激素测定方法.docx

甲状腺激素及有关蛋白测定甲状腺分泌的激素包括甲状腺素(thyroxine,T4)和少量三碘甲腺原氨酸(triiodothyronine, T3)，它们都是含碘的氨基酸衍生物甲状腺上皮细胞可通过细胞膜上的“碘泵”主动摄取血浆中的碘经细胞中过氧化物酶的作用，碘可转变生成形式尚不清楚的“活性碘”，故临床常利用抑制过氧化物酶的药物如硫氧嘧啶、他巴唑等治疗甲状腺功能亢进（hyperthyroidism）活性碘”与存在于甲状腺滤泡上皮细胞内的甲状腺球蛋白（thyroglobulin，TG）上的酪氨酸残基结合（碘化），逐步缩合生成T4、T3含有T4和T3的TG随分泌泡进入滤泡腔中储存在垂体分泌的促甲状腺激素（thyroid stimulating hormone,TSH）的作用下，TG被蛋白酶水解，释放出T4、T3，扩散入血血液中的甲状腺激素中90%为T4，T3仅为2%T3的主要来源是周围组织中T4在5’位脱碘后生成但是T3的生理活性比T4高，占正常甲状腺激素总活性的2/3如T4在5位上脱碘，则生成反三碘甲腺原氨酸（reverse T3, rT3），rT3基本没有甲状腺激素的生理活性，但在甲状腺疾病和许多非甲状腺疾病时出现有病理意义的变化。

血浆中的T3和T4绝大部分与血浆甲状腺素结合球蛋白（thyroxin binging globulin, TBG）结合运输，但只有游离的甲状腺激素才有生物活性血清中甲状腺激素测定包括总T4（TT4），总T3（TT3），游离T4（FT4），游离T3（FT3）和反T3(rT3)，FT4和FT3不受血液TBG的影响，直接反映甲状腺功能状态另外还有TBG和抗甲状腺自身抗体检测等㈠ 适应症：用于评价甲状腺功能状态以及对甲状腺功能亢进（甲亢）、甲状腺功能低下（甲低）、自身免疫性甲状腺疾病、其他疾病所致甲状腺功能异常等疾病的诊断、疗效观察及预后估计㈡ 标本采集：血清或血浆，一般多用血清㈢ 检测方法：甲状腺激素的测定大多采用标记免疫的方法直接测定血清中的激素浓度包括放射免疫法(RIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、均相酶放大免疫法(EMIT)、化学发光免疫分析(LIA)及荧光免疫法等㈣ 参考范围 1、TT4： ①新生儿 129~271 nmol/L，②婴儿90~194 nmol/L，③1~5岁 94~194 nmol/L， ④6~10岁 83~172 nmol/L，⑤10~60岁65~155 nmol/L；⑥妊娠5个月 79~227 nmol/L；⑦＞60岁：男 65~129nmol/L，女 71~135 nmol/L（RIA）。

2、TT3： ①脐带血 0.5~1.1 nmol/L，②新生儿 1.2~4.0 nmol/L， ③1~5岁 1.5~4.0 nmol/L，④6~10岁 1.4~3.7 nmol/L，⑤11~15岁 1.2~3.2 nmol/L，⑥15~60岁1.8~2.9 nmol/L，⑦大于60岁：男 1.6~2.7 nmol/L 女 1.7~3.2 nmol/L（RIA）3、FT4：10.3~25.8 pmol/L，FT3 2.16~6.78 pmol/L，rT3 0.38~1.16 nmol/L，TBG 15~34 mg/L（RIA）㈤ 临床意义1、 TT4、TT3⑴血清TT4的增加见于甲亢和TBG增加，TT4降低见于甲低、TBG减少、甲状腺炎、药物影响（如服用糖皮质激素等）⑵血清TT3是诊断甲亢最可靠和灵敏的单项指标，尤其是对诊断T3型甲亢的病人有特殊意义，这类甲亢病人血清TT4浓度不高但TT3却显著增高⑶低T3综合征：在饥饿、慢性消耗性疾病（如肝硬化、未控制的糖尿病等）时，外周T4转变为rT3增加，转变为T3减少，此时血清T4正常而T3减少，即所谓的低T3综合征2、FT4、FT3总的来说，FT4和FT3的临床意义与TT4和TT3相同，但因不受血清TBG影响，而是代表具有生物活性的甲状腺激素的含量，因而具有更重要的临床价值。

