游离三碘甲状腺原氨酸测定sop.doc

文件名称：游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）测定 SOP 版次： （共 页）文件编号： 批准者：编写者： 审核者： 生效日期：1.目的 规范游离三碘甲状腺氨酸（FT3）测定程序，确保检测结果的准确性2.测定方法 竞争性结合酶免疫检验3. 测定原理 Access Free T3 测定是一种竞争结合免疫法测定，将样本添加到含碱性磷酸酶结合物抗T3 单克隆抗体的反应管中在温育过程中，样本中的游离T3 与抗T3 抗体发生反应然后将包被着链霉亲和素和生物素化T3 相似物的微粒添加到混合物中抗T3 抗体上的未结合位点通过T3 相似物与微粒相结合在反应管内温育完成后，结合在固相上的物质将置于一个磁场内被吸住，而未结合的物质被冲洗除去然后，将化学发光底物 Lumi-Phos* 530添加到反应管内，然后由照度计对反应中所产生的光进行测量所产生光的量与样本内游离T3 的浓度成反比样本内分析物的量由所储存的多点校准曲线来确定4.性能参数无须输入操作参数，仪器根据预设的分析项目参数和试剂条码的信息自动进行分析标本量 125 µL4.1 精密度：批内 CV ＜12.5％4.2 分析范围：0.3 ~ 30.0 pg/ml (0.4 ~ 50.0 pmol/L ) 。

4.3 灵敏度：0.3 pg/ml4.4 方法的有限性及干扰因素：胆红素 10mg/L、TG 18 g/L、肝素、Hb 2.5 g/L 在检测允许的精密度范围内对结果没有影响5.原始样本系统5.1 总则：符合本室《检验标本采集手册》 5.2 常规静脉采血约 2ml，不抗凝，置普通试管中或采用含分离胶的真空采血管5.3 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符5.4 急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间5.5 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收5.6 标本拒收标准5.6.1 标本量过少5.6.2 检验申请单上姓名或条码与标本上姓名或条码不一致5.6.3 检验项目与标本类型不符，或抗凝剂不符5.6.4 标本送检时已放置时间过久5.6.5 输液时在同侧血管抽血5.6.6 标本严重容血或脂血5.6.7 无标本（空管）5.6.8 条码包含信息不全（如无采样时间等） 6.标本保存6.1 接收标本后在 30min 内将标本离心分离出血清, 避免溶血6.2 标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定 8h，普通冰箱中（2～8℃）稳定 48h。

需较长时间保存应将血清存放于-20℃冰冻标本仅可冻融一次为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过 1d 的标本均密闭保存6.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，置 2～8℃冰箱内保存 7d7.设备和试剂7.1 设备： 美国 Beckman Coulter 公司 DXI 800 免疫分析系统7.2 试剂： ACCESS 专用 FT3 测定试剂盒，由美国 Beckman Coulter 公司出品，产品号 33830未打开的试剂包保存于 2～8℃在效期内稳定，不可冻存开启的试剂包载入系统中可使用 28d7.3 试剂盒组分7.3.1 磁性微粒子：包被了链亲和素的磁性微粒子，和 Tris 缓冲液7.3.2 液体试剂：鼠抗 T3 单克隆抗体-ALP 结合物和 Tris 缓冲液7.3.3　结合于生物素上的 T3 类似物，Tris 缓冲液7.3.4　0.4N NaOH，和 0.4N HCl7.3.5　试剂包即开即用，无须特殊准备7.4 其他试剂与用品7.4.1 化学发光底物：ACCESS 的通用发光剂底物液，Cat. No. 819067.4.2 清洗缓冲液、反应杯等8.校准程序8.1 校准品: 美国Beckman Coulter公司提供的FT3配套校准液需贮2～8℃。

5个浓度有校准卡片8.2 校准类型和校准点数目：非线性模式，6个校准点8.3 校准周期：在同一批号试剂的使用效期内校准曲线有效，但在间隔14d 后需要重新校准每当：①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后，进行一次校准8.4 校准液重建方法：液体试剂，直接使用9.质量控制程序9.1 质控品：采用美国 Beckman Coulter 公司提供配套的质控品9.2 质控液准备9.2.1 小心打开瓶盖，避免内容物的任何损失9.2.2 在 20～25℃的室温下，准确吸取 5ml 蒸流水复容 1 瓶质控血清9.2.3 盖上橡皮塞，拧紧瓶盖，使用前避光 30 分钟9.2.4 轻轻旋转，确保所有的冻干物完全溶解9.2.5 勿摇晃小瓶9.2.6 分装致离心管中，每管 0.5ml -20℃保存9.3　质控品测定：在每一批标本中测定质控血清一次9.4 质控规则：采用 L-J 质控图，以±3 s 为失控限标准差由本室实验数据得出9.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测10.检验程序步骤装载试剂 → 进行校准 → 进行质控 → 输入标本检测项目 → 加载标本 →标本测定 → 结果复核 → 报告11. 结果计算仪器根据校准曲线自动给出每个标本测定结果。

测定结果单位以 pg/mL 或pmol/L 表示换算公式：pmol/L＝ pg/ml×1.53612. 检验结果的报告及范围12.1 结果的报告12.1.1 结果经审核后，确认准确无误后发出报告12.1.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息12.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出11.2 报告范围0.3 ~ 30.0 pg/ml (0.4 ~ 50.0 pmol/L )，超过此范围的标本应当报告为>50.0 pmol/L对高值标本不作稀释后重测，因为稀释会干扰标本中游离激素和总激素之间的平衡13. 参考范围参考值（血清）： 5.8 ～9.2pg/ml (3.8～6 pmol/L )14 临床意义14.1　 FT3 是血液中主要的具有生理活性的甲状腺素，甲状腺素结合蛋白浓度正常时，FT3 水平与 TT3 相关14.2　当甲状腺素结合蛋白或血清白蛋白的浓度低下时，如 TT3 的浓度有改变，测定 FT3 就很有意义大约有 5%甲亢患者有单独的 FT3 增高14.3 当甲状腺机能亢进时，FT3 浓度水平通常升高，这是区分甲状腺机能正常与中毒的界限，也是确认甲状腺机能亢进症及对其的治疗监测的良好指标。

14.4 当甲状腺机能减退时，FT3 浓度水平有减低趋势，但是这种减低并不能为诊断提供充分明确的信息15 结果审核以及与相关项目的联系15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核15.2 审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在报告单的审核者处签名15.3 相关项目：审核与其他相关甲状腺激素等的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因16　有关引用程序与文件16.1 DXI 800 自动发光免疫分析仪仪器标准操作规程16.2　免疫检验室内质控标准操作程序16.3　检验结果审核程序16.4　标本送检和接收程序17　参考文献17.1 陆永绥，张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社, 2004.17.2 Beckman Coulter 游离三碘甲状腺氨酸（FT3）测定试剂盒说明书17.3 叶应妩，王毓三，申子瑜主编. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南大学出版社，2006. 18 本 SOP 变动程序任何一位使用本 SOP 的工作人员如提出对本 SOP 改动意见，或本测定项目的方法、试剂有变动的情况，可以对本 SOP 作出改动，但必须先报经专业主管和科主任批准。

19 本 SOP 涉及的记录与表单19.1 试剂装载记录表19.2 质控记录19.3 失控及失控处理记录19.4 检验结果审校核记录。