乙酰胆碱对离体家兔小肠运动作用.doc

乙酰胆碱对离体家兔小肠运动作用摘要：通过观察乙酰胆碱对家兔离体肠肌收缩运动的影响，探究其基本原理和作用机制方法：取家兔离体肠肌一段，放置于盛有38℃的麦氏流浴槽中并连接张力换能器，利用生物信号采集处理系统进行数据收集，观察其收缩活动的特点并记录，分析得出结论 结论：滴加乙酰胆碱（Ach）后，肠肌运动节律较规则，频率和幅度都增大，紧张性增强；先滴加阿托品，肠肌运动节律不规则，频率减小，幅度减小，紧张性降低，随之滴加乙酰胆碱后，肠肌运动节律没有明显改变结论：乙酰胆碱（Ach）能增加肠肌兴奋性；乙酰胆碱是作用于胃肠平滑肌膜上的M受体来使肠肌兴奋关键词：乙酰胆碱；离体肠肌；肌收缩；M受体Abstract :To explore its mechanism of action, observing how the acetylcholine works on isolated rabbit intestinal muscle movement. Form rabbit isolate intestinal muscle for some, put it in Magnus’ bath containing 38℃ Tyrode’s solution and connected to the tension transducer, and then rabbit isolated intestinal muscle were done plus physiological saline, acetylcholine, atropine, atropine and acetylcholine. Collect data using application of bio-signal acquisition and processing system, analyzed data and draw a conclusion. The result is that intestinal muscle motility rhythm than the rule, the frequency increases, the amplitude increases, the tension increased after dropping acetylcholine; intestinal muscle motility become irregular, the frequency reduces, amplitude reduces, the tension reduces after dropping atropine. And intestinal muscle doesn’t change much after dropping acetylcholine. So the conclusion is that acetylcholine can make isolated rabbit intestinal muscle movement stronger; acetylcholine actions M receptor which is on intestinal muscle membrane to make intestinal muscle excite.Keywords: acetylcholine; isolated intestinal muscle; muscle contraction; M accepter 引言：消化道平滑肌具有肌肉组织的共同特性，如兴奋性、传导性和收缩性，同时又具有其他自身特点。

[1] 乙酰胆碱作为胆碱能神经释放的一种兴奋性神经递质, 对胃肠运动调节有重要作用[2]，经常用于研究生理或病理状态下胃肠运动变化[3，4]其在疾病如炎症、动脉粥样硬化和肿瘤的发展和治疗中也起到很重要的作用[5]但乙酰胆碱与胃肠平滑肌之间的作用机制不十分清楚，研究这以机制不仅可以填补理论空白，临床上也能提供新的药物选择和治疗靶向由此我们进行了这次试验1． 材料和方法1.1 实验对象：健康家兔，浙江中医药大学动物实验中学提供1.2 实验器材：麦氏浴槽、超级恒温器、通气管、张力换能器、铁支架、电脑、针线、木槌、止血钳、手术刀、20ml注射器、10ml注射器、手术剪、持针器、手术圆针、缝线、烧杯、手术盘1.3 实验药品：乙酰胆碱、生理盐水、阿托品、台氏液1.4 方法：1.4.1 实验装置准备 连接张力换能器，设置实验参数，打开恒温器稳定温度在38.0℃1.4.2 换液 打开灌流槽的內槽排水阀门，排去原来的台氏液，用20ml注射器从恒温水泵的小烧杯中抽取10ml台氏液注入灌流槽的內槽中1.4.3 家兔离体十二指肠制备 取家兔一只，用木槌猛击后脑勺，使之昏迷，将其仰卧位固定，用手术剪从剑突下沿腹部白线向耻骨联合方向剪开皮肤约5cm长，打开腹壁，暴露腹腔，顺着胃找到与胃相连的十二指肠，取出十二指肠，切割成小段，将其置于自主通氧的4℃台氏液培养皿中，用手术刀刮去肠管外的血管和系膜，每小段肠约2cm长，并在小肠段的对角两端各穿一条线。

将肠段的下端的线头尽量靠近并牢固地绑紧在浴槽固定架的小钩，将固定架放回内槽，使小钩尽量靠近槽底（尽量减少台氏液的使用），将肠段的上端的线头与张力换能器的应变梁连接，用张力微调器缓慢升降拉线，保持线有一定紧张度（前负荷为2g），肠段线应与地平面垂直调节位于固定架尾部的空气流量调节旋钮，使气泡即细小、均匀，又不影响肠段的运动1.4.4 记录五分钟38℃的台氏液环境中十二指肠肠肌收缩活动曲线，确定平衡和小肠活性并观察其收缩活动的特点1.4.5 向台氏液中加入0.9 %生理盐水0.2ml，观察记录小肠收缩活动改变的图像，待1min反应稳定后用台氏液冲洗2遍，再加入等量的台氏液，平衡2min后进行下一步1.4.6 向台氏液中加入1:100000 乙酰胆碱0.2ml，观察记录小肠收缩活动改变的图像，待1min反应稳定后用台氏液冲洗2遍，再加入等量的台氏液，平衡2min后进行下一步1.4.7向台氏液中加入0.5mg/1ml 阿托品0.2ml，观察记录小肠收缩活动改变的图像，待1min反应稳定后用台氏液冲洗2遍，再加入等量的台氏液，平衡2min后进行下一步1.4.8先向台氏液中加入0.5mg/1ml 阿托品0.1ml，待反应5个波形之后，再加入1:100000 乙酰胆碱0.1ml，观察记录小肠收缩活动改变的图像。

