DNA的粗提取与鉴定导学案自用.docx

精品资料————欢迎下载《课题 1 DNA 的粗提取与鉴定》导学案〖学习目标〗 1. 明白 DNA的物理、化学性质；（重点）2. 懂得 DNA粗提取与鉴定的原理；（重点）【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学沟通和争辩,完成以下问题,并初步巩固；一、基础学问【活动 1】阅读教材 P54“基础学问”,争辩并回答以下问题： 1．（记忆）提取生物大分子的基本思路是利用它们的 的不同进行分别；2．（记忆） DNA的溶解性特点：DNA在 中溶解度不同； DNA不溶于 而蛋白质溶于 ；【摸索 1】据图 5－ 1 分析：DNA在不同浓度 NaCl 溶液中溶解度有何特点？ 要使 DNA溶解,需要使用什么浓度？要使 DNA析出,又需要使用什么浓度？【摸索 2】利用 DNA不溶于 的原理,可以达到 目的；3．（记忆） DNA的耐受性特点： 能分解蛋白质而不能分解 DNA；在 ℃时蛋白质变性沉淀而 DNA分子不变性；能与蛋白质结合瓦解细胞膜而不破坏 DNA分子；4．（记忆） DNA的鉴定原理 ：当鉴定提取出的物质是否是 DNA时,需要使用 进行鉴定；在 条件下,该试剂与 DNA反应,显现 ；二、试验设计：【活动 2】阅读教材 P55“试验设计”,争辩并回答以下问题： 1．（记忆）试验材料的选取：选取材料时应本着 、 、 的原就；【摸索 3】你认为教材供应的材料中 不适合提取 DNA； 2．（记忆）破裂细胞,猎取含 DNA的滤液：鸡血：向鸡血细胞液中加入确定量 并玻棒搅拌,用 过滤后,收集 ；洋葱：向研钵中加入确定量 和 ,搅拌研磨,用 过滤后,收集 ；【摸索 4】在以上试验中,蒸馏水的作用是 ,洗涤剂的作用是 ,食盐的作用是 ；3．（学会）去除滤液中的杂质：方案一： 30mL滤液 → 加 NaCl 使 DNA溶解 → 过滤得滤液 → 加蒸馏水使 DNA析出→ 过滤得过滤物 → 放到 2mol/LNaCl 溶液中溶解 → DNA－ NaCl 溶解液方案二： 30mL滤液→加嫩肉粉（木瓜蛋白酶）→静置 10 分钟→得 DNA滤液方案三： 30mL滤液→ ℃处理→过滤得 DNA滤液【摸索 5】以上三个方案的原理分别是什么？方案一原理： ；方案二原理： ；方案三原理： ；【摸索 6】方案一：“加 NaCl 使 DNA溶解→过滤得滤液”的目的是除去 〔 可溶、不溶 〕 于 NaCl 溶液中的细胞杂质“加蒸馏水使 DNA析出→过滤得过滤物” 的目的是除去 〔 可溶、不溶 〕 于 NaCl 溶液中的细胞杂质4．（记忆） DNA的析出： DNA滤液与 混合,静置一段时间后析出的 就是 DNA；EFIEFNEUGBFNKFMEINGFEJFBNEIFKDNF精品资料————欢迎下载5．（记忆） DNA的鉴定：取 2 支干净的试管,编号甲、乙,各加入等量的 溶液；甲中放入少量白色丝状物, 使之溶解；在甲、乙试管中各加 4mL ,混合均匀；沸水浴 5min,观看颜色变化,甲试管显现 色；三、操作提示【活动 3】（记忆）阅读教材 P56“操作提示”和 P57“课题延长”,关注以下留意事项：1. 在鸡血中加入 防止凝固； 鸡血静置或离心后除去 ,以提高细胞悬液浓度；2. 试验中使用 和 ,以免 DNA被吸附；3. 玻棒沿 方向 搅拌（细胞破裂时快速搅拌）,玻棒不要遇到 ；4. 二苯胺试剂要 ；5. 为提高 DNA纯度,试验中通常使用的洗涤剂有 等；操作过程及提示：方法步骤 加入物质 目的1. 制备鸡血细胞液 柠檬酸钠2. 提取鸡血细胞核物质 20ml 蒸馏水3. 溶解细胞核内的 DNA 2mol/L 的 NaCl 溶液4. 