
临床执业医师考试参考:弓形虫病检查项目.doc
3页临床执业医师考试参考:弓形虫病检查项目弓形虫病的病原检查1 •直接镜检取患者血液、骨髓或脑脊液、胸腹水、痰液、支气管肺泡灌洗液、眼 房水、羊水等作涂片,或淋巴结、肌肉、肝、胎盘等活组织切片,作瑞氏 或姬氏染色镜检可找到滋养体或包囊,但阳性率不高亦可作直接免疫荧 光法检查组织内弓形虫2 •动物接种或组织培养取待检体液或组织悬液,接种小白鼠腹腔内,可产生感染并找到病原 体,第一代接种阴性时,应盲目传代3次或作组织(猴肾或猪肾细胞)培 养以分离、鉴定弓形虫3.DNA杂交技术国内学者首次应用32P标记含弓形虫特异DNA序列的探针,海天医考 网整理|与患者外周血内细胞或组织DNA进行分子杂交,显示特异性杂交 条带或斑点为阳性反应特异性和敏感性均高此外,国内亦己建立多聚 酶链反应诊断本病,并与探针杂交、动物接种和免疫学检查方法相比较, 显不春具高度特异、敏感和快速等优点免疫学检查1•检测抗体所用抗原主要有速殖了可溶性抗原(胞质抗原)和胞膜抗原前者的抗 体出现较早(用染色试验、间接免疫荧光试验检测)、而后者的抗体出现较 晚(用间接血凝试验等检测)同时采用多种方法检测可起互补作用而提高 检出率由于弓形虫在人体细胞内可长期存在,故检测抗体一般难以区别 现症感染或以往感染,可根据抗体滴度的高低以及其动力学变化加以判断。
常用的检测方法有:⑴染色试验(Sabin-FeldmanDT):检测IgG抗体感染后[〜2周出现阳 性,3~5周抗体效价达高峰,以后逐渐下降,可维持多年抗体效价1: 阳性提示为隐性感染;1 : 256为活动性感染1 : 1024为急性感染其缺点 为需要活虫进行操作2) 间接荧光抗体试验(IFAT):海天医考网整理|检测IgM和IgG抗体 具灵敏、特异、快速、重复性好等优点,与DT基本一致但如有类风湿 因子、抗核抗体阳性时,可引起假阳性反应血清抗体效价1 : 64为既往 感染,余同DT.(3) 间接血凝试验(IHA):试验方法简便与DT结果符合率高但一般 在病后一个月左右出现阳性结果判断同IFAT.重复性差和致敏红细胞不稳 定与其缺点4) 酶联免疫吸附试验(ELISA):可检查IgM与IgG抗体并有灵每度高、 特异性强等优点也可用于抗原鉴定近年来在ELISA的基础上乂创建、 衍生了多种新新的测定方法,如金葡萄A蛋白(SPA)・ELISA;辣根过氧化物酶 标记SPA取代酶标第二抗体进行ELISA检测(PPA・ELISA);亲和素■生物素 (ABG)ELISA;凝胶扩散(DIG)・ELISA;斑点(DDT)-ELISA以及单克隆抗体 (McAb)-ELISA等更灵敏、更特异的方法。
⑸放射免疫试验(RIA):具有高度敏感性和特异性2 .检测抗原 系用免疫学方法检测宿主细胞内的病原(速殖子或包囊)、海天医考网整理|在血清及体液中的代谢或裂解产物(循环抗原)是早期诊断和确诊的 可靠方法国内外学者建立了 McAb・ELISA以及McAb与多抗的夹心型ELISA法检测急性患者血清循环抗原,其敏感度为能检出血清中0.4ug/ml的抗 原皮内试验以受染小白鼠腹腔液或鸡胚液作抗原常出现延迟性、结核菌素反应可用作流行病学调查目前应用不多。
