者可选择髂前上棘为穿刺部位小于3 岁的小儿还可选择胫骨头内侧为穿刺部位7. 标本储存： 滴加固定液盖满血膜（4℃） 30 秒，水洗待干室温避光保存8. 标本运输 ：室温运输9. 标本要求 ：1. 新鲜涂片2.若样本采集后不能及时测定，可先用固定液处理，可保存数天10. 试剂10.1 试剂名称：氯化醋酸AS-D 萘酚酯酶（ AS-DNCE ）染色试剂10.2 试剂生产厂家：上海太阳生物技术公司10.3 试剂组成检验科质量管理记录：HYSZXYY ∕JYK 实验室 : 临床室责任部门：检验科氯化醋酸 AS-D萘酚酯酶（ AS-DNCE ） 染色标准操作操作规程编号: HYSZXYY/JYK版序：C/1编制：肖启国审核：肖启国批准：卿文衡实施：2011-01-01试剂 1：AS-DNCE 染色固定液：含丙酮，甲醛等。

2℃-8 ℃避光保存，有效期1 年试剂 2：AS-DNCE 染色Ⅰ液：含氯化醋酸AS-D萘酚酯钠盐等2℃-8 ℃避光保存，有效期 1 年试剂 3：AS-DNCE 染色Ⅱ液：含盐酸副品红等2℃-8℃避光保存，有效期1 年试剂 4：AS-DNCE 染色Ⅲ液：含磷酸盐缓冲液等2℃-8 ℃避光保存，有效期1 年试剂 5：苏木素复染液：含苏木精等2℃ -8℃避光保存，有效期1 年11. 操作步骤11.1 新鲜涂片滴加固定液5-8 滴，盖满血膜即可，（4℃） 30 秒，水洗11.2 将Ⅰ液、 Ⅱ液置入Ⅲ液中溶解混合成为基质液将涂片置入后， 37℃放置 30 分钟，然后连缸流水冲洗数分钟11.3 苏木素复染1～2 分钟，水洗待干，镜检12. 结果判断12.1 阴性：胞质内无沉淀物（无色）12.2 阳性：胞质内出现红色沉淀物13. 临床意义1.此酶通常存在于中性粒细胞浆内，为粒细胞特异性酯酶，由此可鉴别粒细胞和单核细胞等2.在白血病细胞的亚型分型中的应用：阳性提示： FAB 中的 M1、M2 、M3、 M4 可能3.鉴别嗜碱性粒细胞与肥大细胞前者阴性，后者阳性14. 操作性能 ：快速简便，特异性强，灵敏度高。

15. 注意事项：15.1 基质液配置时可能出现混浊，但不影响染色效果；配置后及时应用，以免失效或降低阳性强度15.2 基质液为一次性使用，可同时放置1-8 张涂片（即1-8 份样本），配置后不能反复应用15.3 每次操作时均应设阴、阳性对照。