析出含 DNA的黏稠物蒸馏水5. 滤取含 DNA的黏稠物6. 将 DNA的黏稠物再溶解2mol/L的 NaCl 溶液7. 过滤含 DNA的 NaCl 溶液8. 提取含杂质较少的 DNA冷却的95%的酒精 50mlEFIEFNEUGBFNKFMEINGFEJFBNEIFKDNF精品资料————欢迎下载9.DNA 的鉴定A:〔1〕2mol/L 的 NaCl 溶液 5ml〔2〕 加入丝状物（ DNA） 〔3〕4ml 二苯胺B: 〔1〕2mol/L 的 NaCl 溶液 5ml〔2〕4ml 二苯胺EFIEFNEUGBFNKFMEINGFEJFBNEIFKDNF精品资料————欢迎下载总结： 1. 共有“ 次搅拌、 次过滤, 次析出”2. 加入“ 次蒸馏水, 次 NaCl 溶液, 次酒精” 课后巩固：1. 在 DNA的粗提取和鉴定的试验中, 提取鸡血细胞的核物质和析出含 DNA的粘稠物的操作过程中均用到蒸馏水,其作用在于 （ ）A. 前者用来溶解血细胞,后者用来溶解 DNAB. 前者使血细胞吸水破裂,后者用来稀释 NaCl 溶液C．前者用来分别细胞核与细胞质,后者用来提取 DNA D．前者使 DNA从核中分别出来,后者使 DNA析出2. 为了便于提取鸡血细胞中的 DNA,以下所实行的措施中,最恰当的是：向经抗凝剂处理的鸡血细胞液加入（ ）A ．蒸馏水 B． ATP C． 0.3g/mL的蔗糖溶液 D．二氧化碳3. 以下不适宜作为DNA提取的试验材料是（）A ．鸡血细胞B ．蛙的红细胞C ．猪血D．菜花4. 用过滤的方法得到细胞中的氯化钠溶液后, 仍要用酒精处理, 可以得到较纯化的 DNA．这是由于（ ）A. DNA易溶于酒精,而滤液中某些杂质不易溶于酒精B. DNA不易溶于酒精,而滤液中某些杂质易溶于酒精C. DNA和滤液中其他成分更易溶于酒精EFIEFNEUGBFNKFMEINGFEJFBNEIFKDNF精品资料————欢迎下载D. DNA和滤液中其他成分都不溶于酒精5. 在争辩 DNA的基因样本前,采集来的血样需要蛋白水解酶处理,然后用有机溶剂除去蛋白质；用蛋白水解酶处理血样的目的是（ ）A. 除去血浆中的蛋白质B.除去染色体上的蛋白质C. 除去血细胞表面的蛋白质D.除去血细胞中的的蛋白质,使DNA释放,便于进一步提纯6. 在向溶解 DNA的 NaCl 溶液中,不断加入蒸馏水的目的是（ ）A. 加快溶解 DNA的速度 B. 加快溶解杂质的速度C. 削减 DNA的溶解度,加快 DNA析出 D. 减小杂质的溶解度,加快杂质的析出7. 在沸水浴的条件下, DNA遇（ ）会被染成蓝色；A. 斐林试剂 B. 苏丹Ⅲ染液 C. 双缩脲试剂 D. 二苯胺8. 在 DNA提取过程中,最好使用塑料试管和烧杯,目的是（ ）A. 不易破裂 B. 削减提取过程中 DNA的缺失 C. 增加 DNA的含量 D. 简洁洗刷9. DNA的粗提取中,将与滤液体积相等的、冷却的（ ）,静置 2— 3min,溶液中会显现白色丝状物；A.0 ． 9%的 NaCl B.0.14mol/L 的 NaCl 溶液C. 质量分数 15%的 HCl D. 体积分数为 95%的酒精溶液10. 以血液为试验材料时,需要向血液中加入（ ）,防止血液凝固；A. 醋酸钠 B. 龙胆紫 C. 柠檬酸钠 D. 醋酸洋红11. 洗涤剂能够瓦解（ ）,但对 DNA没有影响；A. 细胞壁 B. 细胞膜 C. 细胞核 D. 细胞质12. 在 DNA的粗提取过程中,初步析出 DNA和提取较纯洁的 DNA所用的药品的浓度和名称分别是（ ）① 0． 1 g/ml 的柠檬酸钠溶液 ② 2． 00mol/L 的 NaCl 溶液 ③0． 