⑴甲状腺功能亢进：对于诊断甲亢，FT4、FT3均较TT4、TT3灵敏，对治疗中的甲亢病人的观察，FT4、FT3的价值更大⑵甲状腺功能减退：大多数口服T4治疗的病人，FT4在服药后1~6小时血液浓度达到高峰，而且与服药剂量有关FT4可能是用甲状腺素做替代性治疗时最好的检测指标⑶妊娠：孕妇的血中TBG明显增加，因此FT4、FT3的检测较TT4、TT3更为准确3、rT3：rT3与T3在化学结构上属异构体，但T3是参与机体代谢的重要激素，是耗氧的，而rT3则几乎无生理活性rT3增加，T3减少，可以降低机体氧和能量的消耗，可能是机体的一种保护性机制⑴甲亢时血清rT3增加，与血清T4、T3的变化基本一致而部分甲亢初期或复发早期仅有rT3的升高⑵甲低时血清rT3降低rT3是鉴别甲低与非甲状腺疾病功能异常的重要指标之一⑶部分非甲状腺疾病，如心肌梗塞、肝硬化、糖尿病、尿毒症、脑血管意外和一些恶性肿瘤病人，血清中rT3增加，T3/rT3比值降低，这一指标对上述疾病程度的判断、疗效观察及预后估计均有意义⑷羊水中rT3浓度可作为胎儿成熟的指标如羊水中rT3低下，提示先天性宫内甲低b4、甲状腺结合球蛋白( TBG)：甲亢时血清TBG可能降低，治疗后逐步恢复正常；甲低时则相反。

非甲状腺疾病中，肝炎、妊娠、服用避孕药时血清TBG可以增加而严重感染、重症营养不良、重症糖尿病、恶性肿瘤、急性肾功能衰竭、呼吸衰竭及肢端肥大症时，血清TBG降低5、抗甲状腺自身抗体：包括抗甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab)和抗甲状腺微粒体抗体(TM-Ab)，其参考范围：TG-Ab结合率<30%，TM-Ab结合率<15%①主要用于自身免疫性甲状腺疾病的诊断，如慢性淋巴性甲状腺炎（桥本病）时TG-Ab和/或TM-Ab的阳性率高达80%~90%②约1/4的甲状腺癌病人TG-Ab和/或TM-Ab阳性③在非甲状腺疾病中，如系统性红斑狼疮、恶性贫血、重症肌无力、糖尿病等，TG-Ab和TM-Ab也可阳性6、甲状腺球蛋白（TG）：TG是存在于甲状腺滤泡腔内的一种糖蛋白，其分子中酪氨酸残基可被碘化缩合生成T3、T4血中TG仅为少量参考范围：血清17.2±3.5 mg/L①甲状腺癌时血清TG明显升高，尤其对治疗效果追踪及甲状腺癌转移有重要意义②血清TG的增高是判断亚急性甲状腺炎活动度的参考指标，炎症控制后TG降至正常③初发甲亢、甲亢复发或治疗未缓解者血清TG升高如治疗后TG水平不下降，则复发的可能性很大㈥评价与问题：⑴血清中的T4和T3 99%以上与血浆蛋白结合，以TBG为主。

所以TBG的含量可以影响TT4和TT3如当妊娠、应用雌激素或避孕药、急性肝炎、6周内新生儿等血清TBG增高时，TT4也增高应用雄激素、糖皮质激素、水杨酸、苯妥英钠等药物，肝硬化、肾病综合征等低蛋白血症等血清TBG降低时，TT4也降低⑵FT4和FT3在血清中浓度很低，检测结果受检测方法、试剂盒质量等影响显著，参考范围差异有所差异，但随着方法的改善，FT4、FT3已成为甲状腺功能紊乱的主要诊断指标⑶药物影响：肝素可能对FT4、FT3的测定产生影响，使结果偏高甲状旁腺素与降钙素测定㈠ 甲状旁腺素测定甲状旁腺素（parathyroid hormone, PTH ）是甲状旁腺主细胞分泌的单链84肽，分子量9.5KD，血清中PTH半寿期约18minPTH是调节体内钙磷代谢的重要激素之一，作用的靶器官主要是骨、肾和小肠粘膜，总的生理效应为升高血钙，降低血磷和酸化血液PTH的合成和分泌受细胞外Ca2+浓度的负反馈调节1、适应症：钙磷代谢紊乱、甲状旁腺功能异常、甲状腺癌2、标本采集：血清或血浆3、检测方法：一般用RIA，可分别测定PTH的C端段，N端段和中间段4、参考范围：PTH羧基端 50~330 ng/L，氨基端 8~24 ng/L。

