细菌的药物敏感试验第三十四章抗微生物药物和敏感性试验课件.pptx

抗菌药物和抗菌药物和药敏试验药敏试验 第一节 临床常用抗菌药物抗菌药物抗菌药物 是指具有杀菌或抑菌活性是指具有杀菌或抑菌活性的抗生素和化学合成药物的抗生素和化学合成药物前者前者是真菌、放线菌、细菌等的是真菌、放线菌、细菌等的代谢产物，代谢产物，后者后者是经化学改造的半合是经化学改造的半合成抗生素和化学合成药物成抗生素和化学合成药物一、青霉素类抗生素：一、青霉素类抗生素：包括青霉素包括青霉素G G、耐青霉素酶青霉素、耐青霉素酶青霉素、广谱青霉素广谱青霉素(氨苄青霉素、氨苄青霉素、美洛西林、哌拉西林)等二、头孢菌素类抗生素：二、头孢菌素类抗生素：第一代第一代(头孢唑林、头孢氨苄、头头孢唑林、头孢氨苄、头 孢拉定孢拉定)、第二代、第二代(头孢孟多、头孢西汀，头孢呋新，头孢克头孢孟多、头孢西汀，头孢呋新，头孢克 罗等罗等)、第三代、第三代(头孢哌酮（先锋必）、头孢三嗪（菌必治）、头孢哌酮（先锋必）、头孢三嗪（菌必治）、头孢噻肟钠、头孢他啶、头孢唑肟等头孢噻肟钠、头孢他啶、头孢唑肟等)第四代第四代如头孢地嗪、头孢噻唑肟、头孢吡肟等适用于多重耐 药G-杆菌严重 感染，对厌氧菌也有很好的抗菌作用 三、其他三、其他内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素 （一）单环（一）单环内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素:主要有氨曲主要有氨曲 南和卡芦莫南。

南和卡芦莫南抗菌药物的分类（二）头霉素类和氧头孢烯类抗生素（二）头霉素类和氧头孢烯类抗生素:主要主要 有头孢西丁、头孢替坦、头孢美唑有头孢西丁、头孢替坦、头孢美唑三）碳青霉烯类抗生素（三）碳青霉烯类抗生素:主要有亚胺培南、主要有亚胺培南、米洛培南、必安培南、帕尼培南米洛培南、必安培南、帕尼培南四）（四）内酰胺类抑制剂内酰胺类抑制剂:主要有克拉维酸主要有克拉维酸 舒巴坦和他唑巴坦舒巴坦和他唑巴坦所有所有内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素都能抑制细胞壁粘肽合成都能抑制细胞壁粘肽合成酶，即青霉素结合蛋白酶，即青霉素结合蛋白（penicillin binding proteins，PBPs），），从而阻碍细胞壁粘肽合成，使细菌胞壁从而阻碍细胞壁粘肽合成，使细菌胞壁缺损缺损四、氨基糖苷类抗生素四、氨基糖苷类抗生素 可干扰细菌可干扰细菌蛋白质蛋白质合成合成,主用于对主用于对革兰氏阴性菌革兰氏阴性菌、绿脓杆菌绿脓杆菌等感染等感染 的治疗的治疗 按其来源分为按其来源分为：由由链霉菌属链霉菌属发酵滤液提取获得，有链霉素、卡那发酵滤液提取获得，有链霉素、卡那 霉素、妥布霉素、核糖霉素、巴龙霉素、新霉霉素、妥布霉素、核糖霉素、巴龙霉素、新霉 素；素；由由小单胞菌属小单胞菌属发酵滤液中提取，有庆大霉素、福发酵滤液中提取，有庆大霉素、福 提霉素；提霉素；半合成半合成氨基糖苷类，有阿米卡星、奈替米星、地氨基糖苷类，有阿米卡星、奈替米星、地 贝卡星等。

贝卡星等五、喹诺酮类抗生素五、喹诺酮类抗生素 是一种是一种DNA旋转酶抑制剂，它作用于细菌旋转酶抑制剂，它作用于细菌DNA旋转旋转酶，干扰酶，干扰DNA超螺旋结构的解旋，从而阻碍超螺旋结构的解旋，从而阻碍DNA的复的复制第一代第一代 为窄谱抗生素，有新恶酸、奈啶酸和恶为窄谱抗生素，有新恶酸、奈啶酸和恶 喹酸第二代第二代 为广谱类抗生素，抗菌强度依次为环丙为广谱类抗生素，抗菌强度依次为环丙 沙星、氧氟沙星、洛美沙星、氟咯沙星、沙星、氧氟沙星、洛美沙星、氟咯沙星、培氟沙星、诺氟沙星培氟沙星、诺氟沙星第三代第三代 为超广谱类抗生素，有司帕沙星、妥舒为超广谱类抗生素，有司帕沙星、妥舒 沙星、左氟沙星等沙星、左氟沙星等六、大环内酯类抗生素六、大环内酯类抗生素:作用于核糖体作用于核糖体50S亚基，抑制肽酰基转移酶，亚基，抑制肽酰基转移酶，阻止转肽作用和阻止转肽作用和mRNA位移，抑制细菌蛋白质的位移，抑制细菌蛋白质的合成常用的有：红霉素、柱晶白霉素、麦迪霉素、常用的有：红霉素、柱晶白霉素、麦迪霉素、乙酰螺旋霉素乙酰螺旋霉素七、四环素、氯霉素和林可酰胺类抗生素七、四环素、氯霉素和林可酰胺类抗生素 （一）四环素为广谱抗生素，（一）四环素为广谱抗生素，能特异性地与细菌能特异性地与细菌核糖体核糖体30S亚基的亚基的A位置结合。