14 mol/L 的 NaCl 溶液④体积分数为 95%的酒精溶液 ⑤ 0． 015 mol/L 的 NaCl 溶液 ⑥ 0． 04 mol/L 的 NaCl 溶液A．①③⑤ B．③④ C ．②④ D ．②③④13. 与析出 DNA粘稠物有关的表达,不正确选项（ ）A. 操作时渐渐滴加蒸馏水,降低 DNA的溶解度B. 在操作 A 时,用玻璃棒轻缓搅拌,以保证 DNA分子完整 C．加蒸馏水可同时降低 DNA和蛋白质的溶解度,两者均可析出D．当丝状粘稠物不再增加时,此时 NaCl 的浓度约为 0.14mol/L.14. 在 DNA的粗提取试验过程中,两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是 〔 〕 ；A. 稀释血液、冲洗样品 B. 使血细胞破裂、降低 NaCl 浓度使 DNA析出C. 使血细胞破裂、增大 DNA溶解量 D. 使血细胞破裂、提取含杂质较少的 DNA15. 以下关于“ DNA 粗提取与鉴定试验”的表达,正确选项（ ） A．洗涤剂能瓦解细胞膜并增加 DNA在 NaCl 溶液中的溶解度B．将 DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C．常温下菜花匀浆中有些酶类会影响 DNA的提取 D．用玻棒缓慢搅拌滤液会导致 DNA获16. 以下是与高中生物试验有关的内容；请回答以下问题：①观看细胞质流淌 ②观看植物细胞有丝分裂3+③探究淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用 ④比较过氧化氢酶和 Fe 的催化效率⑤生物组织中仍原糖的鉴定 ⑥蛋白质的鉴定⑦脂肪的鉴定 ⑧叶绿体中色素的提取与分别⑨观看植物细胞的质壁分别与复原 ⑩DNA的粗提取与鉴定(1) 在上述试验过程中需要水浴加热的是 ,EFIEFNEUGBFNKFMEINGFEJFBNEIFKDNF精品资料————欢迎下载需要做临时装片的是 , 需要用颜色反应确定的是 ,需要用酒精的试验有 〔 以上均填标号 〕 ；(2) 由于试验材料用品或试剂所限,有时候需要设法替代；以下各项处理中正确选项 ；A. 做②试验时 , 可用蒜叶代替洋葱根尖 B. 做⑨试验时 , 可用鸡血红细胞代替紫色洋葱表皮细胞C. 做⑧试验时 , 可用干净的细沙代替二氧化硅 D. 做⑦试验时 , 可用龙胆紫代替苏丹Ⅲ染液17. 回答以下有关“ DNA的粗提取与鉴定”试验的问题；下图为该试验过程中的一些重要操作示意图；(1) 正确的操作次序是 ；(2) 上图 C、 E 步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是 和 ；(3) 上图 A 步骤中所用酒精必需是经过 的才能使用,该步骤的目的是 ；(4) 为鉴定 A 中所得到的丝状物的主要成分为 DNA,可滴加 试剂后沸水浴, 假如显现 就证明该丝状物的主要成分为 DNA；18. 关于 DNA粗提取的试验材料的选择,经过了多次试验成效的比较,最终选择鸡血作试验材料；请据下图回答以下问题；(1) 鸡血细胞中红细胞 ；家鸡属于鸟类, 新陈代谢旺盛, 因而血液中 细胞数目较多,可以供应丰富的 ；(2) 试验前由老师供应血细胞液供同学们作试验材料,而不用鸡全血,主要缘由是 ；(3) 在牧区采集牛、 羊和马血比较便利, 如用该材料按试验要求完成试验步骤后, 结果是 , 这是由于这些动物和人类一样, ；但如改用动物肝脏作试验材料,试验能顺当进行,这是由于 ；(4) 如选用动物肝脏作提取 DNA的试验材料,在提取之前,最好增加 程序, 使组织细胞更易分别；EFIEFNEUGBFNKFMEINGFEJFBNEIF。