三糖铁琼脂(TSI)使用说明.doc

　　编号：022080品种名称： 三糖铁琼脂(TSI) (Triple Sugar Iron Agar)用 途：用于鉴别肠道菌发酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及产生硫化氢的生化反应(GB/T4789.36-2008，GB/T4789.4-2008，《中华人民共和国药典》2005 年版，SN0170-92 和 GB13091-91)原 理：蛋白胨、牛肉膏粉提供氮源、维生素、矿物质;乳糖、葡萄糖、蔗糖为可发酵糖类，其产酸时通过酚红指示剂测出，酸性呈黄色，碱性呈红色;硫代硫酸钠可被某些细菌还原为硫化氢，与硫酸亚铁铵中的铁盐生成黑色硫化铁;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂图鉴：配方(每升)：蛋白胨 20g牛肉膏粉 5g乳糖 10g蔗糖 10g葡萄糖 1g氯化钠 5g　　硫酸亚铁铵 0.2g硫代硫酸钠 0.2g琼脂 12g酚红 0.025g最终 pH 7.4±0.2使用方法：1、 称取本品 63.4g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，加热搅拌溶解煮沸至完全溶解，分装试管(装量宜多些)2、 将试管放入灭菌锅中，121℃高压灭菌 15min，取出，制成高层斜面，备用3、 挑取待检菌的新鲜纯培养物，穿刺接种后，再划斜面，置培养箱36±1℃培养 18—24h。

4、 观察结果在三糖铁琼脂培养基内只有斜面产酸并同时硫化氢阴性的菌株可以排除，其他的反应结果均有沙门氏菌的可能，同时也均有不是沙门氏菌的可能，对这些可疑菌需做进一步的生化试验质量控制：下列菌株接种斜面后，36±1℃培养物 18—24h，结果如下：菌 名　　　　 菌 号　　生长状况　　斜面/底部　　产气 　产硫化氢大肠埃希氏菌 　ATCC25922　　　良好　　　　A/A　　　　　+ 　　　　-鼠伤寒沙门氏菌　CMCC(B)50115　良好　　　　K/A　　　　　+ 　　　　+福氏志贺氏菌　　CMCC(B)51572　良好　　 K/A　　　　　-　　　　-铜绿假单胞菌 　　ATCC9027 　　良好　　　　K/K　　　　　- 　　　　-注：“A”为产酸，“K”为产碱贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖贮存期三年规 格：250g（提供：广东环凯）。