位置结合抗菌活性的顺序抗菌活性的顺序 为米诺环素多西环素美他环素地美环素为米诺环素多西环素美他环素地美环素二）氯霉素类抗生素，包括氯霉素、（二）氯霉素类抗生素，包括氯霉素、甲砜霉素甲砜霉素三）林可酰胺类抗生素，主要有盐酸（三）林可酰胺类抗生素，主要有盐酸 林可霉素、克林霉素林可霉素、克林霉素八、糖肽类抗生素八、糖肽类抗生素 常用的有万古霉素常用的有万古霉素 和替卡拉宁和替卡拉宁 九、磺胺类药物及增效剂九、磺胺类药物及增效剂分三类：分三类：用于全身感染的药物，分为短效、用于全身感染的药物，分为短效、中效、长效三类，有磺胺甲恶唑，中效、长效三类，有磺胺甲恶唑，磺胺嘧啶、磺胺甲氧吡嗪；磺胺嘧啶、磺胺甲氧吡嗪；肠道起作用的药物有柳氮磺胺啶银、肠道起作用的药物有柳氮磺胺啶银、磺胺二甲氧嘧啶；磺胺二甲氧嘧啶；局部应用的药物有磺胺米隆、磺胺局部应用的药物有磺胺米隆、磺胺 醋酰钠十、其他合成抗菌药十、其他合成抗菌药 1.1.硝基呋喃类硝基呋喃类 用于肠道、尿路感染和用于肠道、尿路感染和 外用消毒外用消毒 ，有呋喃坦啶和呋喃唑酮有呋喃坦啶和呋喃唑酮2.2.硝基咪唑类硝基咪唑类 对厌氧菌有抗菌作用，对对厌氧菌有抗菌作用，对 需氧菌无效，有甲硝唑和替硝唑。

需氧菌无效，有甲硝唑和替硝唑第二节第二节 抗菌药物敏感性试验抗菌药物敏感性试验（ASTAST）一、意义一、意义可预测抗菌治疗的效果，可预测抗菌治疗的效果，“敏感敏感”治疗可能有治疗可能有效；效；“耐药耐药”肯定失败；肯定失败；指导医生选择使用抗生素，指导医生选择使用抗生素，ASTAST的结果为的结果为“耐药耐药”，即应更换药物；，即应更换药物；提供所选择药物的依据；提供所选择药物的依据；监测耐药性，分析耐药菌变迁，掌握耐药菌感染监测耐药性，分析耐药菌变迁，掌握耐药菌感染 病流行病学，控制和预防耐药菌感染发生和流行病流行病学，控制和预防耐药菌感染发生和流行二、试验常规二、试验常规抗菌药物选择抗菌药物选择 在临床上将试验药物分成在临床上将试验药物分成A A、B B、C C、U U四组四组,A A组组 所列的抗生素所列的抗生素为常规首选药敏试验药物为常规首选药敏试验药物,B B组组 为临床使用主要抗生素为临床使用主要抗生素,尤其在医院感染时尤其在医院感染时使用的抗生素，可在下列情况下使用：使用的抗生素，可在下列情况下使用：对对A A组组同类抗生素耐药；同类抗生素耐药；标本来源不同时，如三代头标本来源不同时，如三代头孢菌素使用于脑脊液中的肠杆菌，磺胺甲恶唑使孢菌素使用于脑脊液中的肠杆菌，磺胺甲恶唑使用于尿道分离的细菌；用于尿道分离的细菌；多种微生物感染；多种微生物感染；多多部位感染；部位感染；感染流行的控制；感染流行的控制；对对A A组抗生素组抗生素过敏、耐受或无反应。