1.4.9 处理分析所得的图像2.结果表1.乙酰胆碱对离体家兔小肠运动的作用的原始数据记录 影响因素剂量（ml)对照处理后　收缩幅度（g）收缩频率（次数/每分钟）紧张性收缩是否加强或减弱（舒张最小值是否改变）收缩节律是否规则　收缩幅度（g）收缩频率（次数/每分钟）紧张性收缩是否加强或减弱（舒张最小值是否改变）收缩节律是否规则0.9 % NaCl 0.20.36616否规则　0.36616否（不变）规则1:10 0000 乙酰胆碱0.20.67816否规则1.06317加强（改变）不规则0.5mg/1ml 阿托品0.20.82416否规则0.2214减弱（基本不变）不规则先加0.5mg/1ml阿托品0.1ml+5个波形后再加入1:10 0000 乙酰胆碱0.1ml0.2 0.86116否规则　0.71414减弱（基本不变）不规则图1 加入0.9 %生理盐水图2加入1:100000 乙酰胆碱图3 加入0.5mg/1ml 阿托品图4 先加阿托品再加入乙酰胆碱3.讨论 乙酰胆碱与胃肠平滑肌细胞膜上的M受体结合,产生兴奋性效应,使胃肠运动加强乙酰胆碱是支配平滑肌、肠上皮细胞、一些肠道内分泌细胞和神经突触的主要兴奋性递质。

乙酰胆碱与肌膜上的M受体结合，①电位敏感性Ca2+专用通道，此类通道对乙酰胆碱敏感，小剂量乙酰胆碱即可引起开放②特异性受体活化Ca2+通道，此类通道对乙酰胆碱不敏感两类通道的开放都得使肌浆中Ca2+增高，进而激活肌纤蛋白—肌凝蛋白—ATP系统，是平滑肌收缩，肌张力增加[6]即，乙酰胆碱对十二指肠的影响由剂量决定，低浓度或少剂量的乙酰胆碱刺激平滑肌上M受体引起基本电节律传布加强，肌肉收缩频率和强度增强，小肠呈收缩状态[7]；乙酰胆碱过量或浓度过高，反而会出现抑制作用，收缩频率和振幅减少[8]，这与大剂量Ach对神经节产生抑制作用有关[9]4.结论 乙酰胆碱作用于胃肠平滑肌膜上的M受体来使平滑肌兴奋，产生收缩效应5.参考文献[1] 朱大年．生理学．[M]．第 7版．北京：人民卫生出社，2009 ：164 ．[2] Dinan TG , Scott LV , Brady D et al . Alte red hypothalamic choline rgic re sponses in patients with nonulcer dy spesia : a study of py ridostig mine stimulated grow th ho rmone release [ J] .AmJ Gastro enterol , 2002 , 97 (8):1937 .[3] 何俊堂, 刘海峰, 房殿春, 等.慢传输型便秘大鼠结肠肌间神经丛胆碱能神经及氮能神经的组化研究[ J] , 解放军医学杂志, 2004 , 29 (10):854 .[4]朱金照, 冷恩仁, 张捷.大腹皮对大鼠胃电节律紊乱的影响及机制[ J] .解放军医学杂志, 2002 , 27 (1):39 .[5] 葛徐林, 汪海.非神经性乙酰胆碱系统的结构和特征[ J] .中国药理学通报, 2009 , 06[6]Elizabeth A.H.Beckett,Kazuhide Horiguchi,Sean M.Ward.Loss of enteric motor neurotransmission in the gastric fundus of SL/SL(d) mice [J], Journal of Physiology (2002),543.3.pp.871-887[7] 竺心影.药理学【M】.第二版.北京:人民卫生出版社，1986,50一91[8]吕锦芳,陈燕.不同处理因素对离体兔小肠平滑肌运动的影响.安徽技术师范学院学报,2002,16(1):17 -22[9]高占国,刘传绩.毒草碱样乙酞胆碱受体功能的分子基础.中国药理通报,1997,13(4);292一294附加性实验：表2.各种因素对离体家兔小肠运动作用的原始数据记录影响因素剂量（ml)对照处理后　收缩幅度（g）收缩频率（次数/每分钟）紧张性收缩是否加强或减弱（舒张最小值是否改变）收缩节律是否规则　收缩幅度（g）收缩频率（次数/每分钟）紧张性收缩是否加强或减弱（舒张最小值是否改变）收缩节律是否规则0.9 % NaCl 加入0.20.36616否规则　0.36616否不规则1:10 000 肾上腺素加入0.20.56816否规则0.238减弱（基本不变）不规则1mol/L盐酸加入0.216否规则减弱（基本不变）不规则1mol/L氢氧化钠加入0.216。