完整word版Tris-HCl及其他几种缓冲液配方.docx
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Tris是什么？有什么作用？Tris-HCl,Tris-EDTA如何配制?Tris：三羟甲基氨基甲烷三羟甲基氨基甲烷（Tris（hydroxymethyl）aminomethane，一般简称为Tris）是一种有机化合物，其分子式为（HOCH2）3CNH2Tris被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备例如，在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液（用于核酸的溶解）都需要用到Tris由于它含有氨基因此可以与醛发生缩合反应Tris为弱碱，在室温（25C下，它的pKa为8.1;根据缓冲理论，Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间Tris碱的水溶液pH在10.5左右，一般加入盐酸以调节pH值至所需值，即可获得该pH值的缓冲液但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响由于Tris缓冲液为弱碱性溶液，DNA在这样的溶液中会被去质子化，从而提高其溶解性人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“T喘冲液”，TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸，则获得“TAE缓冲液’（Tris/Acetate/EDTA），而换成硼酸则获得“TB峻7中液”（Tris/Borate/EDTA）。
这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中用途：有机合成中间体在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系，稳定电泳过程中的PH值在凝胶中也起到稳定PH的作用，只不过是Tris-HCl缓冲体系Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂，还有许多重要用途Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫（C.elegans核纤层蛋白lamin）的中间纤维的形成Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一此外，Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物Tris也被用作滴定标准物常用Tns-HC^神液配制：Tris-HCl(0.05mol/L,况)50ml0.1mol/LE羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与xml0Imol/L盐酷园匀后，加水布释至1OOmlpHx/mlPHx/ml7104578.1026.27.2044.78.2022.97.3043,48.3019.97.4042.08.4017.27.504038.501477.603&38.601247.7036.687010.37.8034.58.808.579032.08.907.0Tri盼子量=12114,0.1籀液为12114gLTri啪液可从空气中吸收二氧化碳(百度及其他网站所迷)，使用时注意怖瓦盖严.配置不同浓度和不同PH值Tns-HCI缓冲液时*可以先8己成一定PH值的0.05mol/LO液，再稀释到所需浓度*1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度1MTris-HCl配制量1L配制方法：1. 称量121.1gTris置于lL烧杯中。
2. 加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解3. 按下表加入浓HCl量调节所需要的pH值4. pH值浓HCl7.4约70ml7.6约60ml8.0约42ml将溶液定容至1L5. [Wj温局压火菌后，室温保存注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1C,溶液的pH值大约降低0.03个单位1. 1.5MTris-HCl(pH8.8)组份浓度1.5MTris-HCl配制量1L]配制方法称量181.7gTris置于1L烧杯中2. 加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解3. 用浓HCl调节pH值至8.84. 将溶液定容至1L5. [Wj温局压火菌后，室温保存注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1C,溶液的pH值大约降低0.03个单位TE即Tris-EDTAbuffer(10mMTris,1mMEDTA,pH7.4pH7.6pH8.0)常用分子生物学试剂，用于DNA的溶解等配制10 2. 1MTris-HClBuffer(pH7.4,7.6,8.0)100ml500mMEDTA(pH8.0)20ml向烧杯中加入约800ml的去离子水，均匀混合3. 将溶液定容至1L后，高温高压灭菌4. 室温保存。