过敏、耐受或无反应C C组组 药物药物用于对用于对A A组药物耐药的流行菌株或组药物耐药的流行菌株或 对对A A组药物过敏的病人和某些不常见的组药物过敏的病人和某些不常见的 细菌细菌（如肠外分离的沙门菌属或耐万（如肠外分离的沙门菌属或耐万 古霉素肠球菌）古霉素肠球菌）U U组组 仅用于尿道中分离的细菌仅用于尿道中分离的细菌，不作为尿，不作为尿 道外分离菌的常规药敏试验道外分离菌的常规药敏试验建议非苛氧菌常规药敏试验和报告应考虑的抗菌药物分组细菌A组B组C组U组肠杆菌科氨苄西林头孢唑啉头孢噻吩庆大霉素阿莫西林/克拉维酸或氨苄西林头孢孟多或头孢呋辛头孢吡污头孢美唑头孢哌酮头孢西丁头孢噻污环丙沙星或左氟沙星亚胺培南甲氧苄定氨曲南头孢他啶(可指示产ESBLs)氯霉素卡那霉素奈替米星四环素妥布霉素羧苄西林洛美沙星或氧氟沙星加替沙星氯碳头孢磺胺异恶唑甲氧苄啶呋喃妥因 建议非苛氧菌常规药敏试验 和报告应考虑的抗菌药物分组细菌A组B组C组U组 葡 萄 球 菌 属 细 菌苯唑西林青霉素阿奇霉素或克拉霉素或红霉素克林霉素万古霉素泰利霉素利奈唑胺环丙沙星或左氟沙星或氧氟沙星氯霉素庆大霉素利福平四环素罗美沙星或诺氟沙星磺胺异恶唑甲氧苄啶呋喃妥因(一）非苛养菌药敏试验抗生素的选用一）非苛养菌药敏试验抗生素的选用 A A组组一级试验并常规报告的抗微生物药一级试验并常规报告的抗微生物药,如葡萄球菌属用苯唑西林和青霉素。

如葡萄球菌属用苯唑西林和青霉素B B组组一级试验有选择报告的抗微生物药一级试验有选择报告的抗微生物药,如肠球菌属用万古霉素如肠球菌属用万古霉素 C C组组补充试验有选择报告的抗微生物药，补充试验有选择报告的抗微生物药，如葡萄球菌属用氯霉素如葡萄球菌属用氯霉素 U U组组仅用于泌尿道的补充实验的抗微生物仅用于泌尿道的补充实验的抗微生物药，如葡萄球菌属用洛美沙星和诺氟沙星药，如葡萄球菌属用洛美沙星和诺氟沙星二）苛养菌药敏试验抗生素的选用二）苛养菌药敏试验抗生素的选用A A组一级试验并常规报告的抗微生物药组一级试验并常规报告的抗微生物药,如如肺炎链球菌肺炎链球菌用用红霉素红霉素和青霉素和青霉素B B组一级试验有选择报告的抗微生物药组一级试验有选择报告的抗微生物药,如如肺炎链球菌肺炎链球菌用用头头孢噻肟孢噻肟或头或头孢孢曲曲 松松C C组补充试验有选择报告的抗微生物药，组补充试验有选择报告的抗微生物药，如如肺炎链球菌肺炎链球菌用用头头孢呋孢呋辛辛稀释法和纸片扩散法 稀释法是在体外定量检测抗菌药物抑制待测菌生长活性的方法,抗菌药物在液体或固体培养基中稀释.（一）液体稀释法 原理:以MH（水解 蛋白）液体培养基将抗菌药物做不同浓度的稀释，然后接种待测菌，定量测定抗菌药物抑制或杀死该菌的最低（或最小）抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）。

三、三、药敏试验方法材料：抗菌药物(配制见表)培养基：一般采用MH液体培养基接种菌液的准备：挑取纯培养（平板）的4-5个菌落，种于3-5ml MH液体培养基中，35培养4-6小时；校正菌液浓度，使其相当于0.5个麦氏单位的浊度（1.28x108 cfu/ml）标准，再用MH液体培养基进行1：200的稀释后，在15 min内用完无菌小试管：10-15支 无菌吸管：35培养箱操作步骤：1.取10支小试管，除第一支外，其余每管加于MH培养基1ml.2.吸取抗菌药物原液（1000 g/ml）5.12ml,加入液体培养基4.88ml，混合，吸出2ml加入第一和第二管中，每管加1ml，第二管混合后取出1ml加入第三管，依次类推直至9管，吸取1ml去掉，各管抗菌药物的实际含量依次分别为512、256、128、64、32、16、8、4、2、1 g/ml；另设培养液对照、待测菌生长对照、和质控菌生长对照3.3.将一定浓度的待测菌悬液依次加入上述各管中，每管0.05ml，混匀放入35培养箱12-18小时后观察结果4.4.结果判断：凡无肉眼可见细菌生长的药物最低浓度即为该待测菌的最低抑菌浓度（MIC）;5.再以0.01ml容量接种环无菌管中取出一环种于血平板作次代培养，经35培养过夜后，观察最低药物浓度能杀死99.9%原始种于的细菌者，即为该菌的最低杀菌浓度（MBC）。

影响因素 1.培养基 pH、渗透压、电解质对结果均有影响在MH培养基上不生长的细菌除外，一般都用该培养基2.抗菌药物 必须采用标准粉剂3.结果观察时间，应在12-18小时之间观察质量控制：每次试验时应根据待测菌的不同而分别选用：金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠艾希菌ATCC25922、粪肠球菌ATCC29212和铜绿假单胞菌ATCC27853等标准菌株在同一实验条件下作平行试验其结果（MIC）超过或低于预期值范围一个稀释度以上，不应向临床发出。