5、临床意义⑴PTH增加：见于原发性甲状旁腺功能亢进（primary hyperparathyroidism），由于良性腺体增生或肿瘤性合成及分泌过多，血钙常＞2.65mmol/L，血磷＜0.97mmol/L，24h尿钙＞7.5mmol继发性甲状旁腺功能亢进，见于各种原因所致的的血钙刺激甲状旁腺增生肥大、维生素D缺乏症、吸收不良症候群、慢性肾功能衰竭、骨软化症等⑵PTH减低：见于特发性和继发性甲状旁腺功能低下，甲状腺疾病治疗伤及甲状旁腺或甲状旁腺手术后、严重低血镁抑制PTH分泌6、评价与问题：PTH通常用RIA法测定，由于难于得到足够的人PTH标准品，可能被甲状旁腺激素相关蛋白的分析所代替氨基端不稳定，所以主要测定羧基端及中间段近年来用免疫化学发光技术检测PTH原型，其敏感度和特异性均大为提高，该法的参考范围在1~10pmol/L之间，平均值为3.42pmol/L㈡ 降钙素测定 降钙素（calcitonin, CT）是甲状腺滤泡旁细胞（又称C细胞）分泌的一种32肽，分子量3.5KDCT作用的主要靶器官是骨、肾和小肠，其生理作用为降低血钙、血磷1、适应症：钙磷代谢紊乱，甲状腺癌2、标本采集：血清或血浆。

3、检测方法：一般用RIA测定4、参考范围：血清CT 男性 0~14 ng/L，女性 0~28 ng/L5、临床意义⑴CT异常主要见于骨代谢性疾病生理状况下，机体通过CT和PTH的相互拮抗作用维持钙代谢的稳定正常妊娠和儿童生长期，血中的CT增加在原发性甲状旁腺功能亢进、肾性营养不良、慢性肾衰、恶性贫血和酒精性肝硬化时，CT增加绝经后骨质疏松时，血中CT减少⑵CT作为肿瘤标志物：血清CT浓度增高（>100ng/L）见于绝大多数甲状腺髓样癌，并被认为是其早期诊断的重要标志尤其是有家族史者应早期筛查，约75%的甲状腺髓样癌CT阳性，可作为诊断、治疗和复发监测的指标在肺小细胞癌、乳腺癌、胃肠道癌及肿瘤骨转移时，血中CT也增高肾上腺皮质激素测定肾上腺皮质由球状带、束状带和网状带构成，分别合成盐皮质激素、糖皮质激素和性激素盐皮质激素以醛固酮（aldosterone）为主，糖皮质激素以皮质醇（cortisol）为主，性激素包括雄激素（androgen）和雌激素（estrogen）这三类激素都是胆固醇的衍生物，故称为类固醇激素（steroid hormone）释放入血的糖皮质激素主要与血浆中的皮质醇结合球蛋白(cortisol-binding globulin, CBG)可逆结合。

糖皮质激素作用十分广泛，体内大多数组织的各种物质代谢都受它的调节作用盐皮质激素可促进肾脏保钠排钾，增加细胞外液容量，在维持机体水和电解质平衡等方面起重要作用肾上腺皮质还可合成少量性激素肾上腺皮质激素（主要是糖皮质激素）的合成和分泌主要受下丘脑和垂体调节轴的控制㈠ 总皮质醇测定皮质醇在血液中以三种形式存在：①蛋白结合皮质醇，占总量的90%以上，主要与CBG结合②游离皮质醇，占总量的5%以下，是皮质醇发挥生理作用的部分③皮质醇代谢产物，如四氢皮质醇皮质醇分泌有明显的昼夜节律变化，一般在上午8时左右分泌量最多，以后逐渐下降，午夜零时最少1、适应症：肾上腺皮质功能紊乱，如库欣综合征、Addison病等2、标本采集：血清或血浆、24h尿液由于肾上腺皮质激素分泌的昼夜节律性，故标本采集时间十分重要皮质醇测定一般取早上8点和夜间零时两次血样进行分析24小时尿皮质醇测定不受昼夜节律影响，但取样本时要准确记录尿量3、检测方法：皮质醇测定方法有荧光光度法、高压液相色谱、RIA等RIA快速、简便、灵敏，有商品试剂盒选用，为目前检测皮质醇最常用的方法4、参考范围：血清（浆）总皮质醇：早8时165~441nm。