改良加藤厚涂片法虫卵鉴别（杭州培训班）.ppt

改良加藤氏厚涂片法中虫卵的特点及鉴别中国疾病预防控制中心 寄生虫病预防控制所 许隆祺(一) 改良加藤厚涂片法（Kato-Katz法）1. 材料(1) 透明液（蒸馏水100ml＋纯甘油100ml＋3%孔雀绿1ml);(2) 亲水性透明玻璃纸需在透明液中浸泡24小时 以上；(3) 尼龙绢片（80目或100目）或金属丝网（60或80目）片，大小约为5×5cm；(4) 圆台形孔塑料定量板；(5) 塑料刮片2. 操作步骤：(1) 尼龙绢（5cm×5cm）放在粪便上，用刮片刮取粪便；(2) 将定量板放在载玻片中部，并将通过尼龙绢刮出的粪样填入定量板的中央孔内，填平中央孔为止；(3) 小心取下定量板，则粪样就留在载玻片上；取一张透明液浸泡好的亲水玻璃纸，抖掉多余的浸泡液后盖在粪便上4) 用橡皮塞或另一块盖玻片轻压，使粪便均匀展开至玻璃纸边缘；(5) 待粪便透明后及时镜检4. 注意事项Kato-Katz厚涂片在室温25℃，75%湿度下，涂片放置不宜超过2小时，若温度低，空气湿度大，涂片放置时间可适当延长在南方温度高的地区或西北气候干燥地区涂片放置时间要缩短，常放置1小时或半小时即可镜检，甚至涂片制好后马上就可检查。

总之只要涂片透明了就要及时镜检否则薄壳虫卵因透明过度而看不清，造成漏检或误检改良加藤厚涂片法虽有简便易行适于检查各种蠕虫卵 的优点，但也有缺点，特别是改良加藤厚涂片法(下称 Kato-Katz法)中，虫卵在不同程度上会发生形态改变， 给鉴别增加了许多困难，初学者更不易掌握多年来 我们在大量实验中对Kato-Katz法蠕虫卵形态变化，进 行了观察，总结了一些变化特点，用于实践，有助于 Kato-Katz片中虫卵鉴别线虫卵 ⑴卵盖：所有线虫卵都无卵盖 ⑵卵壳厚薄 蛔虫卵、鞭虫卵、蛲虫卵、肝毛 细线虫卵、喉兽比翼线虫卵、肾膨结线虫卵等 卵壳较厚，其他线虫卵卵壳都较薄卵壳薄的线虫卵在Kato-Katz片中易透明 过度，不易辩认克服办法是掌握好透 明时间卵壳厚的线虫卵在Kato-Katz片 中可保存较长时间，易于辩认 ⑶内含物 线虫卵内含单个卵细胞、多个 卵细胞或线状幼虫只要不透明过度， 一般这些内含物都可见到需要注意以下几点 1）钩虫卵和蛔虫卵：钩虫卵在Kato-Katz片中 ，卵壳看上去反而比生理盐水直接涂片中的卵 壳要厚而且颜色深这是因为钩虫卵壳薄，被 甘油透明后，看到的卵壳其实是周围粪便层。

在Kato-Katz片中，初学者易将钩虫卵与受精蛔 虫卵特别是脱蛋白膜受精蛔虫卵相混淆二者 主要区别是①卵壳：受精蛔虫卵是双层卵壳， 而钩虫卵在Kato-Katz片中卵壳似乎增厚，但仍 是单层②内含物：钩虫卵内含数个灰色卵细 胞，而受精蛔虫卵内含一个卵细胞，它是由无 色微细颗粒状物集中于一团，呈一个单一圆形 内含物如果是未脱蛋白膜的蛔虫卵，还可见 到卵壳外凹凸不平的蛋白膜痕迹2）未受精蛔虫卵：经甘油透明后，内含屈 光性颗粒状物均消失，这种情况易与血吸虫 卵及其他大型吸虫卵相混淆，但未受精蛔虫 卵外周锯齿状突起往往没有消失或未完全消 失而且Kato-Katz片放置较长时间，未受精 蛔虫卵仍不消失 3）鞭虫卵和肝毛细线虫卵：在Kato-Katz片 中，鞭虫卵两端透明塞有时因甘油透明过度 或粪便遮住而看不见肝毛细线虫卵因两端 透明塞不突出膜外，不易被甘油透明，故一 般可见鞭虫卵卵壳表面无横纹，肝毛细线 虫卵表面有细横纹 4）蛲虫卵在Kato-Katz片中，形状似半个柿 子形，不对称，壳厚一般为无色透明，但 有时被孔雀绿染成绿色直接涂片中蛔虫卵蛔虫卵分受精卵与未受精卵受精蛔虫卵大小为45-75×35-50μm，平均长约 60μm，未受精蛔虫卵比受精蛔虫卵长，大小88-94×39-44μm。

