HPLC手动积分原则.docx

实验室数据完整性已成FDA检查制药企业的一把利器，其中一条关于随意手动 积分或者无书面程序规定手动积分，说明了 FDA本身并不是不认可手动积分， 而是要求有操作规程规定什么情况可以手动积分，如何积分，并且应保存并记录 积分参数CFDA紧跟FDA的步伐，在2016年度多次飞检中，开具多条数据完整性方面 的缺陷，收回多张GMP证书关于手动积分并没有开具缺陷，制药企业应防患 于未然，提前把手动积分管理好一、 关于手动积分的指南关于手动积分，并没有指南给出明确的定义笔者只查到有两篇生物样本分析的 方法验证指南规定了再积分（Rei ntegratio n）的注意事项FDA 的 2001 年定稿指南 Bioanalytical Method Validation，及相应的 2013 年草 案指南也有类似的要求生物样本分析的方法验证2013草案指南，第III.C节“样 本数据再积分”规定：SOP应该确定再积分的标准，和怎样进行再积分；应清楚 描述、并记录再积分的理由；应报告原始和再积分数据第VII.D节还规定：再 积分数据应有管理人员授权再积分EMA 的 2011 年指南 Guideline on bioanalytical method validation，第 5.5 节规 定：应该有SOP描述色谱的积分和再积分。

应在分析报告中讨论偏离这个SOP 的任何偏差应该记录色谱积分、再积分的积分参数、初始积分数据、最终积分 数据，并在要求时立即可得二、 什么情况下可以进行手动积分？1） 低分离度或低响应；2） 流动相不稳定，基线紊乱，保留时间变化小；3） 运行过程中，出现异常峰；4） 软件积分的局限性，如由于软件参数阈值的设置导致峰未积分，峰起点和终 点间出现肩峰和异常的基线漂移，软件错误（峰未积分和错误识别峰）；5） 由于样品母体的干扰导致的复杂色谱图：裂峰、目标杂质的同时洗脱/肩峰、 基线噪音、负峰、基线上升或下降（由于某些梯度程序）、峰的严重拖尾、烃类 的存在导致自动积分不正确三、手动积分的权限及操作 操作员在数据系统自动积分不正确时，领取手动积分处理报告表并填写，手动积 分申请被QC经理批准后由QC经理或QC组长（若有）或其指定人员（一般是 指经验丰富的资深QC）方可进行手动积分四、 手动积分注意事项1） 手动积分不能试图通过以下动作来使数据符合标准要求：减少峰（减少峰面 积）；增加峰（增加峰面积）；改变峰高；2） 同一次检验的所有标准品、工作对照品、样品等必须使用同一方法进行手动 积分3） 手动积分结束后，应打印自动积分图谱和手动积分图谱附于手动积分申请表 之后，提交QC经理审核；QC经理应复核完整的数据找出根因，基于根因制定 相应的CAPA措施来避免类似事件。

4） 自动积分的图谱不得删除或被覆盖，应与手动积分图谱保存于计算机中；打 印的自动积分图谱和手动积分图谱应标识清楚签名，随同手动积分申请表附于检 验原始记录后面一起交质量管理部经理、QP审核无问题后归档五、 色谱软件选型、权限设置和结果显示满足合规要求的色谱软件（例如Waters和Angilent的软件），能够分别设置不 同权限，例如普通化验员不具备进行手动积分的权限，需要主管进行操作，有些 软件则不具备这些功能；即使是同一个品牌的软件，也有不同版本；即使软件有 这个功能，企业也不一定启用有两个信息是否显示，对色谱数据透明度非常重要：方法名称和数据版本如果 企业不使用手动积分（重画基线），而采用修改参数的方式，则每修改一次，是 不同的方法（规范的管理程序会要求更改方法名称保存，否则就只能到审计追踪 才能查出来这个方法已经被修改了），而打印的色谱图可以选择是否显示方法； 每处理一次数据，会形成一个数据版本，同样的，打印的色谱图可以选择是否显 示数据版本一个完全透明的结果显示，会在打印的色谱图上显示方法名称+ 数据版本”（同时要求修改参数则改变方法名称，不需要QA或检查员仔细检查 审计追踪才能发现修改痕迹）。