直接涂片中：受精蛔虫卵呈椭圆形或近圆形，卵壳厚，呈双层，其外包有一层厚而呈乳头 状突起常被胆汁染成棕黄色的蛋白质膜，蛋白质膜越厚，着色越深随宿主 粪便排出的受精蛔虫卵内含一个无色或灰色微细颗粒状的卵细胞，虫卵两端 有月牙状空隙(2-1) 直接涂片中感染性蛔虫卵新鲜标本中受精蛔虫卵为单细跑，在适宜外界环境中，卵细胞会分裂 成两个或多个细胞，最后发育成幼虫幼虫经第一次蜕皮后成为第二 期幼虫，这种含第二期幼虫的虫卵因具感染性故称感染性蛔虫卵(2-2)直接涂片中未受精蛔虫卵与受精蛔虫卵未受精蛔虫卵比受精虫卵明显狭长，多为长椭圆形，少数外形不整齐 ，呈茶褐色或淡黄色，未受精卵的蛋白质膜和卵壳都较受精卵的薄， 蛋白质膜上有锯齿状突起，卵内充满大小不等的屈光性卵黄颗粒图2 -3为未受精蛔虫卵与受精蛔虫卵直接涂片中脱去蛋白质膜的 受精蛔虫卵与未受精蛔虫卵脱去蛋白质膜的受精蛔虫卵与未受精蛔虫卵 有蛋白质膜的受精蛔虫卵一般呈棕黄色，脱蛋白质膜的受精蛔虫卵呈 无色透明或淡黄色，虽易与钩虫卵相混淆，但其卵壳(双层)较钩虫卵 卵壳(单层)明显为厚 脱蛋白质膜的未受精蛔虫卵，其卵壳表面光滑、无色卵内充满大小 不等屈光性卵黄颗粒，注意不要和钩虫卵或大型吸虫卵相混淆。

图2-4为脱去蛋白质膜的受精蛔虫卵与未受精蛔虫卵在Kato厚涂片中受精蛔虫卵受精蛔虫卵在Kato厚涂片中形态变化不大，不论有无蛋白质膜，均可 见其卵壳厚，呈双层，这是与钩虫卵及其他薄壳虫卵的重要区别图 2-5为Kato厚涂片中有蛋白质膜受精蛔虫卵，图2-6是Kato厚涂片中脱 蛋白质膜的受精蛔虫卵 Kato厚涂片中未受精蛔虫卵与受精蛔虫卵未受精蛔虫卵在Kato厚涂片中形态变化较大，经透明后卵内所含屈光 性颗粒消失，给准确判认带来困难，易与血吸虫卵及其他大形吸虫卵 相混淆但常可见到外周锯齿状凸起的蛋白质膜，这是其他虫卵所没 有的图2-7和图2-8是Kato厚涂片中未受精蛔虫卵与受精蛔虫卵 直接涂片中鞭虫卵鞭虫卵大小为50-54×22-23μm，略小于受精蛔虫卵直接涂片中：鞭虫卵呈黄褐色，腰鼓形或橄榄状，卵壳较厚，两端各 有一个透明塞状物，刚排出的虫卵内含未分裂的卵细胞（如图2-9）在Kato厚涂片中鞭虫卵在Kato厚涂片中鞭虫卵的形状、颜色等和直接涂片中所见基本相似， 故不难辨认，但有时虫卵两端透明塞状物被粪便遮住或被透明过度则 不易辨认。

图2-10是Kato厚涂片中鞭虫卵直接涂片中钩虫卵钩虫卵大小为56-76×36-40μm，和受精蛔虫卵相近或略长 直接涂片中：钩虫卵呈短椭圆形，两端钝圆或一端稍扁平，卵壳薄， 无色透明，新鲜卵内含2-8个灰色颗粒细胞，以4个最为常见，但有时 只有1个或多于8个 图2-11是钩虫卵，图2-12是钩虫卵、毛圆线虫属线虫卵和受精蛔虫卵  钩虫卵在Kato厚涂片中 钩虫卵在Kato厚涂片中，卵壳看上去反而比在直接涂片中的卵壳要厚而且颜 色深这是因为钩虫卵的薄壳已被甘油透明，所看到的卵壳其实是周围粪便 层 钩虫卵在Kato厚涂片中常因透明过度而不易辨认，必须掌握透明时间，只要不透明过度 ，虫卵内的多个卵细胞一般都可以看到再结合其他特征如大小形状是可以正确辨认的 （图2-13）在Kato厚涂片中，初学者易将钩虫卵与脱蛋白质膜的受精蛔虫卵混淆，二 者主要区别是：(1)卵壳：受精蛔虫卵壳厚呈双层，而钩虫卵卵壳似乎增厚，但仍是单层 ；(2)内含物：钩虫卵内含数个灰色细胞，受精蛔虫卵内含1个卵细胞，由于无色微细颗 粒状物集于一团，呈圆形内含物，如果是未脱蛋白质膜的受精蛔虫卵还可以见到卵壳外 凹凸不平的蛋白质膜痕 在直接涂片或透明胶纸玻片中蛲虫卵蛲虫卵大小为50-60×20-30μm，小于受精蛔虫卵。

直接涂片或透明胶纸玻片中：蛲虫卵为半椭圆形，不对称，一侧扁平 ，一侧稍凸，呈柿核形，壳厚，玻璃状无色透明刚排出时卵内细胞 尚未分裂或在分裂的早期，在空气中或肛门局部的温湿度适宜条件下 ，卵胚可以迅速发育成幼虫，图2-14为直接涂片中蛲虫卵，图2-15为 透明胶纸玻片中蛲虫卵 在Kato厚涂片中蛲虫卵蛲虫卵在Kato厚涂片中形状变化不大，半椭圆形，不对称，一般仍为 无色透明，但有时内含物（卵细胞或幼虫）被染成绿色注意将形状 与蛲虫卵相似的非虫卵物质与蛲虫卵区别开来，图2-16是Kato厚涂片 中内含未分裂卵细胞的蛲虫卵 吸虫卵在Kato-Katz片中吸虫卵形态有3个主要特征 发生变化： ⑴卵盖：吸虫卵除血吸虫卵外，都有卵盖， 但在Kato-Katz片中，一般看不到卵盖有 卵盖的虫卵，卵盖处有时易破开⑵卵壳：吸虫因卵壳的厚薄差异有不同 变化特征： ①虫卵直径平均在52μm以上的吸虫卵 只有并殖吸虫卵的卵壳厚薄不均，在近 盖端略薄而无盖端增厚，其他吸虫卵卵 壳都较薄 ②虫卵直径平均在52μm以下的吸虫卵 ，卵壳都较厚在Kato-Katz片中，一般卵壳厚的虫卵 卵壳表面完整，而卵壳薄的虫卵卵壳易 破裂，制Kato-Katz片时由于压片，常 使卵壳表面出现1～数条裂纹，有时在2 条或数条裂纹之间颜色加深，并且卵盖 也常裂开。

这是在Kato-Katz片中鉴别 肝片形吸虫、布氏姜片吸虫卵、棘口吸 虫卵的重要特征⑶内含物：吸虫卵内含物分二种：①血吸虫卵与平均直径在52μm以下的 有盖吸虫卵都内含毛蚴：只要在沉淀镜 检时毛蚴清晰的，在Kato-Katz片中也 常可见到毛蚴轮廓②虫卵平均直径52μm以上有盖吸虫卵 都内含一个卵细胞和许多卵黄细胞：在 Kato-Katz片中，内含物（一个卵细胞 和许多卵黄细胞）一般消失只有并殖 吸虫卵在Kato-Katz片中因卵壳厚不易 破裂（但卵盖有时会裂开），仍可见内 含的卵细胞和卵黄细胞，在内含物未消 失处的卵壳表面颜色常加深在Kato-Katz片中鉴别含一个卵细胞和 许多卵黄细胞的虫卵时，必须测量虫卵 的大小(长短)必要时还需加做小瓶倒 置法和水洗沉淀法，以便在沉渣涂片中 进一步观察虫卵的形态结构直接涂片中华支睾吸虫卵华支睾吸虫卵俗称肝吸虫卵，大小为27~35μm×15~20μm直接涂片中：华支睾吸虫卵呈黄褐色，芝麻形或旧式电灯泡形，壳厚 ，狭窄一端可见突起的卵盖，两边肩峰明显，宽而钝圆的一端（卵盖 对侧）常可见到呈点状突起的小棘因卵壳表面有丝瓜筋样花纹，故 光镜下卵壳表面不光滑，内含毛蚴（图2-17）。

在Kato厚涂片中华支睾吸虫卵 在Kato厚涂片中华支睾吸虫卵等小型吸虫的虫卵内含的毛蚴有时可以 见到（图2-18），但Kato厚涂片中小型吸虫卵很难鉴别，有的需加做 沉淀镜检，甚至要驱出成虫才能确定直接涂片中肺吸虫卵 直接涂片中：卫氏并殖吸虫卵（肺吸虫卵）大小为54～100×38～60μm，金黄 色长卵圆形或椭圆形，常不对称，卵壳厚薄不均匀有盖端较宽，无盖端略 窄，并逐渐增厚，虫卵最宽处接近卵盖一端卵盖大，边缘明显，似一平顶 帽，但常稍作倾斜位，卵盖易脱落卵内含许多卵黄细胞和1个位于中央的卵 细胞（图2-19）Kato厚涂片中肺吸虫卵Kato厚涂片中：并殖吸虫卵卵壳都较厚，内含一个卵细胞和许多卵黄 细胞，在改良加藤厚涂片中卵壳不易破裂，卵盖清楚，但卵盖处有时 会裂开，内含的卵细胞和卵黄细胞多未消失，在内含物未消失处的卵 壳表面颜色常加深（图2-20）直接涂片中布氏姜片吸虫卵Kato厚涂片中布氏姜片吸虫卵绦虫卵⑴假叶目绦虫卵 ①卵盖：假叶目绦虫卵虽都有卵盖，但在Kato-Katz 法中看不到卵盖，只有曼氏迭宫绦虫卵在卵盖处易裂 开 ②卵壳：阔节裂头绦虫卵、大复殖孔绦虫卵卵壳较厚 。

而曼氏迭宫绦虫卵的卵壳薄，Kato-Katz片中易破裂 。